金聪
- 作品数：37 被引量：108H指数：5
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- 发文基金：国家科技重大专项北京市科技计划项目国家自然科学基金更多>>
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- 基于8E5细胞的HIV-1病毒载量能力验证质控品制备及评估
- 2024年
- 目的制备及评价基于8E5细胞的人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus 1,HIV-1)病毒载量能力验证质控品的均一性、稳定性和反复冻融性。方法将8E5细胞上清原液10倍梯度稀释得到浓度依次为106、105、104、103拷贝/ml的4组HIV-1病毒载量能力验证质控品,应用病毒载量分析仪进行检测,将病毒拷贝数其换算成lg值,计算均值(xˉ)、标准差(s)、变异系数(coefficient of variation,CV)、变化趋势,并对质控品的均一性、稳定性和反复冻融性进行评价。结果在4个浓度梯度的均一性评价中,各浓度组质控品的CV分别为1.2%、2.6%、1.8%和3.2%。稳定性评价实验中,在-20℃条件下,各组质控品在5个月评价期间内,检测结果不随时间延长而改变(P>0.05)。在4℃条件下,各组质控品在5周评价期间内,检测结果随时间延长而未改变(P>0.05)。在25℃条件下,各组质控品在15 d评价期间内,检测结果随时间延长而减少(P<0.05)。冻融次数影响评价中,反复冻融次数对质控品影响不大,其检测结果均在(x±2s)范围浮动。结论基于8E5细胞上清液制备的质控品,在-20℃和4℃保存条件下均一性和稳定性较好,可作为HIV-1病毒载量能力验证质控品。
- 梅朋飞米云婷朱禹静周德邓煜川金聪姚均邢文革潘品良吕毅
- 关键词：人类免疫缺陷病毒病毒载量RNA
- 不同抗原肽刺激方式对HIV特异性CD8T细胞体外增殖的影响
- 2016年
- 目的 研究人类免疫缺陷病毒（HIV）特异性CD8T细胞在体外增殖反应的影响因素。方法应用3种不同的抗原刺激方式在体外刺激HIV感染者病毒特异性CD8T细胞增殖，并比较在培养体系中添加外源性细胞生长因子IL-2对HIV特异性CD8T细胞增殖的影响。结果与将MHCI匹配HIV抗原肽直接加入外周血淋巴细胞（PBMCs）持续刺激CD8T细胞和仅刺激CD8T细胞2h这两种方法相比，从PBMCs中去除CD8T细胞获得混合抗原递呈细胞APCs，并用混合APCs结合承载抗原肽呈递给CD8T细胞可以更有效地刺激HIV特异性CD8T细胞的增殖。培养体系中添加细胞因子IL-2与不添加IL-2相比虽然明显提高CD8T细胞增殖数目，但引起非特异性增殖。结论在不添加外源性IL-2培养条件下应用混合APCs呈递抗原肽的刺激方法可通过同时递呈抗原信号和细胞共刺激信号更特异地刺激了HIV特异性CD8T细胞的有效增殖。
- 金聪涂婷牟丹蕾李群辉李涛吴昊陈华标
- 关键词：获得性免疫缺陷综合征
- 血浆HIV-1 RNA与干血斑HIV-1 DNA基因型耐药检测比较被引量：1
- 2023年
