郭露
- 作品数：9 被引量：26H指数：3
- 供职机构：第三军医大学大坪医院野战外科研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金重庆市杰出青年科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- NADPH氧化酶对培养的小鼠血管平滑肌细胞Toll样受体4介导的炎症表型的影响
- 2012年
- 目的探讨NADPH氧化酶对培养的小鼠血管平滑肌细胞（vascularsmoothmusclecell，VSMC）Toll样受体4（Toll—likereceptor4，TLR4）介导的炎症表型中的作用。方法分别采用NADPH氧化酶激动剂血小板衍生生长因子-BB（platelet—derivedgrowthfactor—BB，PDGF-BB）和抑制剂夹竹桃麻素（apocynin）处理培养的C57BL／6J和TLR4-/-小鼠胸主动脉VSMC。分别采用荧光探针二氯荧光素双醋酸盐染色法检测VSMC内活性氧（reactiveoxygenspecies，ROS）含量，酶联免疫吸附法检测VSMC白细胞介素（interleukin，IL）-6、IL-1β和肿瘤坏死因子-α（tumornecrosisfactor—α，TNF—α）表达，四甲基偶氮唑蓝染色法和Boyden小室检测VSMC的增殖和迁移。结果PDGF-BB处理可显著增高C57BL／6J和TLR4-VSMC内ROS含量，而夹竹桃麻素可抑制ROS生成。PDGF．BB处理可使C57BL／6JVSMCIL-6[（52．69±3．49）ng／ml对（35．04±2．74）rig／ml，P=0．001]、IL-1B[（79．68±2．33）ng／ml对（62．38±0．54）ng／ml，P=0．000]和TNF-α[（218．35±5．42）ng／ml对（124．74±4．59）ng／ml，P=0．000]表达显著上调，增殖（1．69±0．53对1．04±0．40，P=0．000）和迁移（42．11±4．05对1．69±0．53，P=0．000）能力均显著增强，而夹竹桃麻素预处理则可显著抑制VSMCIL-6[（42．11±4．05）ng／ml对（52．69±3．49）ng／ml，P=0．010]、IL-1B[（67．57±1．36）ng／ml对（79．68±2．33）ng/ml，P=0．000]和TNF-α[（156．18±6．98）ng／ml对（218．35±5．42）ng/ml，P=0．000]表达以及增殖（1．23±0．42对1．69±0．53，P=0．000）和迁移（42．11±4．05对52．69±3．49，P=0．000）。TLR4-VSMC经PDGF—BB和夹竹桃麻素处理后，IL-6、IL-1β和TNF-α表达以及增殖和迁移能力均无显著变化。结论NADPH氧化酶衍生的ROS参与了TLR4介导的VSMC炎症表型以及增殖和迁移，可能是其影响动脉粥样硬化发生和发展的重要机制。
- 皮燕张莉莉黎炳护高长越王景周王建红胡子成唐春花郭露李敬诚
- 关键词：NADPH氧化酶炎症
- 大胞饮途径介导血管平滑肌细胞内脂滴聚集被引量：3
- 2018年
- 目的探讨大胞饮途径是否介导血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)内脂滴聚集。方法组织块贴壁培养法培养VSMCs;免疫荧光染色鉴定原代VSMCs;天然低密度脂蛋白(nLDL,50、200、800μg/mL)及脂多糖(LPS,200 ng/mL)刺激培养VSMCs,构建泡沫细胞模型;流式细胞术检测VSMCs对大胞饮示踪剂Lucifer Yellow(LY)和Di I标记的nLDL(Di I-nLDL)的摄取;油红O染色鉴定VSMCs内脂滴聚集。结果 (1)LPS刺激可促进VSMCs对nLDL呈浓度依赖性地摄取增加,导致细胞内脂滴的聚集逐渐增多。(2)200 ng/mL LPS刺激VSMCs 6 h,VSMCs对LY的摄取增加75%(P<0.01),对Di I-nLDL的摄取增加76%(P<0.01)。(3)应用胞饮抑制剂LY294002后,VSMCs对Di I-nLDL的摄取减少约29%(P<0.01),VSMCs内脂滴聚集明显减少。结论 LPS刺激诱导VSMCs通过大胞饮途径摄取nLDL,从而增加细胞内脂滴的聚集,促进平滑肌源性泡沫细胞形成。
- 陈雪王旭郭露李敬诚张莉莉
- 关键词：泡沫细胞血管平滑肌细胞脂多糖
- oxLDL通过PPARγ-ABCG1通路促进血管平滑肌细胞泡沫化被引量：7
