陈蓉燕
- 作品数：26 被引量：66H指数：5
- 供职机构：湖南省妇幼保健院更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金广州市科技攻关项目广东省科技计划工业攻关项目更多>>
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- 转化生长因子-β1诱导下肾小球系膜细胞Smad2的表达与Ⅳ型胶原分泌的相关性研究及来氟米特的干预作用
- 2013年
- 目的探讨转化生长因子(TGF)-β1诱导肾小球系膜细胞(GMC)中Smad2的表达与Ⅳ型胶原(ColⅣ)表达的相关性及来氟米特(LEF)的干预作用。方法建立体外培养大鼠GMC模型,经鉴定后第7代用于实验。按照对大鼠GMC模型处理方式将其分为:TGF-β1组(培养液+TGF-β1 5ng/mL),LEF-1组(培养液+LEF 5μg/mL+TGF-β1 5ng/mL),LEF-2组(培养液+LEF 50μg/mL+TGF-β1 5ng/mL)与对照组(仅加入培养液)。分别于15min,30min,1h,2h和6h收集标本,采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法测定细胞培养上清液ColⅣ表达。采用间接免疫荧光法检测各组磷酸化(P)-Smad2蛋白表达;采用荧光半定量RT-PCR法检测各组Smad2mRNA表达。结果在各时点,①ColⅣ表达量比较:TGF-β1组显著高于对照组(P<0.05),LEF-1与LEF-2组均显著低于TGF-β1组(P<0.05)。②P-Smad2表达量比较:在对照组仅少量表达,TGF-β1组表达明显升高,与对照组比较,差异有显著意义(P<0.05);LEF-1与LEF-2组的P-Smad2表达较TGF-β1组显著下降,差异有显著意义(P<0.05)。③Smad2mRNA表达量比较:在TGF-β1组表达显著高于对照组(P<0.05),而在LEF-1组与LEF-2组显著低于TGF-β1组(P<0.01);但LEF-1组与LEF-2组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。④GMC上清液中,ColⅣ与Smad2mRNA表达量呈正相关(r=0.707,P<0.05)。结论经TGF-β1刺激后,体外培养大鼠GMC中P-Smad2表达及ColⅣ表达量均增加,因此LEF可降低Smad2表达与ColⅣ表达水平,减轻细胞外基质(ECM)沉积。本研究结果为LEF的肾保护作用提供了实验依据。
- 胡雯辉于力温跃强张瑶郝志宏陈蓉燕
- 关键词：系膜细胞转化生长因子-Β1SMAD2来氟米特
- 呼吸道合胞病毒致毛细支气管炎患者肠道菌群变化分析及与病情严重程度的关系研究
- 2022年
- 目的探讨毛细支气管炎患者肠道菌群变化情况及其与病情严重程度的关系。方法选取2019年1月至2021年3月湖南省妇幼保健院普儿科收治的呼吸道合胞病毒(RSV)致毛细支气管炎的101例婴幼儿为观察组,根据《毛细支气管炎诊断、治疗与预防专家共识(2014年版)》分级方法对患儿病情进行评估,根据评估结果分为A组(轻度,41例)、B组(中度,32例)和C组(重度,28例)。选择同期体检的健康婴幼儿30例为对照组。采用细菌16SrDNA荧光定量聚合酶链式反应(FQ-PCR)方法测定各组小儿粪便中双歧杆菌(B)、大肠杆菌(E)数量,并计算B/E值;采用Pearson相关性分析对肠道微生态与毛细支气管炎病情进行相关性分析。结果观察组毛细支气管炎患儿双歧杆菌数(B值)、双歧杆菌/大肠杆菌值(B/E值)均低于对照组,大肠杆菌数(E值)高于对照组(均P<0.05);A组患儿B、B/E值均高于B组和C组,E值均低于B组和C组(均P<0.05)。Pearson相关性分析结果表明:毛细支气管炎病情严重程度与B、B/E值呈负相关性,与E值呈正相关性(均P<0.05)。结论毛细支气管炎患儿常伴有肠道微生态异常,且与病情严重程度存在一定的相关性,能为临床诊疗提供参考依据。
- 陈蓉燕
- 关键词：呼吸道合胞病毒毛细支气管炎肠道菌群病情严重程度
- 儿童肾病激素耐药型与敏感型CLNS1A基因的差异表达分析
- 郝志宏于力王丽娜陈蓉燕
