郭子宽
- 作品数：150 被引量：701H指数：13
- 供职机构：空军总医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 肝细胞生长因子基因修饰的人骨髓间充质干细胞促进大鼠肢体血管新生被引量：10
- 2010年
- 目的评价肝细胞生长因子(Hepatocyte growth factor,HGF)修饰的人骨髓间充质干细胞(Human bone marrow mesenchymal stem cells,hMSC)体内促血管新生效应,探讨其作用机制。方法结扎Wistar大鼠右侧股动脉,建立局部肢体缺血模型。将hMSC、hMSC/Ad-HGF或PBS,通过肌肉注射接种于缺血区,21d后以对侧肢体为正常对照,进行激光多普勒灌注成像测定、HE染色和免疫组化检查,评价骨骼肌微血管密度。以MTT、Transwell及内皮细胞体外管状结构形成实验,评价hMSC/Ad-HGF对血管内皮细胞的体外增殖、迁移及成管状能力的影响。结果 21d后,hMSC/Ad-HGF和hMSC组血流灌注水平明显高于对照组(P<0.01),前者接近PBS组,显著高于hMSC组(P<0.05)。组织学分析表明,每高倍视野肌肉组织中,hMSC/Ad-HGF组微血管数量最高,PBS组和hMSC组次之,对照组最低(P<0.01)。hMSC/Ad-HGF培养上清可明显促进ECV304细胞的增殖,刺激作用高于表皮生长因子(20ng/mL,P<0.001);促进细胞跨膜迁移和管状样结构形成,强于表皮生长因子。结论 hMSC/Ad-HGF可促进血管内皮细胞的增殖、迁移及血管结构重建,从而引发血管新生效应。
- 刘滋康具星爱靳继德秦宜德郭子宽
- 关键词：间充质干细胞肝细胞生长因子血管新生基因转移
- 自体骨髓间充质干细胞治疗矽肺的观察被引量：7
- 2011年
- 目的 探讨自体骨髓问充质干细胞（BMSCs）移植治疗矽肺的安全性和治疗作用。方法选取我院确诊的10例矽肺患者，经医学伦理委员会批准，患者签署知情同意书后，无菌抽取患者骨髓液100ml，体外分离、纯化培养BMSCs，收获第3代BMSCs5×10^7个，细胞质量检测合格后，坩生理盐水50ml稀释，静脉滴注回输，每周1次，连续3次，其中3例患者采用肝细胞生长闪子（HGF）基因修饰的自体BMSCs输注。移植后6个月、9个月，观察患者的临床症状、胸部cT、x线胸片、肺功能、T细胞亚群、血清中IgG、铜蓝蛋白（CP）等指标。结果治疗9个月后，所有患者咳嗽、咳痰、胸闷症状基本消失；肺功能：最大肺活量（FVC）从治疗前平均（71．2％±17．O％）提高到（84．0％±10．9％），第1秒最大呼气最（FEV。）从治疗前平均（67．5％±17．7％）提高到（80．6％±14．9％），与治疗前比较，差异有统计学意义（P〈0．（）1）；血清中cP和lgG较治疗前明显下降，差异有统计‘学意义（P〈O．01）；采用HGF基『太J修饰的自体BMSCs治疗的患者胸片和肺部cT提示有不同程度好转，肺纹理较治疗前减少、清晰，双肺结节影较治疗前缩小，边缘较治疗前清晰，结节影密集及分布均较治疗前有所减少。结论自体BMSCs移植治疗矽肺对临床症状改善有一定效果，HGF基因修饰的自体BMSCs可使小结节影缩小，略有变淡，肺纹理较治疗前减少。
- 陈玲珍刘薇薇陈嘉榆余卫叶更新詹昱巫进明郭子宽
- 关键词：肝细胞生长因子矽肺
- 人骨髓间充质干细胞生物学特性及腺病毒介导的GFP标记被引量：4
- 2012年
