陈双庆 作品数:49 被引量:274 H指数:10 供职机构: 南京医科大学附属苏州医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 上海市科学技术委员会基础研究重点项目 苏州市科技发展计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
狂犬病毒糖蛋白修饰外泌体构建神经靶向磁共振分子探针的实验研究 2023年 目的利用狂犬病毒糖蛋白(RVG)修饰的外泌体与超顺磁性氧化铁纳米颗粒(SPION)构建神经靶向分子探针RVG-Exo-SPION,研究其表征及体外磁共振成像(MRI)效果。方法构建RVG-Lamp2b质粒并转染HEK293细胞,提取膜表达RVG的外泌体,电穿孔与SPION合成磁性分子探针RVG-Exo-SPION。采用免疫印迹、透射电镜分析(TEM)、纳米粒径追踪分析(NTA)及体外毒性分析(CCK-8法)方法分别对分子探针外泌体膜蛋白表达、形状、尺寸和生物相容性进行分析和鉴定,并通过激光共聚焦成像、普鲁士蓝染色和MRI联合评估Neuro-2A细胞对分子探针的摄取能力。结果双酶切法证明目的基因重组至pcDNA3.1质粒中,免疫印迹显示重组质粒被有效转染至HEK293细胞,外泌体标记蛋白CD9和CD63呈高表达。TEM显示修饰和电穿孔后的外泌体保持其正常的形状、尺寸和膜结构,外泌体电穿孔后能见到SPION的存在。NTA显示工程化的外泌体粒径分布窄,粒径分布峰值为140 nm。Neuro-2A细胞与1~100 mg/L不同浓度梯度的RVG-Exo-SPION共同孵育时,细胞的活力差异无统计学意义(均P>0.05)。激光共聚焦显微成像分析显示外泌体能高效地进入细胞,线形图显示实验组荧光强度更高;普鲁士蓝染色验证了RVG-Exo-SPION对Neuro-2A细胞的靶向能力,靶向组的阳性细胞标记率明显高于对照组[(75.8±5.6)%比(19.1±2.5)%),P<0.05];体外MRI显示灰阶值在不同铁浓度(5、10、25、50、100 mg/L)之间有明显区别,且在Fe≥25 mg/L的浓度下易于识别。结论基于RVG修饰外泌体构建的磁性分子探针RVG-Exo-SPION在体外实验中具有较好的稳定性和神经靶向性,为进一步用于体内研究提供了可行性。 张帆 刘晨鹭 严彩英 童明敏 陈双庆关键词:外泌体 狂犬病病毒 氧化铁磁性纳米颗粒 药物靶向 分子探针 72例麦克尔憩室的术前诊断分析 被引量:4 2020年 目的探讨不同影像学检查和内镜检查对麦克尔憩室的术前诊断价值和合理的诊断路径。方法回顾性分析2008年1月至2018年12月上海交通大学附属瑞金医院、南京医科大学附属苏州医院和苏州大学附属第一医院经手术或内镜证实的72例麦克尔憩室患者的影像学和内镜检查资料,按不同年龄(儿童组和成人组)和症状(出血组和腹痛组)分组比较不同检查方式的诊断率。结果各检查对麦克尔憩室的诊断率分别为:异位胃黏膜显像50.00%(3/6),数字减影血管造影12.50%(1/8),CT平扫7.14%(1/14),CT增强14.29%(1/7),CT小肠造影(CTE)57.45%(27/47),胶囊内镜(CE)16.00%(4/25),双气囊小肠镜(DBE)95.83%(46/48)。CTE对麦克尔憩室的诊断率高于其他CT检查方式(均P<0.05)。CTE对出血组的诊断率高于腹痛组(χ^2=6.27,P<0.05),但儿童组和成人组的诊断率差异无统计学意义(χ^2=0.59,P>0.05)。DBE的诊断率高于CE和CTE(χ^2=36.54,16.47;P<0.01),CTE的诊断率高于CE(χ^2=8.13,P<0.01)。结论诊断率高的3种检查依次为DBE、CTE、CE,CTE诊断率高于其他CT检查方式,且对出血性憩室的诊断率高。宜根据不同的年龄段和症状选择合适的诊断路径。 陈颖 唐永华 陈双庆 胡春洪关键词:麦克尔憩室 手术前期 连续低剂量X线照射对孕鼠子代海马CA1区锥体细胞增殖的影响 2010年 目的探讨孕期连续受低剂量X线照射对子代Sprague-Dawley大鼠海马回1区(CA1)锥体细胞增殖的影响,并揭示造成影响的相关机制。