- 来氟米特对转化生长因子β_1诱导的体培养的大鼠肾小球系膜细胞中Smad2表达的影响
- 2010年
- 目的观察来氟米特(leflunomide,LEF)在转化生长因子(transforming growth factor,TGF)-β_1刺激大鼠肾小球系膜细胞(glomerular mesangial cell,GMC)表达Smad2过程中发挥的作用。方法建立体外培养大鼠肾小球系膜细胞模型,经鉴定造模成功后第7代用于实验。按照对模型大鼠体外培养的肾小球系膜细胞的处理方式不同,将其分为TGF-β_1组(TGF-β_1 5 ng/mL),LEF-1组(LEF 5μg/mL+TGF-β_1 5 ng/mL),LEF-2组(LEF 50μg/mL+TGF-β_1 5 ng/mL)和对照组(无血清RPMI 1640培养液+20%胎牛血清)。分别于15 min,30 min,1 h,2 h和6 h收集标本,用间接免疫荧光法检测各组磷酸化Smad2(phosphorylation-Smad2,p-Smad2)蛋白表达变化;采用荧光半定量RT-PCR法检测各组Smad2mRNA表达变化。结果对照组磷酸化Smad2蛋白少量表达,阳性细胞率为(21.40±1.51)%。TGF-β_1组阳性细胞率为(70.00±3.23)%,30 min时表达开始升高,1 h及2 h时表达明显增高,6 h表达开始下降。各时间点LEF-1组和LEF-2组磷酸化Smad2蛋白表达下降,阳性细胞率分别为(23.60±2.80)%和(25.81±1.29)%,细胞荧光强度呈减弱趋势。与TGF-β_1组相比,LEF-1组和LEF-2组磷酸化Smad2蛋白表达下降,差异有显著意义(P<0.05)。但LEF-1组和LEF-2组与对照组比较,差异无显著意义(P>0.05)。肾小球系膜细胞中Smad2mRNA相对表达量,TGF-β_1组显著高于对照组,2 h时达高峰。LEF-1组和LEF-2组Smad2mRNA显著低于TGF-β_1组,差异有显著意义(P<0.01);但LEF-1组和LEF-2组间比较,差异无显著意义(P>0.05)。LEF-1组和LEF-2组Smad2mRNA相对表达量1h时较低,之后逐渐升高,说明随时间延长,来氟米特对体外培养的肾小球系膜细胞干预作用逐渐减弱。结论经转化生长因子-β_1刺激后,体外培养的大鼠肾小球系膜细胞磷酸化Smad2蛋白和Smad2mRNA相对表达量分别增加,来氟米特可降低Smad2蛋白和Smad2mRNA表达水平,为来氟米特的肾脏保护作用提供理论依据。
- 胡雯辉于力郝志宏温跃强张瑶陈蓉燕张又祥
- 关键词：肾小球系膜细胞转化生长因子-Β1SMAD2来氟米特
- 激素耐药型与激素敏感型肾病综合征差异表达基因分析被引量：3
- 2009年
- 目的从基因水平探讨激素耐药型（steroid—resistant nephrotic syndrome，SRNS）和激素敏感型（steroid-sensitive nephrotic syndrome，SSNS）原发性肾病综合征分子遗传学机制。方法对原发性肾病综合征（SRNS患儿3例，SSNS患儿3例）和正常对照3名提取外周血单个核细胞总RNA；纯化mRNA，逆转录合成生物素标记的cRNA探针与基因芯片杂交；GCOS软件分析各组基因差异表达情况；层次聚类和Gene Ontology数据库进行生物信息学分析；定量PCR验证芯片的基因差异表达结果。结果与正常对照组相比较，与SRNS组和SSNS组相关的差异基因共157条；聚类分析显示SSNS组与对照组基因表达差异较小，SRNS组与前两者差异明显；功能分析发现与SRNS组相关的差异表达基因主要参与细胞核内生物学活动和细胞信号转导。结论不同临床和病理类型原发性肾病综合征涉及多个不同的差异基因和生物学途径，其中HLADRB4和CLNS1A基因可能在不同类型原发性肾病综合征发病机制中发挥重要作用。
- 陈蓉燕于力郝志宏王丽娜温跃强
- 关键词：肾病综合征激素耐药基因芯片
- 肾病综合征激素耐药型与激素敏感型患儿CLNS1A基因的差异表达分析
- 目的探讨原发性肾病综合征激素耐药型(steroid-resistant nephrotic syndrome,SRNS)和激素敏感型(steroid- sensitive nephrotic syndrome,SSNS)...