- 2015年
- 目的探讨氧化低密度脂蛋白(ox LDL)促进血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)泡沫化是否与过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferator-activated receptorγ,PPARγ)-三磷酸腺苷结合盒转运子G1(ATP-binding cassette transporter G1,ABCG1)通路调节相关。方法组织贴块法培养原代VSMCs;细胞免疫荧光染色鉴定原代VSMCs;BODIPY染色定性检测细胞内脂质沉积,酶促比色法定量检测细胞内总胆固醇沉积的量;Western blot检测VSMCs中PPARγ、ABCG1蛋白表达情况。结果 1Ox LDL作用VSMCs 48 h后脂质沉积增加;2Ox LDL作用VSMCs PPARγ蛋白表达量下降约53%(P<0.01),ABCG1蛋白表达量下降约48%(P<0.05);3罗格列酮激动PPARγ后,ABCG1蛋白表达量较单独的ox LDL组增加约147%(P<0.05),VSMCs中脂质沉积明显减少。结论ox LDL通过PPARγ-ABCG1通路促进血管平滑肌细胞泡沫化。
- 曹小洁张莉莉郭露黎炳护皮燕廖少琼龙春燕刘赟尹延伟李敬诚
- 关键词：泡沫细胞OXLDLPPARΓABCG1
- TLR4通过下调ABCA1表达促进平滑肌源性泡沫细胞形成被引量：2
- 2014年
- 目的探讨Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)促进平滑肌源性泡沫细胞的形成是否与三磷酸腺苷-结合盒转运子A1(ATP-binding cassette transporter,ABCA1)表达异常相关。方法组织贴块法培养原代血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs);细胞分为野生型(Wild type)空白对照组、Wild type氧化低密度脂蛋白(oxLDL)组、TLR4敲除(TLR4-/-)空白对照组和TLR4-/-oxLDL组;油红O染色观察VSMCs内脂质聚集,并用异丙醇萃取油红O测定光密度值;RT-qPCR、Western blot检测VSMCs中TLR4、ABCA1、IL-1β及TNF-αmRNA和蛋白表达水平;细胞免疫荧光染色鉴定原代VSMCs及观察核转录因子-kappa B(NF-κB)核转位。结果①Wild type oxLDL组中见细胞内大量脂滴形成,油红O光密度值为Wild type空白对照组的2.3倍(P<0.01);TLR4-/-oxLDL组中只见少许脂质沉积于细胞内,油红O光密度值与TLR4-/-空白对照组相比无明显变化(P>0.05)。②Wild type oxLDL组ABCA1 mRNA及蛋白表达水平较Wild type空白对照组分别下降61%(P<0.05),44%(P<0.01);TLR4-/-oxLDL组ABCA1 mRNA及蛋白表达水平分别为TLR4-/-空白对照组的2.3倍(P<0.05),1.7倍(P<0.05)。③Wild type oxLDL组VSMCs中NF-κB核转位明显增多,IL-1β和TNF-αmRNA表达较Wild type空白对照组分别升高3.9倍(P<0.05),1.7倍(P<0.05);TLR4-/-oxLDL组VSMCs中无明显NF-κB核转位,仅IL-1βmRNA表达较TLR4-/-空白对照组升高1.2倍(P>0.05)。结论 TLR4及其调节的炎性反应参与平滑肌源性泡沫细胞形成过程中ABCA1表达异常。
- 郭露张莉莉曹小洁刘赟廖少琼黎炳护皮燕尹延伟李敬诚
- 关键词：泡沫细胞
- IRAK1参与调节TLR4介导的ABCA1表达下调及平滑肌源性泡沫细胞形成
- 郭露张莉莉曹小洁黎炳护皮燕刘赟胡子成李敬诚
- SIRT1激动剂通过降低ACAT1表达抑制平滑肌泡沫细胞形成被引量：2
- 2017年