- 目的通过对不同病毒载量的同一研究对象同时进行血浆HIV-1 RNA与干血斑HIV-1 DNA的基因型耐药检测并对结果进行比较,探讨HIV-1 DNA用于耐药检测的可行性和用途。方法2021年12月采集云南省、广西壮族自治区及新疆维吾尔自治区接受ART后1年以上的HIV/AIDS患者静脉血5 mL,EDTA抗凝,分离血浆和制备成干血斑样本,分别提取病毒DNA和RNA进行pol区扩增,比较两种方法的扩增效率;并对同时扩增成功的序列利用MEGA7构建系统进化树并分析序列一致性。利用斯坦福大学HIV耐药数据库进行耐药位点分析,比较耐药性结果。结果209例样本中,来自云南82份(39.2%),来自广西壮族自治区69份(33.0%),来自新疆维吾尔自治区58份(27.8%)。105例VL<20拷贝/mL,25例20拷贝/mL≤VL<200拷贝/mL,42例200拷贝/mL≤VL<1000拷贝/mL,37例VL≥1000拷贝/mL。不同病毒载量的样本分类中,使用血浆中HIV-RNA pol区扩增成功率分别为12.4%、28.0%、69.0%、89.2%;使用干血斑中HIV-DNA pol区扩增成功率分别为39.0%、52.0%、59.5%、73.0%;血浆结合干血斑各组的扩增成功率为41.0%、56.0%、76.2%、89.2%。两种耐药检测方法同时扩增成功66例,耐药结果完全一致为98.5%,序列一致性99.7%。其中有58例(58/66,87.9%)配对样本耐药位点完全一致,8例配对样本耐药位点不完全一致。耐药位点不完全一致的配对样本中仅1例导致耐药结果不同,其他主要由混合碱基导致但未对耐药结果产生影响。结论应用干血斑HIV-1 DNA进行基因型耐药检测可以弥补目前血浆HIV-1 RNA耐药检测不足,特别是对病毒载量<1000拷贝/mL的样本,能够提高耐药检测效率。同时二者检测结果基因序列与耐药位点的一致性很好。结合干血斑样本容易制备、保存与运输的优点,提高了在偏远欠发达地区进行耐药监测的可及性。
- 梅朋飞朱禹静周德吕毅金聪米云婷邓煜川姚均
- 关键词：病毒载量脱氧核糖核酸耐药干血斑
- 2005—2019年我国HIV-1病毒载量检测实验室能力验证考核结果分析被引量：2
- 2021年
- 目的评估我国1型艾滋病病毒(HIV-1)载量检测实验室的检测能力,为进一步提高实验室检测结果的准确性提供数据参考。方法对2005—2019年由国家艾滋病参比室统一发放至各实验室的155份阳性考核样品的检测结果进行分析,按照检测方法和样本编号分组,计算均值(M)和标准差(S),通过独立样本t检验评价经济状况和参与考核年限对实验室检测结果稳定性的影响,采用单因素方差分析评价机构类型和试剂种类对实验室检测结果稳定性的影响。结果 HIV-1病载检测实验室由2005年的13家增加到2019年的267家,参评机构以疾控机构和医院为主。2015年以来,实验室考核优秀率保持在85%以上,不合格率在3%以下,影响因素分析显示,参与PT考核年限和使用检测试剂种类可影响实验室检测结果的稳定性,参与考核时长≥5年的实验室具有更好的检测稳定性。结论参加能力验证考核有助于提高我国实验室的HIV-1病毒载量检测能力。
- 薛云鹏张鑫朱祈钰刘静陶晓霞江华州张岭蒋岩金聪潘品良
- 关键词：病毒载量
- HIV-1感染者不同免疫状态的抗体及病毒载量研究被引量：3
- 2021年
- 目的了解不同免疫抑制程度下HIV-1感染者的病毒学及免疫学指标差异,分析HIV-1感染者初筛检测结果S/CO值,病毒载量检测结果以及WB带型与免疫状态之间的相关性。方法对2017-2019年河南省、北京市和云南省三个现场的639份抗病毒治疗前HIV-1抗体确证阳性样本,根据CD4细胞计数分成4个不同免疫抑制组:无免疫抑制组(CD4≥500个/μl),轻度免疫抑制组(350个/μl≤CD4<500个/μl),中度免疫抑制组(200个/μl≤CD4<350个/μl),重度免疫抑制组(CD4<200个/μl)。采用χ2检验比较不同免疫抑制组之间S/CO值、WB带型的差异,分析各项指标与免疫状态的关系。结果各免疫抑制组的S/CO值>20出现率最高(>37%)且随机体免疫力增强呈递减趋势(P<0.05),1
