赵昀
- 作品数：14 被引量：107H指数：6
- 供职机构：中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划“九五”国家科技攻关计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- AP-1在转录水平调控氧化低密度脂蛋白诱导的转化生长因子-β_1表达被引量：20
- 2002年
- 目的 了解转录激活蛋白 1(AP 1)是否参与调控氧化低密度脂蛋白 (Ox LDL)诱导转化生长因子 β1(TGF β1)基因的表达 ,探讨Ox LDL激活AP 1可能的信号转导途径。方法 首先利用SD大鼠TGF β1启动子缺失体 荧光素酶 (luciferase)报告基因瞬时转染系膜细胞并检测虫荧光素酶相对活性 ,找出可能的应答区域 ;然后对AP 1结合位点进行突变并加入c Jun/AP 1抑制剂 ,比较启动子活性的变化情况。利用Western印迹检测了Ox LDL对系膜细胞p38有丝分裂原激活的蛋白激酶 (MAPK)总蛋白和磷酸化水平的影响。最后 ,用凝胶阻滞法 (EMSA)观察在特异性的蛋白激酶抑制剂处理下的AP 1活性的变化。结果 对Ox LDL刺激的应答 ,TGF β1启动子 - 15 5 0到 - 84 5之间是一个正调控区域 ,- 6 2 9到 - 4 2 2之间则是一个负调控区。AP 1结合位点突变和c Jun/AP 1抑制剂均导致TGF β1启动子活性显著降低。在Ox LDL刺激下p38MPAK表现出的不是量的变化 ,而是其磷酸化水平的增加。PKC抑制剂明显地抑制了Ox LDL诱导的AP 1活性 ;与之相反 ,p38MPAK抑制剂则对AP 1活性无显著影响。结论 在大鼠肾系膜细胞 ,AP 1在转录水平参与调控Ox LDL诱导TGF β1表达的过程 ;且Ox LDL可能部分是通过PKC信号转导途径激活AP 1中的c Jun蛋白 ,再由c Jun/AP 1从?
- 周钦兰洋王远程赵昀吴兆龙
- 关键词：肾小球膜氧化低密度脂蛋白信号转导通路肾小球纤维化
- 微孢子虫RNA的制备方法被引量：4
- 2000年
- 王见杨黄可威赵昀陆长德
- 关键词：微孢子虫RNA
- 用绿色荧光蛋白进行转基因蚕研究被引量：17
- 1999年
- 绿色荧光蛋白（ＧｒｅｅｎＦｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔＰｒｏｔｅｉｎ，ＧＦＰ）基因用基因枪和压力渗透法导入蚕卵，它的表达由家蚕核多角体病毒（ＢｍＮＰＶ）的即刻早期（ｉｍｍｅｄｉａｔｅｌｙｅａｒｌｙｓｔａｇｅ，ＩＥ）蛋白基因启动子控制。在紫外灯下能观察到少数５龄幼虫身上显示绿色荧光斑点，ＰＣＲ实验证实部分蚕染色体ＤＮＡ中含有ＧＦＰ基因。
- 赵昀张峰陈秀陈秀冯晓黎徐安英冯晓黎
- 关键词：绿色荧光蛋白转基因蚕基因枪
- 利用家蚕生产非天然蚕丝的方法
- 本发明涉及蛋白质工程和DNA重组技术领域,更具体地,本发明涉及用DNA重组技术和蛋白质工程技术对蚕丝(包括对丝素蛋白重链和轻链)进行改造的方法、由此获得的性能改进的蚕丝、以及产生所述蚕丝的家蚕,以及生产所述蚕丝的方法。
- 陆长德黄君霆赵昀张峰陈秀
- 文献传递
- 微孢子虫RNA的制备方法（摘要）
- ＜正＞ 本文首次报道了抽提微孢子虫PNA的详细方法.经比较发现,用改进的异硫氰酸胍法所抽提的RNA的质量和数量均较好.抽提的RNA的质量及数量与孢子的新鲜度、孢子发芽率、孢子浓度及所有器具是否严格按照抽提RNA的要求进行...