- 目的探讨沉默信息调节因子1(silent mating type information regulation 2 homolog-1,SIRT1)对氧化型低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein,ox-LDL)诱导的血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cell,VSMC)泡沫化的作用和相关的分子机制。方法用组织贴块法体外培养原代VSMC,用80μg/mL ox-LDL刺激VSMC诱导泡沫细胞形成。检测SIRT1在ox-LDL刺激不同时间(24、48、72 h)的表达变化。SIRT1的活性调控分别应用SIRT1激动剂(SRT1720,SRT,1μmol/L)和抑制剂(nicotinamide,Nic,100μmol/L)进行干预。干预24 h后采用Western blot检测VSMC过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferator-activated receptorγ,PPARγ)、酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶1(A-cholesterol acyltransferase 1,ACAT1)的蛋白表达,干预48 h后采用油红O染色检测细胞内脂质沉积和泡沫细胞形成情况。应用PPARγ激动剂(Rosiglitazone,RSG,50μmol/L)和抑制剂(GW9662,10μmol/L)调控PPARγ的表达,Western blot检测VSMC中ACAT1的表达。结果 1ox-LDL诱导的VSMC泡沫细胞中,SIRT1蛋白表达在48 h降低约47%(P<0.01);油红O染色显示,SRT可以抑制VSMC泡沫细胞形成,而Nic可逆转SRT的抑制作用;2ox-LDL诱导的VSMC泡沫细胞中ACAT1的表达显著增加[(2.77±0.70),P<0.01],SIRT1激动剂SRT可显著抑制ACAT1的表达[(0.90±0.27),P<0.01],而SIRT1抑制剂Nic可阻断这一作用,升高ACAT1的表达[(2.25±0.37),P<0.05];3ox-LDL诱导的VSMC泡沫细胞中PPARγ的表达减少[(0.73±0.12),P<0.05],SIRT1激动剂SRT可上调VSMC中PPARγ的表达[(0.98±0.16),P<0.05],SIRT1抑制剂Nic抑制PPARγ的表达[(0.47±0.13),P<0.01];4PPARγ激动剂RSG可抑制ACAT1的表达[(0.73±0.09),P<0.01],而PPARγ抑制剂GW9662则上调ACAT1表达[(1.68±0.09),P<0.01]。结论 SIRT1通过上调VSMC中PPARγ表达而抑制ACAT1表达,从而抑制ox-LDL诱导的VSMC泡沫样变。
- 王旭陈雪孙梦姣张明杰郭露朱洁李敬诚张莉莉
- 关键词：泡沫细胞氧化型低密度脂蛋白过氧化物酶体增殖物激活受体Γ
- 激活TRPV1对自发性高血压大鼠血管平滑肌细胞增殖的影响被引量：4
- 2015年
- 目的探讨瞬时受体电位香草醛亚家族1(transient receptor potential vanilloid 1,TRPV1)对培养的血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)增殖的影响。方法用组织贴块法分别培养SHR和WKY大鼠的主动脉VSMCs,采用细胞免疫荧光进行鉴定。分别用辣椒素和iRTX激活和拮抗TRPV1受体,CCK-8法检测VSMCs增殖;Western blot法检测TRPV1、磷酸化-Akt(p-Akt)和总Akt(t-Akt)的蛋白表达。结果 1 SHR-VSMCs中TRPV1蛋白相对表达量低于WKY-VSMCs(0.32±0.05 vs 0.55±0.11,P<0.05);TRPV1激动剂辣椒素可显著上调SHR-VSMCs(0.65±0.19)和WKYVSMCs(0.89±0.13)中TRPV1的表达(P<0.05)。2 SHR-VSMCs的增殖能力高于WKY-VSMCs(1.30±0.07 vs 0.88±0.23,P<0.05);辣椒素呈剂量依赖性地抑制SHR-VSMCs的增殖(对照组:1.30±0.07,1μmol/L辣椒素组:0.93±0.10,10μmol/L辣椒素组:0.83±0.16,P<0.05);应用iRTX拮抗TRPV1即拮抗辣椒素的抗增殖作用(1μmol/L辣椒素组:0.93±0.10,1μmol/L辣椒素+1μmol/L iRTX组:1.23±0.14,P<0.05)。3SHR-VSMCs中Akt磷酸化水平高于WKY-VSMCs(0.44±0.02 vs0.29±0.09,P<0.05);辣椒素激活TRPV1抑制VSMCs中Akt的磷酸化(WKY-VSMCs:0.13±0.02,SHR-VSMCs:0.23±0.03,P<0.05);TRPV1拮抗剂iRTX可拮抗辣椒素作用,使WKY-VSMCs(0.37±0.07)、SHR-VSMCs(0.43±0.10)中Akt磷酸化水平升高(P<0.05)。结论激活TRPV1可能通过抑制Akt的磷酸化而抑制SHR-VSMCs增殖。
