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耿学辉: 作品数：15 被引量：118H指数：7; 供职机构：首都儿科研究所更多>>; 发文基金：卫生部科学研究基金北京市科技新星计划北京市自然科学基金更多>>; 相关领域：医药卫生更多>>

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我国部分地区呼吸道合胞病毒地方株磷蛋白基因序列分析: 2000年; 目的　了解我国呼吸道合胞病毒 (RSV)地方株的P(Phosphoprotein ,P)蛋白基因状况和变异特征。方法　选取不同地区具有不同流行特征的 6株RSV地方株 ,以提取的病毒mRNA为模板进行逆转录聚合酶链扩增 (RT PCR)扩增、目的基因的克隆及序列测定分析。结果　地方株和同亚型原型株之间P蛋白核苷酸序列及推导出的氨基酸序列同源性均超过 95 % ;不同亚型间存在较大差异 ,核苷酸全序列同源性低于 85 % ,尤其在 3′端非编码区及中间变异区。由氨基酸序列推导出的疏水性分析图显示 ,A、B亚型中间变异区存在疏水性的不同 ,这为解释A、B亚型间P蛋白电泳迁移率的不同提供了一种可能。结论　我国RSV地方株与原型株之间的P蛋白无论在核苷酸水平还是在氨基酸水平均存在一定的变异。; 赵林清王之梁耿学辉钱渊邓洁朱汝南万里涛刘长清常汝虚; 关键词：呼吸道合胞病毒核苷酸序列

5株呼吸道合胞病毒地方株F蛋白基因序列分析被引量：4: 1998年; 目的呼吸道合胞病毒（ＲＳＶ）Ｆ蛋白是ＲＳＶ感染免疫中最重要的病毒蛋白，为了解我国ＲＳＶ地方株Ｆ蛋白的基因状况和变异特征，随机选取北京、广州、长春和河北四个地区具有不同流行特征的ＲＳＶ地方株（Ａ亚型）５株，进行ＲＳＶＦ蛋白全基因的核苷酸序列分析。方法以提取的病毒ｍＲＮＡ为模板进行ＲＴ－ＰＣＲ扩增、目的基因的克隆及序列测定，对地方株及原型株的序列进行比较分析。结果地方株Ｆ蛋白基因与原型株Ａ２株有很高的同源性，核苷酸全序列的同源性为９５．１％～９６．１％，氨基酸同源性为９６．７％～９７．４％。核苷酸有义突变率为２２．６％～２５．９％。３非编码区的核苷酸序列比蛋白编码区变异显著。河北地方株（Ｅ７３株）在３非编码区有６个核苷酸的插入。Ｆ２亚单位的氨基酸变异高于Ｆ１亚单位。在北京地方株（ＺＨＳ１３株）Ｆ１亚单位内，由具有中和能力单克隆抗体所识别的抗原表位区中存在一个氨基酸的变异。结论我国ＲＳＶ地方株与原型株之间的Ｆ蛋白基因尽管存在一定的变异，但仍有很高的同源性。地方株间Ｆ蛋白的核苷酸、氨基酸变异的位置及形式很相似，提示我国ＲＳＶ的不同流行特征可能并非由于Ｆ蛋白的基因变异所致。; 孙晓鸥耿学辉王之梁钱渊朱汝南邓洁刘成贵常汝虚刘长清朱宗涵; 关键词：呼吸道合胞病毒 F蛋白核苷酸序列

应用逆转录聚合酶链反应鉴别呼吸道合胞病毒亚型被引量：18: 1998年; 目的为了使鉴别呼吸道合胞病毒（ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙｓｙｎｃｙｔｉａｌｖｉｒｕｓ，ＲＳＶ）Ａ、Ｂ亚型的方法更为简单、特异、有效。方法根据ＲＳＶＧ蛋白编码基因的核苷酸序列设计一套引物，其中Ｐ１为亚型间通用的引物，Ｐ２和Ｐ３分别为Ａ、Ｂ亚型特异性引物。将这些引物用于同一逆转录聚合酶链（ＲＴＰＣＲ）反应，Ａ、Ｂ亚型株的扩增产物分别为２７７ｂｐ和８６３ｂｐ，根据ＰＣＲ产物的大小即可鉴别所测毒株的亚型。用这一方法对ＲＳＶ原型株和９株我国分离株进行亚型鉴定。结果分离株８株为Ａ亚型，１株为Ｂ亚型，分型结果与单克隆抗体检测和基因序列分析完全相符。结论ＲＴＰＣＲ方法鉴别呼吸道合胞病毒亚型具有快速、简便、敏感、特异等特点。; 朱汝南耿学辉王之梁钱渊邓洁朱宗涵; 关键词：呼吸道合胞病毒聚合酶链反应呼吸道感染儿童

