郁心
- 作品数：7 被引量：9H指数：2
- 供职机构：苏州大学更多>>
- 发文基金：国防科技工业技术基础科研项目江苏省卫生厅科研基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 生长抑制因子4基因表达对K562细胞生长的影响被引量：3
- 2007年
- 目的研究生长抑制因子4(ING4)基因表达对 K562细胞增殖的影响。方法将经过定点突变技术人源化改造的 ING4(鼠→人)生长抑制因子4基因酶切并连接到 pAdTrack-CMV 转移质粒上,然后与腺病毒质粒 pAdEasy-1共转化 BJ5183细菌,获得重组腺病毒质粒 pAdEasy-1-pAdTrack-CMV-hING4,将它转染 QBI-293A 细胞后收获重组腺病毒 Ad-hING4(以下简称为 Ad-ING4)。将 Ad-ING4感染 K562细胞,光学显微镜下观察病毒感染前后细胞形态的变化,免疫细胞化学分析凋亡因子的改变,激光扫描共聚焦显微镜观察 K562细胞的凋亡,流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡率。结果成功构建了人 ING4腺病毒质粒,获得高滴度的重组腺病毒 Ad-ING4,用它感染 K562细胞72 h后,FCM 法测定细胞凋亡率为19.7%,与空病毒对照组相比差异有统计学意义(P<0.01),ING4基因能下调 K562细胞 bcl-2的表达并上调 bax 的表达,多种方法检测结果表明 ING4基因能抑制 K562细胞生长,诱导凋亡。结论重组腺病毒 Ad-ING4可以显著抑制 K562细胞的生长。
- 郁心张海峰王金志谢宇锋杨吉成缪竞诚
- 关键词：细胞凋亡
- 人LIF基因的克隆、表达及功能研究
- 目的：克隆人白血病抑制因子/(LIF/)基因，构建真核表达载体并进行表达，检测表达产物对HL-60白血病细胞的作用，同时观察经LIF基因修饰的ECV-304细胞对脐血造血干//祖细胞/(HSC//HPC/)体外培养的影响...
- 郁心
- 关键词：真核表达HL-60细胞细胞凋亡CD34+细胞
- 文献传递
- Ad-LIF-OSM双基因转染饲养细胞对脐血造血细胞体外增殖和分化的影响被引量：1
- 2011年
- 目的构建表达人白血病抑制因子（LIF）和抑瘤素M（OSM）双基因的WI-38人胚肺成纤维细胞，并以此细胞作为饲养层细胞观察其对CD34造血干／祖细胞体外增殖和分化的影响。方法以双启动子转移载体pAdTrack-CMV-LIF-polyA＋promoter。为基础，将OSM基因片段酶切后插入，构建出转移质粒pAdTrack-CMV-LIF-polyA＋promoter。OSM。将构建正确的转移质粒与腺病毒骨架质粒共转化，获得重组腺病毒载体pAdEasy-1-pAdTrack-CMV-LIF-polyA＋promoter。OSM，通过包装，收获重组腺病毒（Ad-LIF-OSM）。将重组腺病毒感染饲养层细胞，经RT．PCR、ELISA法检测外源基因在细胞中的表达；体外与CD34造血干／祖细胞共培养后，通过Transwell法和细胞计数检测，比较各实验组干／祖细胞体外扩增与分化情况。结果测序结果显示重组载体中的LIF和OSM基因序列正确；转基因饲养层细胞中能检测到外源LIF和OSM基因的转录和表达；外源LIF和OSM基因在造血干／祖细胞体外培养中能够发挥作用。结论成功构建携带人LIF和OSM的双基因重组腺病毒载体（Ad-LIF-OSM），Ad-LIF．OSM在造血干／祖细胞体外培养的过程中能够有效地扩增CD34造血干／祖细胞，并延缓其分化。
- 包婉蓉郁心盛伟华张凤娟王家融杨吉成缪竞诚
- 关键词：白血病抑制因子抑瘤素M
- 选择肿瘤基因治疗策略的原则及研究进展被引量：2
- 2006年
- 郁心杨吉成缪竞诚
- 关键词：肿瘤基因治疗
- IL-24在髓系白血病生物疗法基础研究中的应用
- 第一部分含IL-24的培养体系对CIK细胞生物学活性的影响 目的：观察IL-24对CIK细胞生物学活性的影响，探寻增强CIK细胞毒活性的有效方法。 方法：分离人外周血单个核细胞，用含有或不含IL-24的培养体系体外诱...
- 郁心
- 关键词：髓系白血病IL-24基因CIK细胞抗肿瘤作用生物疗法
- 文献传递
- rhLIF与IL-24基因协同诱导HL-60细胞的凋亡被引量：3
- 2007年
- 目的:构建能稳定表达白血病抑制因子(LIF)的转基因细胞,并研究所表达的LIF与IL-24基因在诱导HL-60细胞凋亡方面的协同作用。方法:用真核表达质粒pcDNA3-LIF转染ECV304细胞,G418筛选阳性细胞,收集阳性细胞和培养上清,RT-PCR检测LIFmRNA的表达。同时在已转化重组腺病毒质粒的大肠杆菌中抽提质粒pAdEasy-1-pTrack-CMV-IL-24,用PacI酶切使重组腺病毒质粒线性化,脂质体转染QBI-293A细胞,收获Ad-IL-24腺病毒子。将重组病毒子(Ad-IL-24)感染HL-60细胞,同时加入含LIF的培养上清,并设对照组,RT-PCR检测IL-24 mRNA表达,光镜下观察HL-60细胞形态的变化,激光扫描共聚焦显微镜观察细胞凋亡改变,流式细胞仪检测细胞凋亡率,免疫细胞化学分析凋亡因子的改变。结果:成功构建能稳定表达LIF蛋白的转基因细胞;获得高滴度的重组腺病毒Ad-IL-24,用它感染HL-60细胞后,能检测到IL-24 mRNA的表达。各种检测方法表明LIF、IL-24基因都能抑制HL-60细胞生长、诱导凋亡,且两者具有协同作用。结论:LIF、IL-24基因都能抑制HL-60细胞生长,诱导凋亡,两者具有协同作用。
- 郁心叶震敏盛伟华杨吉成缪竞诚
- 关键词：LIFIL-24基因HL-60细胞凋亡
- 造血干细胞及相关细胞因子
- 2006年
- 血液中的血细胞均来自造血干细胞,它独特的生物学特点为许多疾病的治疗开辟了新的途径,HSC的增殖、存活及定向分化受到多种因子的调控。如何在体外通过各种方法大量扩增造血干/祖细胞,又保持其体内造血重建能力显得尤为重要。
- 郁心缪竞诚
- 关键词：造血干细胞细胞因子类造血系统基因扩增