19%),078%),而核心蛋白(gag)的p55(<40%)、p39(<3%)出现率最低,gp41和p51的出现率在不同免疫抑制组间的差异均有统计学意义(P<0.05)。S/CO值结合病毒载量时对无、轻、中、重度免疫抑制组判定的曲线下面积分别为0.651(95%CI:0.600~0.702;P<0.05),0.587(95%CI:0.540~0.635;P<0.05),0.605(95%CI:0.560~0.650;P<0.05),0.647(95%CI:0.586~0.708;P<0.05)。结论 S/CO值联合病毒载量对于对无免疫抑制状态的判定效能最好;同时缺失gp41和p51,S/CO>20时可分别提示患者可能处于无免疫抑制状态和重度免疫抑制状态。 - 林倩茹于贺军张辉李桂英孙燕鸣杨敏金晓媚马丽英金聪肖瑶
- 关键词：HIV-1CD4S/CO值
- 重度地中海贫血患者接受基因治疗后出现HIV-1核酸检测结果假阳性1例
- 2024年
- 患者女,11岁,因患重度β型地中海贫血于2022年7月27日在深圳市儿童医院接受细胞与基因治疗(CGT)。出院后2次随访检测均发现患者的HIV-1病毒抗原及抗体筛查实验(化学发光法)结果呈阳性,2次HIV-1核酸定量试验病毒载量结果均>5000拷贝/ml,按照《全国艾滋病检测技术规范(2020年修订版)》可判定为HIV/AIDS感染。但经深入调查与比对实验发现:该患者HIV-1核酸检测结果异常,系其CGT治疗过程中自体造血干祖细胞基因组整合的慢病毒载体片段与现用HIV-1核酸检测试剂盒检测靶位点存在交叉反应所致,提示在对接受过CGT的人群进行HIV-1核酸检测时,需根据其所用基因工程载体选择合适的、不会引起交叉反应的检测平台。同时建议设计开发专门用于HIV核酸补充试验的采用多靶点不同荧光标记的检测平台,以降低艾滋病病毒感染的假阳性诊断风险。
- 钟一帆牛姬飞李越刘静王晓辉李浩甘永霞黎桂连郑陈丽李诚龙蔡一凡杨梓杰谭唯陈小珍冯铁建金聪赵锦
- 关键词：HIV-1慢病毒载体基因治疗核酸检测
- 发热伴血小板减少综合征病毒感染Balb/C小鼠和金黄地鼠的免疫病理反应被引量：3
- 2015年
- 发热伴血小板减少综合征病毒(Severe fever with thrombocytopenia syndrome irus,SFTSV)是新发传染病发热伴血小板减少综合征的致病病原,为布尼亚病毒科白蛉病毒属的一种新型病毒。为了分析SFTSV感染Balb/C小鼠和金黄地鼠引起的免疫病理反应,本研究采用两个攻毒剂量组分为高剂量组(105 TCID50),低剂量组(103TCID50),以及溶剂对照组,并采用经静脉、肌肉、脑、和腹腔4种途径分别进行攻毒。在攻毒后不同时间点取血样,应用全自动血细胞计数仪检测血细胞亚群,Real-time PCR实验检测血液中病毒RNA拷贝数,悬浮芯片实验检测血浆中IgG和IgM抗体水平。在攻毒后第14d处死动物,收集心、肝、脾、肺、肾、小肠、肌肉和脑8种组织器官进行HE染色,观察组织病理改变。研究结果显示,SFTSV可感染Balb/C小鼠和金黄地鼠,在攻毒后第7d检测到病毒特异性IgM和IgG,其中IgM在第7d达到峰值后下降,IgG在攻毒后第14d达到峰值。组织病理学分析显示病毒感染Balb/C小鼠和金黄地鼠的肝组织和肾组织出现明显病变。本研究揭示SFTSV可以感染不同品系的啮齿类动物,引起相似的免疫抗体反应和组织病理变化。