方法确定受孕SD大鼠25只,抽签法随机分为4个实验组(H组、M组、LI组及12组,分别接受0.09mGy/d、0.06mGy/d、0.03mGy/d、0.015mGy/d剂量的X线照射,照射18d,无间隔)及对照组(C组,接受假照射),每组5只,仔鼠分组同孕鼠。通过HE染色、Envision免疫组织化学法及图像处理系统对大鼠海马CA1区锥体细胞形态学进行观测(锥体细胞层次宽度及细胞密度变化)及胞质内细胞外信号反应激酶(ERK)1和(或)ERK2蛋白表达的检测。结果(1)孕期连续受到低剂量X线照射可以促进子代海马CA1区锥体层次宽度的增加,H组、M组、L1组及L2组的锥体层次宽度(像素)分别为129.620±38.491、116.217±1.161、118.343±20.916、122.066±13.036,高于C组(89.797±3.919),差异有统计学意义(F值分别为8.475、33.42、14.395、44.955;p值分别为0.002、0.048、0.030、0.012);但H组锥体细胞排列稀疏、松散,单位面积锥体细胞密度低于其他各组(0.1249±0.0246),差异有统计学意义(F值为4.466,P值为0.017)。(2)L1组、L2组大鼠海马CAl区ERK1和(或)ERK2阳性细胞平均吸光度值(A值)(0.3082±0.0240、0.3125±0.0412)高于C组(0.2457-t-O.0694),差异有统计学意义(F值分别为4.561、4.103,P值分别为0.044、0.035);M组及H组阳性细胞A值分别为0.2287±0.0228和0.2326±0.0331,与对照组相比较差异无统计学意义(F值分别为0.326、0.174,P值分别为0.888、0.951)。结论孕期连续受到低剂量X线照射可以促进子代海马CAl区锥体细胞发生增殖性改变,这一作用可能是通过促进细胞内ERK1和(或)ERK2蛋白表达增加来实现的,达到一定剂量时� 张炜 王培军 姜文霞 董宁欣 李铭华 张静 江虹 陈双庆 高晓龙关键词:电离 SPRAGUE-DAWLEY 海马 锥体细胞 Wnt/β-连环素与细胞外调节蛋白激酶/丝裂原活化蛋白激酶信号通路介导脑源性神经营养因子促进诱导多能干细胞分化为神经干细胞的研究 被引量:2 2017年 目的探讨Wnt/β-连环素(β-eatenin)和细胞外调节蛋白激酶/丝裂原活化蛋白激酶(ERK/MAPK)信号通路在脑源性神经营养因子(BDNF)促进诱导多能干细胞(iPSCs)分化为神经干细胞(NSCs)中的作用及相关机制。方法iPSCs传代培养、鉴定,BDNF和维甲酸(RA)诱导iPSCs分化为NSCs,流式细胞仪检测巢蛋白(Nestin)阳性细胞率。应用小分子RNA干扰技术(siRNA)分别沉默β-catenin及ERK1/2基因,并将iPSCs分为BDNF组(添加10μg/LBDNF)、siRNA-ERK/BDNF组(转染siRNA—ERK并添加10μg/LBDNF)、siRNA-β—catenin/BDNF组(转染siRNA-β-catenin并添加10μg/LBDNF)及空白对照组分化培养,逆转录聚合酶链反应(RT—PCR)及Western blotting法检测各组Writ/β-catenin和ERK/MAPK信号通路关键因子β-catenin、ERK1/2及下游转录因子c-los、c-jun、c—myc的表达。组间两两比较用最小差值显著法进行分析。结果免疫荧光染色显示iPSCs表达八聚体转录因子(Oct4)、胚胎干细胞转录蛋白(Sox2)及干细胞关键蛋白Nanog等多潜能标志物。流式细胞仪检测显示BDNF诱导iPSCs分化为NSCs的Nestin阳性细胞率为78.7%,而以RA为诱导剂的Nestin阳性细胞率为43.5%,不含诱导剂自然分化的Nestin阳性细胞率仅为7.8%。与对照组相比,BDNF组中β—catenin、ERK1/2、c—fos、c-jun及c—myc的mRNA表达明显上调(t=2.805、2.318、2.255、1.799、1.582、1.663,均P〈0.05),蛋白表达也明显上调(t=2.805、2.318、2.255、1.799、1.582、1.663,均P〈0.05)。