- 陈蓉燕于力郝志宏王丽娜温跃强
- 文献传递
- 灵芝孢子粉对大鼠阿霉素肾病肾组织影响的实验研究被引量：3
- 2008年
- 目的探讨灵芝孢子粉对阿霉素肾病大鼠肾脏病理改变的影响。方法将正常雄性SD大鼠随机分为3组:正常对照组、模型组、治疗组。采用两次经尾静脉注射阿霉素(5mg/kg)方法建立大鼠阿霉素肾病模型,给药后即对治疗组予灵芝孢子粉胃饲(8g·kg-1.d-1)共6周。检测各组给药后第2、4和6周各项指标的变化,包括(1)24h尿蛋白定量,血尿素氮(BUN)、肌酐(Scr)、胆固醇和清蛋白。(2)各组取肾皮质进行光镜及电镜等组织病理学检测。结果24h尿蛋白定量和各血液生化指标在不同时间点和不同组别间差异均有统计学意义(P<0.01)。灵芝孢子粉于治疗的第2、4和6周显示出较明显的降尿蛋白作用,治疗组与模型组比较尿蛋白水平和血胆固醇减少,第4周、第6周时血清蛋白升高,肾功能检测显示血BUN及Scr均有不同程度改善(P<0.05)。形态学检测显示肾小球硬化程度和肾小球系膜增生率在灵芝孢子粉治疗组明显轻于模型组,差异有统计学意义(P<0.01)。结论在大鼠阿霉素肾病模型中,灵芝孢子粉显示了降低尿蛋白及减轻肾小球硬化的作用,证实灵芝孢子粉对大鼠阿霉素肾病的肾脏病理改变有早期防护作用。
- 陈蓉燕于力张蕾郝志宏钟志强
- 关键词：灵芝孢子粉肾病综合征肾小球硬化蛋白尿
- 转化生长因子-β_1/Smad信号通路在肾小球系膜细胞的表达及血管紧张素转化酶抑制剂对其影响被引量：5
- 2011年
- 目的探讨转化生长因子(transforming growth factor,TGF)-β1/Smad信号传导通路在肾小球系膜细胞(glomerular measanial cell,GMC)中的作用,观察血管紧张素转化酶抑制剂(angiotensin-converting enzyme inhibitor,ACEI)福辛普利(fosinopril,Fos)在该通路中对磷酸化Smad2/3(phosphorylationSmad2/3,P-Smad2/3)和Ⅰ型胶原蛋白(collagenⅠ,ColⅠ)表达的影响,阐明福辛普利的肾保护作用机制。方法采用经典方法进行大鼠肾小球系膜细胞复苏、培养和传代后,将其按处理方式分为3组:TGF-β1组(TGF-β15ng/mL处理);②Fos组(TGF-β15ng/mL+Fos1×10-4mol/L处理);③对照组(空白)。甲基噻唑基四唑(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)比色法分别检测3组肾小球系膜细胞增殖光密度(optical density,OD)值,计算细胞抑制率;间接免疫荧光法检测磷酸化Smad2/3表达情况;酶联免疫吸附测定(enzyme linkedi mmunosorbent assay,ELISA)法测定Ⅰ型胶原蛋白的变化,计算抑制率。结果各时间点肾小球系膜细胞增殖荧光强度比较,TGF-β1组明显高于对照组,Fos组低于TGF-β1组,差异有显著意义(P<0.05)。磷酸化Smad2/3在对照组仅极微量表达,TGF-β1组在刺激30min后,荧光强度显著增强,且集中于细胞核。与TGF-β1组相比,Fos组磷酸化Smad2/3表达下降,细胞荧光强度较弱,差异有显著意义(P<0.05)。对照组Ⅰ型胶原蛋白仅少量基础性分泌。