郭佳茹
- 作品数:7 被引量:9H指数:2
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- 利用番茄黄化曲叶病毒侵染性克隆转化烟草获得抗病突变体
- 2012年
- 为了获得烟草抗番茄黄化曲叶病毒(TYLCV)突变体材料,以含有番茄黄化曲叶病毒侵染性克隆PTYj01的农杆菌EHA105侵染转化烟草叶片,用50 mg/L卡那霉素对愈伤组织进行筛选,愈伤组织继代培养120 d左右后进行植株再生。挑取表型正常、无TYLCV病症的再生烟草45株,经PCR鉴定均整合有TYLCV DNA序列。将表型正常的再生植株移栽,温室接种烟粉虱传毒鉴定再生烟草在整个生育期对TYLCV的抗性,共获得8株表型正常、无TYLCV病症的烟草。对这8个抗性植株T2代烟草进行农杆菌注射法和接种烟粉虱鉴定,发现T2-2、T2-7的T2代分离群体中有约75%的植株没有发病症状;对这2个株系的抗性植株进一步进行卡那霉素抗性鉴定,发现其卡那霉素的抗性也符合3︰1的分离比例,说明株系T2-2、T2-7可能发生了抗TYLCV突变。可见,通过对侵染性克隆转化的烟草进行体细胞离体筛选,获得抗TYLCV突变体的方法是可行的。
- 袁洪波郭佳茹何冰陈天子杨郁文吴丹张保龙刘蔼民
- 关键词:番茄黄化曲叶病毒侵染性克隆烟草体细胞无性系再生植株
- RNAi和GroEL介导的双价抗番茄黄华曲叶病毒(TYLCV)的研究
- 番茄黄化曲叶病毒(TYLCV)属于双生病毒科菜豆金色花叶病毒属,由烟粉虱传播引起番茄黄化曲叶病毒病(TYLCVD),目前该病毒病已在世界范围内多个国家和地区的烟草、番茄等作物上相继发生,给作物的生产造成巨大的损失。为了控...
- 郭佳茹
- 关键词:分子伴侣抗病品种
- RNAi和GroEL介导的双价转基因番茄对TYLCV的抗性被引量:2
- 2014年
- 本研究将已构建的SUC2-GroEL和pBI121-AC1-AC2植物表达载体共转化番茄,共获得19株卡那霉素抗性再生植株。经过PCR和RT-PCR检测,初步获得转SUC2-GroEL载体的阳性植株5株,转pBI121-AC1-AC2载体的阳性植株3株以及转SUC2-GroEL/pBI121-AC1-AC2双载体的阳性植株2株。利用TYLCV侵染性克隆农杆菌注射接种法对T0代转基因阳性植株进行抗性鉴定,获得抗TYLCV的转基因植株7株。对T0代未扩出病毒条带的T1代植株进行抗性鉴定,结果发现转SUC2-GroEL、pBI121-AC1-AC2、SUC2-GroEL/pBI121-AC1-AC2不同载体的株系植株中平均带毒率依次是35%、25%和15%,推断转双基因的植株的抗病能力优于转单个基因植株的抗病能力。
- 杨玛丽张保龙郭佳茹赵统敏余文贵赵丽萍王银磊
- 关键词:番茄黄化曲叶病毒共转化转基因番茄
- RNAi和GroEL介导的双价抗番茄黄化曲叶病毒(TYLCV)的研究
- 番茄黄化曲叶病毒(TYLCV)属于双生病毒科菜豆金色花叶病毒属,由烟粉虱传播引起番茄黄化曲叶病毒病(TYLCVD),目前该病毒病已在世界范围内多个国家和地区的烟草、番茄等作物上相继发生,给作物的生产造成巨大的损失。为了控...
- 郭佳茹
- 关键词:GROEL共转化抗病鉴定
- 文献传递
- LeHT1、Permease基因在抗、感番茄黄化曲叶病番茄中的表达特征被引量:1
- 2012年
- 选用分别含有抗番茄黄化曲叶病(TYLCD)基因Ty-1、Ty-2和Ty-3的3种抗病番茄材料(分别简称TY-1、TY-2和TY-3)和感病番茄品种(苏粉9号),利用携带TYLCV的烟粉虱对所选番茄材料幼苗接种病毒,从核酸水平检测抗病品系和感病品种的病毒侵入时间差异,并检测接种病毒前后己糖转运基因(LeHT1)和透性蛋白基因(Permease)在转录水平上的表达量变化。结果显示,感病品种与抗病品系TY-2在接种第2 d便检测到病毒,抗病品系TY-1和TY-3分别在3 d、15 d检测到病毒,说明病毒侵入时间早晚与番茄的抗病性没有直接关系。感病品种和抗病品系TY-1分别在接种后7 d、20 d有明显的发病症状,抗病品系TY-2和TY-3整个生育期均无发病症状。感病品种接种前LeHT1无明表达,接种后随时间增加表达量先上升后下降;抗病品系TY-2、TY-3在接种前有较高的表达量,接种后随时间增加呈下降趋势,抗病品系TY-1在接种后5 d时降至最低,随后稍有增加。接种后,Per-mease基因在感病品种中表达量显著提高,7 d后略有降低;抗病品系TY-1的Permease基因表达量先降低,15 d时表达量回升;抗病品系TY-2的Permease基因在接种后的表达量增加;抗病品系在TY-3中,Permease基因在接种前后表达水平变化不大,直至15 d时略有升高。接种前、后LeHT1和Permease基因在不同抗病材料和感病材料中具有不同的表达特征,表明不同抗源可能含有不同的抗病信号通路和抗病机制。
- 何鑫赵统敏郭佳茹张保龙陈天子赵丽萍杨玛丽余文贵
- 关键词:番茄
- 烟草抗番茄黄化曲叶病毒的体细胞无性系突变体的离体筛选方法
- 本发明涉及烟草抗番茄黄化曲叶病毒的体细胞无性系突变体的离体筛选方法,属于生物技术领域。以含有番茄黄化曲叶病毒(TYLCV)侵染性克隆的农杆菌转化烟草叶片,使TYLCV在烟草离体细胞内大量复制而产生病毒筛选压力,通过长时间...
- 余文贵张保龙郭佳茹袁洪波陈天子杨郁文
- 文献传递
- 海岛棉MYB转录因子GbMYB5基因启动子的克隆及其在拟南芥中的表达特性分析被引量:5
- 2012年
- 海岛棉GbMYB5基因属于MYB家族转录因子,该家族基因可能参与调控与生物或非生物逆境相关的一系列基因表达。为了进一步研究该基因的功能,利用PCR技术从棉花基因组DNA中分离到GbMYB5基因上游2.2 kb的启动子序列。软件分析和预测结果表明,该序列具有典型的启动子结构,并含有多种光响应元件、脱落酸和赤霉素等激素响应顺式作用元件、干旱等逆境胁迫响应顺式作用元件以及水杨酸响应顺式作用元件。将克隆到的启动子序列置换PBI101中的CaMV35S启动子,驱动其下游的GUS基因,构建植物表达载体pGbMYB5-GUS,通过花序浸染法转化拟南芥,获得转基因植株。组织化学染色结果表明,在GbMYB5启动子的驱动下,报告基因GUS在拟南芥的根部、叶尖部及生长点均有表达,因此该启动子可能是一个组织特异性启动子。
- 郭佳茹胡雪虹杨郁文陈天子张保龙张云华王荣富
- 关键词:海岛棉启动子拟南芥