我国部分地区呼吸道合胞病毒分离株的亚型鉴定被引量：22: 1997年; 为了解我国部分地区呼吸道合胞病毒（ＲＳＶ）的亚型分布情况，采用单克隆抗体和免疫荧光技术，对近年来从北京、广州、南京、长春、和ＲＳＶ感染爆发流行的津冀地区分离出的共１００株ＲＳＶ进行了亚型鉴定。结果：其中９７株为Ａ亚型，３株为Ｂ亚型。提示：近年来这些地区无论是南方还是北方流行的ＲＳＶ主要为Ａ亚型；津冀地区流行性喘憋性肺炎的爆发流行也与Ａ亚型有关。; 耿学辉朱汝南孙晓鸥刘成贵杜金林邓洁陈慧中常汝虚刘长清李桦张梓荆钱渊王之梁朱宗涵; 关键词：呼吸道合胞体病毒 RSV 分离株

A亚型呼吸道合胞病毒毛细支气管炎的临床研究被引量：28: 1999年; 目的了解呼吸道合胞病毒（ＲＳＶ）的亚型感染情况及其所致毛细支气管炎的临床特征。方法（１）对１９９５年冬～１９９７年春住院的８５例临床拟诊为毛细支气管炎的患儿进行鼻咽分泌物病毒培养、抗原检测及ＲＳＶ阳性分离株的单克隆抗体间接免疫荧光法亚型鉴定；（２）分析亚型感染病例的临床资料。结果（１）共培养出ＲＳＶ２株，阳性率为２６％，经鉴定全部为Ａ亚型株；（２）２２例Ａ亚型ＲＳＶ毛细支气管炎中幼婴（１～６月龄）占８２％，男∶女＝４５∶１；发热小于３８℃（５４％），起病２天后出现喘憋（６４％），胸部Ｘ线表现为两肺野片状阴影和肺气肿影者分别占７％和６４％。经临床Ｌｏｗｅｌ评分，８例评为重症。结论（１）１９９５年冬～１９９７年春住院ＲＳＶ毛细支气管炎的抗原亚型是Ａ亚型；（２）Ａ亚型ＲＳＶ毛细支气管炎临床特征主要有：幼婴为多，低热和喘憋出现较早等。; 陈慧中苏英姿齐春华耿学辉张梓荆; 关键词：呼吸道合胞病毒毛细支气管炎 A亚型

呼吸道合胞病毒B亚型分离株的G蛋白基因分析被引量：1: 1999年; 对一株长春地区Ｂ亚型分离株（ＣＣ１６９）的Ｇ蛋白基因进行了序列分析，结果表明：我国呼吸道合胞病毒（ＲＳＶ）分离株ＣＣ１６９同ＲＳＶＢ亚型原型株ＣＨ１８５３７的核苷酸同源性为９４％，核苷酸的有义突变率达６５％。由核苷酸推导出氨基酸序列的同源性为８９４％，氨基酸的变异全部发生在胞外区，并主要集中在一个高度保守区的两端，胞内区和跨膜区保守不变。氨基酸的变异导致了分离株既有糖基化位点的改变，又有蛋白长度的变异。此外还初步探讨了我国ＲＳＶＢ亚型分离株ＣＣ１６９的Ｇ蛋白基因同原型株之间的变异与疫苗研制中的意义。; 耿学辉王之梁钱渊朱汝南邓洁; 关键词：呼吸道合胞病毒 G蛋白核苷酸序列 B亚型

北京地区正常人群血清中呼吸道合胞病毒F和G蛋白特异性IgG抗体水平的观察被引量：3: 1996年; 以表达呼吸道合胞病毒（ＲＳＶ）Ｆ和Ｇ蛋白的重组痘苗病毒作为抗原，用间接免疫荧光法检测北京地区不同年龄组正常儿童及成人血清中ＲＳＶＦ和Ｇ蛋白特异性ＩｇＧ抗体。其结果表明：成人及产妇静脉血中有中等滴度的ＲＳＶ抗体及较低水平的Ｆ和Ｇ蛋白特异性ＩｇＧ抗体。初生婴儿脐带血中的ＲＳＶＦ和Ｇ蛋白ＩｇＧ抗体水平同母亲静脉血中的一致，表明属母传抗体。婴幼儿ＲＳＶ抗体水平在生后６个月内迅速降低，６个月以后抗体的滴度随年龄消长，７－１４岁时水平最高。Ｆ和Ｇ蛋白特异性ＩｇＧ抗体滴度在生后６个月内无明显降低，但低于大年龄组儿童。６个月后Ｆ和Ｇ蛋白抗体滴度显著升高并随年龄波动，Ｆ较Ｇ蛋白更为显著，分别在３～７岁（Ｆ蛋白）和７－１４岁（Ｇ蛋白）组中达是高滴度。从ＲＳＶ，Ｆ和Ｇ蛋白三种特异性ＩｇＧ抗体间的相关性来看：ＲＳＶ分别同Ｆ和Ｇ蛋白抗体呈现明显的相关性，但Ｆ和Ｇ蛋白特异性ＩｇＧ抗体间无明显相关性。; 耿学辉王之梁钱渊阮力丁燕李元朱汝南邓洁刘成贵朱宗涵; 关键词：呼吸道合胞病毒抗体