- 刘赟李敬诚尹延伟黎炳护郭露廖少琼曹小洁张明杰周毅陈磊龙春燕张莉莉
- 关键词：自发性高血压大鼠血管平滑肌细胞
- PPARδ通过下调ACAT1抑制血管平滑肌细胞泡沫样变
- 2015年
- 目的探讨过氧化物酶体增殖物激活受体δ(peroxisome proliferator-activated receptorδ,PPARδ)在血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)泡沫化过程中的作用及可能机制。方法用组织贴块法体外培养原代VSMCs;用氧化型低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein,ox-LDL)(50μg/m L)刺激VSMCs构建泡沫细胞模型,分为空白对照组及24、48、72 h组4组以检测VSMCs泡沫化过程中PPARδ的表达变化;利用PPARδ激动剂(GW0742,25 nmol/L)和抑制剂(GSK0660,1μmol/L)调控PPARδ并分为空白对照组、ox-LDL(50μg/m L)组、GW0742+ox-LDL(50μg/m L)组、GSK0660+ox-LDL(50μg/m L)组4组,刺激48 h;油红O染色及酶标仪测细胞内萃取油红光密度值检测细胞内脂质沉积;Western blot检测VSMCs中PPARδ、ACAT1蛋白表达情况以探索PPARδ在VSMCs泡沫细胞中的作用以及PPARδ和酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶1(A-cholesterol acyltransferase 1,ACAT1)的关系。结果 ox-LDL刺激下PPARδ的蛋白水平呈时间依赖地降低,其中48 h最低,下降约29%(P<0.05),随后维持在低水平表达;GW0742激动PPARδ后可明显减少VSMCs内总胆固醇含量约55%(P<0.05),而GSK0660则明显增加细胞内总胆固醇含量约20%(P<0.05);同时,GW0742可使ACAT1的蛋白表达量下降了约28%(P<0.05),而GSK0660则升高ACAT1的蛋白表达量约29%(P<0.05)。结论 PPARδ的激活可通过下调ACAT1表达抑制血管平滑肌源性泡沫细胞的形成。
- 龙春燕张莉莉孙梦娇黎炳护皮燕郭露曹小洁尹延伟廖少琼李敬诚
- 关键词：泡沫细胞过氧化物酶体增殖物激活受体Δ
- 血清胱抑素C与脑白质病变的相关性研究被引量：9
- 2016年
- 目的探讨血清胱抑素C（Cystatin C，CysC）水平和脑白质病变（white matter lesions, WMLs）的相关性。方法收集2014年7月至2015年3月本科住院患者资料，胶体金免疫增强法检测血清CysC水平，颅脑MRI检查评估脑白质病变，采用Fazekas标准分别对患者脑室旁脑白质病变（P-WMLs）和深部脑白质病变（D-WMLs）的严重程度进行评价，危险因素的分析采用有序多分类Logistic回归分析。结果共473例患者纳入研究，男性190例，年龄（65.7±9.1）岁。重度（0.82±0.18）和中度P-WMLs患者（0.78±0.15）血清CysC水平均高于轻度P-WMLs患者（0.73±0.14），重度（0.82±0.18）和中度D-WMLs患者（0.79±0.16）血清CysC水平同样高于轻度D-WMLs患者（0.74±0.14），差异均有统计学意义（P〈0.05），二者均提示随着WMLs病变程度的增加CysC水平也越高。多因素有序多分类Logistic回归分析结果显示，高水平的CysC（P-WMLs：OR=8.21，95%CI=2.18~30.88；D-WMLs：OR=7.01，95%CI=1.69~29.11）、年龄（P-WMLs：OR=5.18，95%CI=2.81~9.55；D-WMLs：OR=4.32，95%CI=2.05~9.08）和高血压（P-WMLs：OR=3.46，95%CI=2.30~5.21；D-WMLs： OR=3.52，95%CI=2.21~5.62）均为WMLs严重程度增加的危险因素。结论血清CysC水平与WMLs病变程度呈正相关；高水平CysC、高龄及高血压是WMLs病变严重程度增加的危险因素。
- 孙梦姣张莉莉黎炳护龙春燕皮燕郭露李敬诚
- 关键词：胱抑素C脑白质病变