- 王见杨黄可威赵昀陆长德
- 文献传递
- 荧光素酶报告基因在转基因蚕中的应用被引量：12
- 2000年
- 报道了在针对BmNPV的核酶转基因蚕筛选过程中利用荧光素酶报告基因的检测及鉴定结果。试验采用的质粒为含家蚕核多角体病毒(BmNPV)的即刻早期蛋白基因IE启动子荧光素酶(Luciferase)报告基因———抗NPVIE核酶基因的联合重组质粒pIELucRz。该质粒经限制性内切酶ScaⅠ线性化后,用基因枪法导入家蚕早期受精卵(G0),待G1代测定荧光素酶活性表达较高的蚕的羽化交配产卵,分别于G2、G3和G4代再用BmNPV接种筛选出对NPV抗性较高的蚕继代。其中G4代转基因蚕基因组DNA经PCR测定及Southern杂交分析显示,荧光素酶基因已插入家蚕基因组DNA,并以多拷贝形式存在。这表明荧光素酶基因是转基因蚕研究有效的报告基因之一。
- 陈秀张峰赵昀祁国荣陆长德黄君霆
- 关键词：荧光素酶核酶转基因蚕家蚕抗病育种
- 九种微孢子虫核糖体小亚单位RNA(SSUrRNA)基因拷贝数的研究被引量：2
- 2001年
- 以已克隆测序的家蚕微孢子虫 (镇江株 ,Nosemabombycis)的核糖体小亚单位RNA(SSUrRNA)编码基因(12 0 5bp)为模板 ,用随机引物合成法标记的探针 ,在与 9种微孢子虫及家蚕基因组DNA的 6种限制性内切酶的酶切产物的Southern杂交图谱中 ,9种微孢子虫基因组DNA酶切产物的杂交图谱极为相似 ,而与家蚕基因组DNA的任何一种酶的酶切产物均无杂交信号 ,表明微孢子虫和家蚕的SSUrRNA基因同源性很低或没有同源性。同时还证实了已克隆的SSUrRNA基因来源于微孢子虫基因组DNA ,不是从家蚕基因组DNA扩增而来。在酶解较为完全的酶切产物的杂交图谱中 ,微孢子虫基因组DNA中SSUrRNA基因的拷贝数至少在
- 王见杨黄可威赵昀陆长德
- 关键词：微孢子虫拷贝数基因克隆家蚕
- 肾小球系膜细胞转化生长因子-β_1基因启动子中氧化低密度脂蛋白应答元件的研究被引量：5
- 2002年
- 目的 :了解在氧化低密度脂蛋白 (Ox LDL)刺激下 ,转化生长因子 β1(TGF β1)基因启动子中顺式作用元件的应答情况。研究在大鼠肾系膜细胞中 ,Ox LDL对TGF β1基因启动子转录活性的影响作用。 方法 :用聚合酶链反应 (PCR)、酶切和亚克隆的方法 ,构建出 5个TGF β1启动子缺失体—虫荧光素酶 (luciferase)报告基因 ,利用其瞬时转染系膜细胞并检测luciferase相对活性。 结果 :在Ox LDL(10 0mg/L)刺激下 ,luciferase的活性 12h即出现 ,并于 36h达到平台期。对Ox LDL刺激的应答 ,TGF β1启动子 15 5 0到 845之间可能存在着增强子 , 6 2 9到 4 2 2之间则可能有抑制子。计算机软件分析表明 ,前者内有一转录激活蛋白 1(AP 1)精确识别位点。 结论 :在大鼠肾系膜细胞TGF β1基因启动子中 ,AP 1结合序列 (TGAGTCA)可能是应答Ox LDL的顺式作用元件。Ox LDL上调TGF β1的表达至少部分是通过AP 1蛋白来介导的 ,且Ox LDL可能通过蛋白激酶C(PKC)信号通路激活AP 1从而正调控TGF β1基因的转录过程。
- 周钦王远程兰洋赵昀陆长德吴兆龙
- 关键词：肾小球系膜细胞氧化低密度脂蛋白转化生长因子-Β1
- 九种微孢子虫核糖体小亚单位RNA（SSUrRNA）基因拷贝数的研究（摘要）
- ＜正＞ 以己克隆测序的家蚕微孢子虫（镇江株,Nosema bombycis）的核糖体小亚单位RNA（SSUrRNA）编码基因（1205bp）为模板,用随机引物合成法标记的探针,在与九种微孢子虫及家蚕基因组DNA的六种限制...
- 王见杨黄可威赵昀陆长德
- 文献传递
- 绿色荧光蛋白在家蚕细胞中的表达被引量：6
- 1997年
- 利用家蚕细胞质肌动蛋白基因（A3）启动子和NPV病毒即刻早期蛋白IE启动子在家蚕细胞中表达GFP，实验结果表明是可行与有效的。
- 张峰赵昀黄荣祁国荣陆长德陈秀黄君霆
- 关键词：GFP家蚕细胞
