钱平
- 作品数：155 被引量：282H指数：10
- 供职机构：华中农业大学更多>>
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- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 一种猪O型口蹄疫病毒重组杆状病毒及制备方法和应用
- 本发明公开了一种猪O型口蹄疫病毒重组杆状病毒及制备方法和应用，参照FMDVO型流行株基因序列，人工合成VP0、VP1和VP3基因的序列，以pFBDPHmHNM1P10eGFP质粒为骨架载体，将VP0、VP1和VP3基因连...
- 李祥敏钱平杨应立陈焕春
- 一株耐热沙门氏菌烈性噬菌体毒株及其应用
- 本发明提供了一株耐热沙门氏菌烈性噬菌体毒株及其应用，属于噬菌体技术领域。本发明从鸡白痢沙门氏菌中分离得到一株沙门氏菌烈性噬菌体，生物保藏编号为CCTCCNO：M20221380，对高温和pH值具有双重稳定性，同时对多种沙...
- 钱平高东阳柯喜泉李祥敏纪鸿越
- 口蹄疫病毒VP1-3免疫表位基因与猪γ-干扰素基因的融合表达被引量：7
- 2007年
- 将人工合成的口蹄疫病毒VP1-3上的抗原表位基因和猪γ-干扰素基因串联入原核表达载体pGEX-KG中,经酶切鉴定及测序表明重组载体中二者以接头融合的形式构建成重组表达质粒。将该质粒转化BL21后经IPTG诱导,实现了重组融合蛋白的高效表达,表达产物经SDS-PAGE和Western blot分析,重组蛋白分子量约为66 Ku,与预期大小相符。薄层扫描分析显示表达的重组蛋白占菌体总蛋白的37.4%,且主要以包涵体的形式存在。包涵体以SKL变性后,经PEG4000、氧化型谷胱苷肽和还原型谷胱苷肽复性。粗提产物以CPE_(50)测得重组蛋白在MDBK细胞上的抗水泡性口炎病毒(Vesicular stomatitis virus,VSV)的活性达到1600 U/mL,说明表达产物具有干扰素的生物学活性,为下一步基因工程疫苗的研究奠定了基础。
- 姚清侠钱平曹毅郭东春徐卓菲何雁南司有辉陈焕春
- 关键词：口蹄疫病毒抗原表位猪Γ-干扰素
- 携带猪γ干扰素基因逆转录病毒载体的构建及其在猪肾细胞(PK-15)中的表达被引量：3
- 2007年
- 将梅山猪γ干扰素基因定向插入逆转录病毒载体pLXSN(neor),构建逆转录病毒重组质粒,利用脂质体介导法将重组质粒转染逆转录病毒包装细胞系PA317,转染细胞经含G418(400μg/mL)培养基筛选一周后获得稳定产毒的PA317细胞系。从细胞培养上清中提取RNA,进行RT-PCR检测,扩增到目的片段;将上清感染猪肾细胞(PK-15),经含G418(400μg/mL、600μg/mL和800μg/mL)的DMEM筛选一周,间接免疫荧光表明表达的猪γ干扰素主要锚定于细胞膜。收取PK-15细胞上清,在牛肾细胞(MDBK)上进行干扰素抗病毒活性检测,结果显示重组病毒表达的猪γ干扰素抗水泡性口炎病毒(VSV)的活性为1200IU/106cells.48h。以表达的干扰素处理PK-15细胞后,经细胞病变抑制法测定,重组猪γ干扰素可以抵抗口蹄疫病毒(FMDV)感染。试验结果表明猪γ干扰素基因已成功插入逆转录病毒基因组并在PK-15细胞中表达,表达的重组猪γ干扰素具有较强的抗病毒生物活性。
- 姚清侠刘新文钱平郭东春陈焕春
- 关键词：猪Γ干扰素逆转录病毒PK-15细胞抗病毒活性水泡性口炎病毒
- 口蹄疫的控制策略被引量：1
- 2005年
- 口蹄疫是危害全球养殖业一种重要传染病。本文从口蹄疫预防、控制策略等方面对国外一些情况作一简单的介绍,以期为我国口蹄疫应采取怎样的预防和免疫接种策略提供参考。
- 钱平陈焕春
- 关键词：口蹄疫传染病控制策略宿主范围潜伏期FMD
- 一株贝莱斯芽孢杆菌HBXN2020、微生态制剂及其应用
- 本发明涉及微生物技术领域，特别是涉及一株贝莱斯芽孢杆菌HBXN2020、微生态制剂及其应用。本发明提供了一株贝莱斯芽孢杆菌(Bacillusvelezensis)HBXN2020，所述贝莱斯芽孢杆菌的保藏编号为CCTCC...