与对照组相比,TGF-β1组在各时间点Ⅰ型胶原蛋白分泌量显著上升,差异有显著意义(P<0.05);与TGF-β1组比较,Fos组Ⅰ型胶原蛋白在15min和6h的表达量比较,差异无显著意义(P>0.05);在12h和24h比较,差异有显著意义(P<0.05)。结论人重组转化生长因子-β1能激活体外培养的大鼠肾小球系膜细胞磷酸化-Smads表达,并激活转化生长因子-β/Smads信号途径,该途径激活能致Ⅰ型胶原分泌增多,并能诱导肾小球系膜细胞增殖,其作用呈一定的时间依赖性关系。福辛普利能部分阻断转化生长因子-β/
- 邓颖于力陈蓉燕温跃强温捷郝志宏
- 关键词：肾小球系膜细胞转化生长因子-Β1SMAD蛋白血管紧张素转化酶抑制剂
- 维生素D佐治病毒性肺炎的临床研究被引量：1
- 2016年
- 目的探讨维生素D佐治病毒性肺炎的临床疗效。方法将118例病毒性肺炎患儿随机分为治疗组和对照组各59例,对照组患儿入院后均给予利巴韦林(10 mg/kg.d bid)抗病毒治疗及积极对症支持治疗,治疗组在对照组基础上于入院当晚即开始服用维生素D滴剂,两组患者均以1周为1个疗程。结果治疗前两组患儿的25-(OH)D3与Ig A水平组间比较差异均无统计学意义(P>0.05),治疗后均表现有不同程度升高,但治疗组升高程度显著大于对照组(P<0.05);治疗组的临床总有效率达到100.0%,显著高于对照组的89.8%,组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论维生素D佐治病毒性肺炎临床疗效满意,具有一定临床推广价值。
- 陈蓉燕杨湘峰
- 关键词：维生素D病毒性肺炎儿童
- 嘌呤霉素损伤小鼠肾小球足细胞系中podocin表达与分布的影响及其意义被引量：4
- 2008年
- 目的Podocin是构成肾小球足细胞裂孔隔膜(slit diaphragm,SD)完整性的重要分子,其表达异常与大量蛋白尿的形成有关。本研究采用体外培养肾小球足细胞系,探讨足细胞损伤过程中,podocin mRNA表达和分布变化与足细胞损伤的关系。方法将体外培养的足细胞采用随机数字表法设立为实验组与对照组。实验组采用嘌呤霉素(puromycin aminonucleoside,PAN)刺激(剂量为50μg/mL),分别于8 h,24 h和48 h观察细胞形态、提取总RNA和细胞免疫组化观察podocin的分布。对照组用含10%FBS的RPMI 1640培养液培养。细胞图像应用Image J图像处理软件,计算实验组与对照组在上述各时间点200倍镜下随机选择的30个细胞的相对面积,半定量RT-PCR和间接免疫荧光法检测podocin mRNA表达和分布变化。结果对照组呈星形伸出树枝状突起,相邻细胞间形成相互连接。实验组细胞体缩小,足突回缩、消失,细胞间失去相互连接。上述各时间点两组间podocin mRNA表达比较,差异无显著意义(P>0.05)。Podocin在对照组呈细丝状均匀分布于细胞核膜、细胞质及细胞膜;在实验组主要沿细胞核膜呈点线样分布,刺激后8 h和24 h细胞质有少许分布,刺激48 h后出现细胞膜、细胞质分布缺失。结论Podocin分布异常与足细胞损伤密切相关,损伤早期即有变化;podocin分布异常是足细胞损伤过程中的重要分子效应。
- 温跃强于力温捷郝志宏陈蓉燕王丽娜
- 关键词：PODOCIN嘌呤霉素