与BDNF组相比,siRNA—ERK/BDNF组中ERK1/2的mRNA及蛋白表达均明显下调(t=1.917、2.042、1.673、1.540,均P〈0.05),c-fos、c-jun的mRNA及蛋白表达出现部分下调(t=1.022、0.907、0.848、0.801,均P〈0.05),而B-catenin及c—myc的mRNA及蛋白表达无明显改变(t=0.216、0.185、0.097、0� 陈双庆 黄敏 刘晨鹭 沈玉英 蔡庆 王培军关键词:诱导多能干细胞 神经干细胞 脑源性神经营养因子 磁共振快速检查法在乳腺癌高危人群中的应用研究 被引量:3 2018年 目的通过与磁共振常规检查法(full diagnostic protocol,FDP)的对照研究,探讨磁共振快速检查法(abbreviated protocol,AP)在乳腺癌高危人群筛查中的应用价值。材料与方法以乳腺癌高危人群为研究对象,搜集78例经病理证实的乳腺良恶性病变患者的磁共振成像资料。采用3种方法对图像进行分析,其中AP-1仅仅读取首次增强减影(first postcontrast subtracted,FAST)和最大密度投影(maximum-intensity projection,MIP)图像,AP-2读取FAST、MIP及扩散加权成像(diffusion weight imaging,DWI)图像,FDP则读取全部的MRI图像,记录阅片所需时间,计算3种方法检出乳腺癌的敏感性、特异性、阳性预测值及阴性预测值,比较其对乳腺癌的诊断准确性。结果组织病理学显示78例患者中乳腺恶性病变者32例,良性病变者46例。AP-1及AP-2两种方法中做出诊断所需阅片时间分别为(78±25) s和(91±29) s,FDP为(205±54) s,三者差异有统计学意义(F=12.355,P<0.05)。AP-1、AP-2及FDP诊断乳腺癌的敏感性分别为93.8%、100%和100%,特异性分别为76.1%、91.3%和93.5%,阳性预测值分别为73.2%、88.9%和91.4%,阴性预测值分别为94.6%、100%和100%。3种方法诊断乳腺癌的敏感性差异无统计学意义(F=2.142,P>0.05),但是AP-1的特异性明显低于AP-2(P=0.023)及FDP(P=0.017),而AP-2和FDP之间特异性的差异无统计学意义(P=0.279)。结论对于乳腺癌高危人群,AP是有效的乳腺癌筛查方法,结合DWI有助于提高乳腺癌检测的特异性。 孟优 屈睿 张帆 刘晨鹭 沈玉英 蔡庆 陈双庆关键词:乳腺肿瘤 磁共振成像 最大密度投影 扩散加权成像 肠道低张CT造影在炎症性肠病影像诊断中的作用 被引量:1 2020年 目的 评估肠道低张CT造影检查方法 在炎症性肠病的影像诊断中的作用并探讨其进一步应用价值.方法 回顾性分析41例经确诊的炎症性肠病患者的临床资料及肠道低张CT造影检查影像资料,其中溃疡性结肠炎24例,克隆恩病17例.结果 对于溃疡性结肠炎活动期的低张CT造影检查图像常见表现为肠壁节段性增厚、肠黏膜强化、结肠袋变浅消失及肠系膜小血管增生、淋巴结增大等表现.克隆恩病活动期典型表现为多节段性肠壁异常强化、肠壁不同程度增厚及肠系膜血管"梳状征"、淋巴结增大等.结论 活动期炎症性肠病在肠道低张CT造影检查的影像表现具有一定的相对特征性,作为一种无创性检查在该病的诊断中具有一定的应用价值. 王聚宝 朱文钟 沈玉英 陈双庆关键词:炎症性肠病 断层成像 造影 CAIPIRINHA与GRAPPA序列在腹部磁共振增强的比较研究 被引量:1 2017年 目的探讨CAIPIRINHA与GRAPPA序列在腹部磁共振增强的比较。方法选取68例上腹部平扫加增强的患者,分别运用CAIPIRINHA采样模式和GRAPPA采样模式对其进行磁共振检查,比较和分析两者的图像质量和采集时间。结果 CAIPIRINHA采样模式较GRAPPA采用模式缩短扫描时间,获取更好的图像质量。结论 CAIPIRINHA采样模式适合在腹部磁共振增强中应用。 钮恩斌 付冬 蔡红法 陈双庆关键词:磁共振成像 腹部 图像增强 轻度认知功能损害患者扣带后回谷氨酸多体素氢质子磁共振波谱研究 被引量:33 2013年 目的利用氢质子磁共振波谱(1H-MRS)探讨谷氨酸(Glu)水平的变化对轻度认知功能损害(MCI)的诊断价值。