哮喘儿童呼吸道合胞病毒感染后血清抗F和抗G蛋白特异性IgG抗体的变化被引量：2: 1998年; 目的探讨血清抗呼吸道合胞病毒（ＲＳＶ）抗Ｆ和抗Ｇ蛋白ＩｇＧ抗体水平与哮喘儿童ＲＳＶ感染及感染后病情轻重的关系。方法以ＲＳＶ（Ｌｏｎｇ株）及表达ＲＳＶＦ和Ｇ蛋白的重组痘苗病毒为抗原，采用酶联免疫吸附试验，检测了６６例６岁以下哮喘患儿ＲＳＶ流行期间双份血清中抗ＲＳＶＦ和Ｇ蛋白特异性ＩｇＧ抗体水平。结果（１）本组哮喘患儿ＲＳＶ感染率为３５％；（２）ＲＳＶ感染组哮喘患儿血清抗Ｆ和Ｇ蛋白ＩｇＧ抗体滴度明显低于非ＲＳＶ感染组；（３）ＲＳＶ感染后哮喘中～重度发作组血清抗Ｆ蛋白ＩｇＧ抗体滴度明显低于轻度发作组；（４）哮喘患儿ＲＳＶ感染后恢复期较急性期血清抗Ｆ和Ｇ蛋白抗体滴度均有明显升高，其升高程度在不同年龄组及两种蛋白间差异均无显著意义。结论血清抗Ｆ和抗Ｇ蛋白特异性ＩｇＧ抗体对哮喘患儿ＲＳＶ感染有一定保护作用；; 姜晶陈育智王之梁耿学辉耿学辉阮力; 关键词：哮喘呼吸道合胞病毒膜糖蛋白儿童

我国流行性喘憋性肺炎呼吸道合胞病毒分离株F蛋白基因特征初探被引量：5: 1999年; 目的探讨流行性喘憋性肺炎（简称流喘肺炎）与散发肺炎呼吸道合胞病毒（ＲＳＶ）分离株Ｆ蛋白的异同。方法采用ＰＣＲ片段直接测序及克隆测序，对１１株流喘肺炎ＲＳＶ分离株及５株散发肺炎ＲＳＶ分离株Ｆ蛋白基因序列进行了分析比较。结果被检测流喘肺炎ＲＳＶ分离株中，３６％（４／１１）的毒株其Ｆ蛋白基因３′非编码区（３′ＮＣＲ）（第１７４１位核苷酸）存在６个核苷酸插入，而散发肺炎ＲＳＶ分离株均无此插入存在。结论ＲＳＶ流喘肺炎分离株与散发肺炎分离株Ｆ蛋白基因的３′ＮＣＲ有差异。; 邓洁王之梁钱渊耿学辉孙晓鸥朱汝南刘成贵; 关键词：病毒性肺炎呼吸道合胞病毒 F蛋白

呼吸道合胞病毒毛细支气管炎血清维生素A水平的变化被引量：23: 1996年; 为探讨血清维生素Ａ水平与呼吸道合胞病毒（ＲＳＶ）所致下呼吸道感染之间的关系，采用对照研究方法，对４６例确诊为ＲＳＶ感染的毛细支气管炎患儿的急性期（０，７天）和恢复期（≥１５天）血清维生素Ａ值进行动态观察，并比较急性期轻症与重症患儿血清维生素Ａ水平的差异。结果：急性期维生素Ａ值为０．９４±０．１５μｍｏｌ／Ｌ（ｘ±ｓ）与对照组比较（１．４７±０．３０μｍｏｌ／Ｌ）差异有极显著意义（ｔ＝９．９２，Ｐ＜０．０１）；恢复期维生素Ａ值为１．３８±０．３０μｍｏｌ／Ｌ，与对照组比较差异无显著意义（ｔ＝１．３１，Ｐ＞０．０５）；急性期重症患儿２０例中有１２例（６０．０％）血清维生素Ａ低于正常对照组血清维生素Ａ均值减２个标准差，而轻症患儿２６例中仅５例（１９．２％）低于此值，两组比较差异有极显著意义（χ２＝８．０６，Ｐ＜０．０１）。提示：ＲＳＶ毛细支气管炎急性期血清维生素Ａ水平明显低于正常对照组，疾病恢复期血清维生素Ａ呈回升趋势；急性期血清维生素Ａ下降程度与疾病严重程度呈平行关系。; 黄荣妍陈慧中耿学辉钱渊王之梁张梓荆; 关键词：呼吸道合胞体病毒感染维生素A 细支气管炎

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