- 金聪韩颖李川顾雯蒋虹陈霆朱华魏强仇佩虹梁米芳李德新
- 关键词：BALB/C小鼠金黄地鼠免疫病理反应
- 丙型肝炎病毒感染的实验室检测方法及策略
- 2024年
- 丙型肝炎病毒(HCV)感染的实验室检测为HCV感染者的检测发现和诊断提供关键依据。近年来,HCV感染检测技术不断发展,检测试剂性能显著提高,新的检测服务策略不断出现并逐步推广应用。本文归纳了国内外HCV感染的实验室检测方法及检测策略,总结了HCV感染检测的方法,分析了新方法和新策略对我国HCV感染防控带来的影响。及时准确的实验室检测方法和有效可行的检测策略有助于HCV感染的早发现、早诊断、早治疗,最终实现2030年消除病毒性肝炎主要公共卫生危害的战略目标。
- 王宇邢文革刘中夫金聪
- 关键词：肝炎病毒属生物标记
- HIV-1核酸定量检测在云南省德宏州抗体不确定样本中的应用被引量：3
- 2022年
- 目的评估将HIV-1 RNA定量检测作为补充试验在HIV感染辅助诊断中的应用。方法应用云南省德宏州2014-2019年所有HIV抗体确证试验(WB)结果为不确定的样本,回顾性分析这些样本的HIV-1 RNA定量检测和随访结果。结果在47例WB不确定的样本中,21例HIV-1 RNA定量结果≥5000拷贝/mL,经随访均确认为HIV阳性;4例HIV-1 RNA定量结果<5000拷贝/mL,1例已接受ART,1例失访,其余2例定量检测结果分别为2100拷贝/mL和1500拷贝/mL,且经随访均确认为HIV阳性。22例HIV-1 RNA定量报告未检出(TND),经随访均确认为HIV阴性。当阳性诊断阈值设定为5000拷贝/mL,HIV-1 RNA定量检测作为补充实验的灵敏度为87.5%,特异度为100.0%,诊断效率为93.4%;当阳性诊断阈值设定为1000拷贝/mL,HIV-1 RNA定量检测作为补充实验的灵敏度为95.8%,特异度为100.0%,诊断效率为97.8%。结论HIV-1 RNA定量检测作为WB不确定样本的补充试验可以及时确认HIV感染。若降低阳性诊断阈值至1000拷贝/mL,可提高HIV感染的诊断灵敏度和诊断效率。
- 张鑫段星刘静王译葵杨锦杨世江叶润华杨跃诚金聪王继宝
- 关键词：艾滋病病毒核酸检测
- 登革3型病毒义乌流行株免疫原性研究被引量：1
- 2011年
- 目的对2009年浙江省义乌市暴发流行的登革3型病毒进行系统进化分析并初步研究其E蛋白的免疫原性。方法 RT-PCR扩增义乌分离株全基因组,利用MEGA 4分别构建E及NS1区域核苷酸及氨基酸系统发生树,进行系统进化分析。构建重组质粒JESS-ywD3prM/E397JEV-pcDNA5,IFA及Western Blot检测E蛋白在293T细胞中的表达及分泌情况。将纯化后的分泌性E蛋白免疫BALB/c小鼠,通过ELISA、中和试验等方法对体液免疫进行测定。结果登革3型病毒义乌分离株与广州GZ1D3株及印度GWL-25株核苷酸及氨基酸序列同源性均达到99%以上;其分泌性E蛋白可以刺激小鼠产生登革特异性IgG抗体及针对同型病毒的中和抗体。结论义乌分离株属于登革3型病毒亚型Ⅲ,其分泌性E蛋白具有一定的免疫原性。
- 顾雯金聪张硕张全福李建东杭小同王芹李川梁米芳李德新
- 关键词：登革3型病毒生物学特性