方法应用1.5 T磁共振扫描仪对20例MCI患者、20例阿尔茨海默病(AD)患者、20例健康对照者(NC)行多体素1H-MRS检查,测定受检者左侧大脑扣带后回、海马及额叶谷氨酸(Glu)与肌酸(Cr)的峰下面积,分析、比较各组间Glu/Cr比值的变化。组间各指标的比较采用单因素方差分析。结果在左侧扣带后回,1H-MRS显示MCI组及AD组Glu/Cr值分别为0.37±0.03及0.30±0.03,较NC组(0.42±0.03)明显降低,差异有统计学意义(F=19.36,P<0.05)。在左侧海马区,MCI组Glu/Cr值为0.40±0.03,与NC组(0.41±0.03)差异无统计学意义,但AD组Glu/Cr值(0.32±0.03)明显降低,与NC组差异有统计学意义(F=7.41,P<0.05)。在左侧额叶,MCI组及AD组Glu/Cr值(0.41±0.03、0.43±0.03)均较NC组(0.43±0.03)差异无统计学意义(F=0.84,P>0.05)。结论在1H-MRS中,左侧扣带后回Glu含量的变化可能是诊断MCI的有效生化指标之一。 陈双庆 蔡庆 沈玉英 赵中 周华关键词:阿尔茨海默病 谷氨酸 磁共振波谱学 大鼠间充质干细胞对肝肿瘤趋向性及其间质的影响 被引量:3 2010年 目的探讨大鼠骨髓间充质干细胞(BMSC)在体内对肝肿瘤微环境的趋向性以及BMSC对肝肿瘤间质的影响。方法获取大鼠BMSC,分离、培养、扩增。应用超顺磁氧化铁(SPIO)颗粒标记细胞,普鲁士蓝染色鉴定。应用walker-256细胞株肝内种植制备大鼠肝肿瘤模型。实验分为两个实验组,(1)肿瘤成块后BMSC干扰组:肝内种植walker-256细胞6~8d后,磁共振(MR)观察肝内成瘤后,大鼠尾静脉植入磁性标记的BMSC;(2)肿瘤成块前BMSC干扰组:肝内种植walker-256细胞3d后,MR观察肝内未成瘤的大鼠,于尾静脉植入磁性标记的BMSC;一个单纯肝内种植肿瘤细胞的对照组。实验组分别在BMSC移植前及移植后5、10及15d行MR扫描,每次成像后处死若干大鼠,取出肝脏及肿瘤组织分别行HE染色、普鲁士蓝染色,取BMSC移植后第10天的实验组大鼠及相应对照组大鼠组织行血管内皮生长因子(VEGF)、CDS1、vWF免疫组化染色。结果BMSC普鲁士蓝染色表明BMSC的磁标记率达90%。移植后第5、10天,实验组MR扫描T2WI显示肿瘤边缘出现结节状低信号,移植后第15天无明显低信号,对照组肿瘤信号无明显变化。普鲁士蓝染色显示移植后5、10及15d肿瘤边缘及瘤内有蓝染的BMSC颗粒。移植后第10天,两个实验组的VEGF、CD31、vWF的表达均高于对照组(F=34.05,P〈0.01;F=84.24,P〈0.01;F=7.08,P〈0.05)。结论大鼠BMSC在活体内对肝肿瘤有明显的趋向性,并在肝肿瘤内促进血管内皮的生成。 李铭华 陈双庆 邵志红 张炜 江虹 王培军关键词:骨髓间充质干细胞 磁共振成像 肝肿瘤 超顺磁性氧化铁 低剂量CT联合全模型迭代重建对肺磨玻璃结节的诊断价值研究 被引量:5 2021年 目的探讨低剂量CT联合全迭代重建算法对肺磨玻璃结节的诊断能力。方法回顾性分析经病理证实的肺磨玻璃结节患者100例,在行低剂量扫描(40 mAs,120 KeV)后分别进行混合迭代算法iDose4重建和全模型迭代算法(Iterative model reconstruction,IMR)重建,分别在右肺上、中、下叶外侧带、支气管分叉层面升主动脉内、膈肌层面降主动脉内测量噪声值,并取平均值。对比分析iDose4和IMR图像噪声值、肺磨玻璃结节各个征象的显示效能。结果IMR图像5个感兴趣区域的平均噪声值均低于iDose4图像,P值均<0.05,差异有统计学意义;在iDose4图像上纯磨玻璃结节显示39枚,IMR图像显示68枚,P值<0.05,差异有统计学意义。在iDose4图像上瘤-肺界面清晰显示74枚,IMR图像显示119枚,P值=0.001。在iDose4图像上肿瘤微血管Ⅱ型显示27例,IMR图像显示54例,P值>0.01,差异有统计学意义。结论低剂量联合IMR算法较iDose4算法具有更低的噪声。IMR算法对于纯磨玻璃结节的检出、瘤-肺界面及肿瘤微血管征Ⅱ型的显示优于iDose4算法。低剂量联合全迭代重建在肺磨玻璃结节诊断中具有较高的应用价值。 邵胜超 沈玉英 蔡庆 丁信园 陈双庆 刘运练 陈倩 刘晨鹭 赵春华关键词:低剂量