- 目的建立人骨髓间充质干细胞(hMSCs)分离、培养以及鉴定的方法,同时应用腺病毒介导的绿色荧光蛋白(Ad-GFP)检测细胞转染的效率。方法应用人淋巴细胞分离液(Ficoll)对hMSCs进行分离,经贴壁纯化后用MTT法检测增殖能力;并对其成骨、成脂、成平滑肌诱导分别进行碱性磷酸酶(ALP)、油红O染色及α-SMA免疫细胞化学检测;采用流式细胞仪(FCM)检测细胞表面标志的表达。用Ad-GFP转染,并应用荧光显微镜与FCM检测转染效率。结果 hMSCs镜下为成纤维样形态,约在第4天进入对数增长期;分化诱导后ALP染色、Von kossa银染、油红O染色以及α-SMA均为阳性;FCM检测CD14、CD31、CD45表达阴性,CD44、CD73、CD106及PDGFRβ表达阳性;当感染复数MOI=200,细胞培养48h时感染效率较高,FCM检测显示为99.81%。结论经过对增殖、分化能力以及表面标志的分析,证明用Ficoll可以分离得到较纯的hMSCs,Ad-GFP可以很好地感染细胞,为组织工程种子细胞的体内示踪提供了途径。
- 谭云鹤种铁杨平郭子宽甘为民陈长虹翟宇强石硕文彭秀君
- 关键词：间充质干细胞细胞表面标志细胞转染
- 自体骨髓干细胞移植治疗股骨头缺血性坏死的初步报告
- 目前股骨头坏死的发病机理尚不清除，很多病人就诊时已属中晚期，可供选择的治疗方法并不多，一般来讲人工髋关节置换是唯一的治疗手段。文献上报告的早期治疗方法有：保守治疗(限制负重、中药、高压氧、脉冲电磁场、体外震波等)、股骨头...
- 王志刚王岩刘玉杰郭子宽
- 关键词：自体骨髓干细胞股骨头缺血性坏死临床疗效病理生理学血管生成
- 造血干细胞及其相关的间充质干细胞和胚胎干细胞的基础与应用研究
- 毛宁张毅郭子宽周生张明伟刘兵江小霞李秀森于晓妉
- 课题组在对造血干/祖细胞（CD34+细胞）生物学特性研究基础上，获得人CD34+细胞分离纯化、体外扩增及定向诱导分化的较理想的条件与技术手段，并依据研究结果建立了可应用于临床细胞治疗的实验方法，为临床应用奠定了基础。进一...
- 关键词：
- 关键词：造血干细胞间充质干细胞胚胎干细胞
- 人CD40-Ig融合蛋白在CHO细胞中的表达与纯化研究被引量：3
- 2001年
- 目的 建立稳定表达CD40 Ig融合蛋白的工程细胞株 ,获得大量融合蛋白以研究靶向阻断CD40∶CD40L途径防治移植物抗宿主病 (GVHD)策略的应用潜力。方法 自真核瞬时表达载体pIG 40Ig中切下CD40 Fc融合基因 ,插入pcDNA3.1载体中构建稳定表达载体。利用脂质体Lipo fectamine将该载体转染CHO细胞 ,G418筛选抗性克隆 ;夹心ELISA法检测上清中CD40 Ig融合蛋白的表达 ;Westernblot法鉴定其免疫学活性。利用有限稀释法对筛选出的混合克隆单克隆化。滚瓶法无血清大批培养工程细胞 ,ProteinA亲和层析法纯化 ,SDS PAGE后薄层扫描分析纯度。利用流式细胞术检测该蛋白与Jurkat细胞表面CD40L的结合功能。结果 CD40 Fc融合基因插入pcDNA3.1载体后构建成功稳定表达载体p3.1 40Ig ,转染CHO细胞后经 2次克隆化获得稳定表达CD40 Ig融合蛋白的基因工程细胞株 ,命名为B2。ProteinA亲和层析纯化后融合蛋白纯度达 95 %以上 ,该融合蛋白可特异结合Jurkat细胞表面的CD40L。结论 CD40 Ig融合蛋白可模仿天然分子与其配基结合 ,为研究靶向CD40∶CD40L途径的治疗制剂在防治GVHD中的潜在应用提供了有用的工具。
- 刘荷中毛宁侯春梅李秀森郭子宽吴英沈倍奋唐佩弦
- 关键词：融合蛋白CHO细胞纯化骨髓移植