- 钱平王林康汪海燕李祥敏
- CSFV猪瘟病毒NS3非结构蛋白结构模型的建立
- 黄病毒科家族分为三个病毒属:黄病毒属、丙型肝炎病毒属和瘟病毒属,其中前两个病毒属里包括了一些主要的人类病原体,后一个属为动物的病原体。该科的 NS3蛋白是一个非常重要的多功能非结构蛋白,具有三种酶的活性,前三分之一区域 ...
- 徐卓菲司有辉何雁南晁彦杰钱平陈焕春
- 文献传递
- 伪狂犬病病毒Bartha-K61株TK基因的分离鉴定被引量：4
- 2000年
- 提取伪狂犬病病毒 (PRV )Bartha K61株基因组DNA ,用限制性内切酶KpnⅠ充分消化 ,回收 5 .9× 10 3 b片段(J片段 ) ,将其克隆于质粒 pUC119KpnⅠ位点上 ,获得pBKJ。用一对针对PRVTK基因的特异性引物对重组质粒进行PCR鉴定 ,证明其中含有PRVTK基因。然后用KpnⅠ、PstⅠ和BamHⅠ等限制性内切酶对其进行酶切分析 ,确定了克隆片段的物理图谱。进一步研究证实TK基因位于其中的KpnⅠ BamHⅠ或KpnⅠ PstⅠ片段中。然后亚克隆此KpnⅠ PstⅠ片段 ,并进行了序列测定。
- 仇华吉周彦君孔令达张绍杰钱平王柳童光志
- 关键词：伪狂犬病病毒TK基因
- 外源基因在甲醇酵母Pichia pastoris中的表达策略
- 2000年
- 甲醇酵母 Ｐｉｃｈｉａ ｐａｓｔｏｒｉｓ表达系统是近几年发展起来的一个真核表达系统，在其乙醇氧化酶 ＡＯＸ１基因启动子的控制下，某些外源基因（如 ＴＮＦ、ＥＧＦ等）的表达量可达克每升以上。虽然该系统是一种优良的表达系统，但有许多因素影响外源基因在其中的表达，包括外源基因的拷贝数及整合到酵母染色体的位置和方式、ｍＲＮＡ的５’和３’非翻译区（ＵＴＲ）、转录起始密码子的上下文、外源基因Ａ＋Ｔ的组成与转录和翻译的阻断、密码子的偏爱性、信号肽的特性、产物的稳定性、宿主菌的生理特性、培养基成分和培养条件等。在应用该表达系统过程中，这些因素都需加以考虑。本文将就这些因素作一概述和讨论，以有利于提高外原基因在该系统中的表达水平。
- 钱平仇华吉童光志
- 关键词：PICHIA
- 猪圆环病毒2型ORF2单克隆抗体的制备与鉴定被引量：1
- 2017年
- 以杆状病毒表达系统表达PCV2ORF2重组蛋白为免疫原,旨在获得针对PCV2的特异性单克隆抗体。用Sf9细胞表达PCV2ORF2重组蛋白,通过层析柱和超滤管浓缩法纯化PCV2ORF2重组蛋白。将纯化的PCV2ORF2重组蛋白免疫6周龄的雌性Balb/c小鼠,3次免疫后,取免疫后小鼠脾脏细胞与骨髓瘤细胞SP2/0融合,采用间接ELISA筛选,经过3次亚克隆获得4株能稳定分泌特异性抗体的杂交瘤细胞,命名为1H9、4C11、5B8和4F12株。IFA和Western blot试验说明,4株杂交瘤细胞分泌的抗体能与ORF2重组蛋白作用。特异性试验表明,4F12株单克隆抗体与猪圆环病毒2型(PCV2KQ22株)发生特异性反应,经抗体亚型鉴定1H9、4C11和5B8 3株亚型为IgG1/Kappa,4F12株为IgG2b/Kappa,1H9、4C11、5B8和4F12株小鼠腹水效价分别为105、104、106和105。表明获得了与PCV2特异性作用的单克隆抗体。
- 安春敬李祥敏张华伟莫红芳郭夏阳赵泽凯钱平赵晓玲
- 关键词：猪圆环病毒2型核衣壳蛋白单克隆抗体