- HGF修饰的MSCs治疗股骨头坏死的基础研究被引量：1
- 2010年
- 目的研究肝细胞生长因子(HGF)修饰的骨髓间充质干细胞(MSCs)治疗股骨头坏死(ONFH)的可行性。方法以40只新西兰兔为实验动物制作股骨头坏死模型,2周后随机分为MSCs组及HGF/MSCs组,透视下行股骨头钻孔后分别注入MSCs悬液及HGF/MSCs悬液,4周后处死动物,对股骨近端进行Micro-CT、组织学及免疫组化观察,了解两种方法对股骨头坏死灶的治疗差异。结果 HGF/MSCs悬液的Micro-CT影像学指标显示骨小梁数量增加,钻孔隧道消失,BMD(517.41±69.37)mg/ml,TMD(817.61±12.31)mg/ml,BVF0.61±0.11,主要指标均优于MSCs悬液组,组织学及免疫组化结果方面也有明显改善。结论 HGF/MSCs悬液可有效治疗股骨头坏死。
- 周密郭子宽王岩张树明张莉傅捷汪爱媛马建军汪劲松
- 关键词：肝细胞生长因子间质干细胞股骨头坏死
- 释放膜微粒:间充质干细胞治疗的新机制被引量：2
- 2012年
- 间充质干细胞(Mesenchymal stem cells,MSC)是一类具有自我更新和多向分化潜能的成体干细胞,具有取材方便、体外扩增能力强和免疫原性低等特点,已成为细胞治疗和组织工程的重要种子细胞。MSC治疗已经进入临床试验阶段,部分疾病已经完成Ⅲ期临床试验,证实了这种新型疗法的安全性和有效性。然而,关于MSC治疗的机制并未阐明。近几年的研究发现,间充质干细胞的分化及其旁分泌作用,可能不是其组织修复及治疗多种疾病的主要原因,而来源于间充质干细胞的膜微粒,可能是治疗过程中的主要参与者。本文就MSC膜微粒的生物学特性、作用机制及临床应用的可能性等问题进行综述。
- 李志勇郭子宽郭志坤
- 关键词：间充质干细胞分化旁分泌
- 慢性髓性白血病来源的树突状细胞的功能研究被引量：22
- 2000年
- 为研究慢性髓性白血病 (CML)来源的树突状细胞 (dendriticcell,DC)的功能 ,将CML骨髓和外周血单个核细胞在含GM CSF ,IL 4 ,TNF α的培养基中培养 7- 14天。利用流式细胞术对培养细胞进行表型鉴定 ,通过FITC DX(FITC标记的葡聚糖 )摄入实验 ,3H TdR掺入和MTT实验 ,以及LDH释放试验 ,分别检测不成熟DC对外源抗原的摄入能力 ,成熟DC对外源和内源抗原的呈递能力 ,以及细胞毒性T淋巴细胞 (CTL)对白血病细胞的特异杀伤作用。结果表明 :从CML患者骨髓和外周血中能培养出高表达CD1a ,CD86,CD80 ,HLA DR ,CD5 4和CD4的树突状细胞 ;早期DC对FITC DX有吞噬功能 ;培养至出现典型树突状结构的DC(约 7- 10天 )对异体淋巴细胞 (allo MLR)具有较强的刺激作用 ,对自身T细胞也有刺激作用 (auto MLR) ,但相对较弱 ;CML DC能诱导出对自身CML细胞有特异性杀伤作用的CTL。结论提示 ,CML
- 王黎明陈珊珊刘艳荣付家瑜于弘李金兰郭子宽
- 关键词：树突状细胞白血病细胞毒性T淋巴细胞
- 骨髓间充质干细胞移植治疗缺血性心脏病的机制被引量：5
- 2007年
- 缺血性心脏病的发病率和死亡率极高，严重威胁着人类健康。不可逆性功能心肌细胞数量的减少，造成心肌收缩功能降低，发展成为心力衰竭。目前常规的治疗手段只能缓解症状，而不能修复死亡或濒死的心肌。细胞移植作为一种新兴的生物学方法，为缺血性心血管疾病的治疗开创了一个全新的领域。
- 边素艳盖鲁粤郭子宽
- 关键词：细胞移植治疗缺血性心脏病缺血性心血管疾病收缩功能降低生物学方法
