马秀英
- 作品数：4 被引量：0H指数：0
- 供职机构：郑州大学第一附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- PTX对GPER介导的雌激素激活的子宫内膜癌细胞中PI3K／Akt信号通路的影响
- 2013年
- 目的 研究百日咳毒素（PTX）对G蛋白偶联ER（GPER）介导的雌激素激活的子宫内膜癌细胞系Ishikawa和HEC-1A细胞中磷脂酰肌醇3激酶（PI3K）／蛋白激酶B（Akt）信号通路的影响。方法采用免疫组化SP法检测Ishikawa和HEC-1A细胞中GPER蛋白的表达。将不同浓度（0、0．1、0．5、1．0μg／ml）的PTX分别处理Ishikawa和HEC-1A细胞30min后，再予上述浓度的PTX分别联合17β雌二醇（17β-E2；1×10^-6mol／L）共同处理HEC-1A细胞15min、Ishikawa细胞30min，采用蛋白印迹法检测Ishikawa和HEC-1A细胞中GPER、ERα、ERβ蛋白的表达及Akt的活化状态[Akt的活化状态以磷酸化Akt（p-Akt）／Akt表示]。结果（1）免疫组化法检测显示，在Ishikawa和HEC-1A细胞中GPER蛋白均在细胞质中呈棕黄色阳性表达。（2）蛋白印迹法检测显示，不同浓度（0、0．1、0．5、1．0μg／ml）的PTX联合17β-E2（1×10^-6mol／L）处理后，在Ishikawa细胞中，p-Akt／Akt分别为0．74±0．54、0．34±0．06、0．18±0．03、0．07±0．15，GPER蛋白的表达水平分别为0．872±0．490、0．395±0．054、0．145±0．014、0．034±0．008，随着PTX浓度的增加，p-Akt／Akt、GPER蛋白的表达水平均明显下降（P〈0．05），且当PTX浓度为1．0μg／ml时下降最显著（F=63．729，P=0．0001；F=160．284，P=0．0001）；而ERα和ER8蛋白的表达水平均无明显变化（P〉0．05）。在HEC-1A细胞中，p-Akt／Akt分别为0．73±0．09、0．26±0．14、0．11±0．03、0，GPER蛋白的表达水平分别为0．927±0．134、0．485±0．022、0．194±0．004、0，随着PTX浓度的增加，p-Akt／Akt、GPER蛋白的表达水平均明显下降（P〈0．05），且当PTX浓度为1．0μg／ml时均降至0（F=1039．321，P=0．0001；F=109．646，P=0．0001）；而ERα蛋白的表达水平无明显变化（P〉0．05），ERB蛋白呈阴性表达。结论在子宫内膜癌HEC-1A和Ishikawa细胞中，PTX阻断GPER后，可抑制�
- 郭瑞霞雷佳王新燕葛新胡冬梅马秀英李留霞乔玉环
- 关键词：百日咳毒素1-磷脂酰肌醇3-激酶
- GPER抑制剂PTX对雌激素作用下子宫内膜癌细胞增殖凋亡的影响
- 目的 观察G蛋白偶联雌激素受体(GPER)抑制剂百日咳毒素(PTX)对17β-雌二醇(E2)作用下子宫内膜癌Ishikawa细胞及HEC-1A细胞增殖、凋亡和细胞周期的影响,初步探讨阻断GPER介导的信号传导通路治疗子宫...
- 郭瑞霞乔玉环马秀英李留霞葛新胡冬梅张燕彩
- GPER抑制剂PTX对雌激素作用下子宫内膜癌细胞增殖、凋亡的影响
- 2013年
- 目的:探讨G蛋白偶联雌激素受体(GPER)抑制剂百日咳毒素(PTX)对17β-雌二醇(E2)作用下子宫内膜癌系ER阳性的Ishikawa及ER低表达的HEC-1A的细胞增殖、凋亡和细胞周期的影响,初步探讨阻断GPER介导的信号传导通路治疗子宫内膜癌的可行性。方法:选取对数生长的细胞随机分为空白对照组(不加任何试剂)、阴性对照组(加10-6mol/L E2)和实验组(10-6mol/L E2+PTX)。应用四甲基亚唑蓝(MTT)法、流式细胞术观察PTX对E2作用下的子宫内膜癌的细胞增殖、凋亡和细胞周期的影响。结果:(1)随着E2浓度的增加和作用时间的延长,子宫内膜癌Ishikawa细胞在490nm处光密度值增大。E2对Ishikawa细胞具有促增殖作用,且呈时间和浓度依赖性(P均<0.001),而对HEC-1A的细胞增殖作用不显著(P=0.393),各浓度之间差异均无统计学意义(P=0.137)。不同浓度E2作用48h后,Ishikawa细胞G0～G1期比例减少(P=0.001),S期比例增多(P=0.002),HEC-1A变化不显著。(2)随着PTX浓度增加及时间延长,两种细胞增殖能力逐渐下降并呈时间和浓度依赖性(P均<0.001);不同浓度PTX作用48h后,两种细胞的凋亡率、G0～G1比例均升高(P<0.001,P<0.05),S期比例在Ishikawa细胞无显著变化,在HEC-1A细胞降低,G2～M期比例在Ishikawa细胞降低,在HEC-1A细胞无显著变化。结论:PTX可以抑制E2对子宫内膜癌细胞的促增殖作用,促使其发生凋亡,抑制细胞周期进展。GPER介导的信号传导通路可能成为治疗子宫内膜癌的新靶点。
- 乔玉环马秀英郭瑞霞李留霞葛新胡冬梅张燕彩
- 关键词：百日咳毒素
- 百日咳毒素对裸鼠子宫内膜癌移植瘤的抑制作用
- 2013年
- 目的:通过建立裸鼠子宫内膜癌移植瘤模型,观察G蛋白偶联受体抑制剂百日咳毒素(PTX)对子宫内膜癌移植瘤细胞凋亡及对磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号传导通路中磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)表达的影响。方法:将体外培养的人子宫内膜癌HEC-1A、Ishikawa细胞系,分别接种于28只裸鼠右背部皮下,建立裸鼠子宫内膜癌移植瘤模型,每个细胞系随机分为2组,对照组(腹腔注射生理盐水)和实验组(腹腔注射PTX),绘制肿瘤生长曲线,计算移植瘤的体积、抑瘤率等。光学显微镜下观察移植瘤组织的病理学特点,Tunel技术检测移植瘤组织中细胞凋亡的情况,免疫组织化学检测p-Akt的表达。结果:(1)PTX均能有效抑制HEC-1A、Ishikawa细胞裸鼠移植瘤生长,抑瘤率分别为38.74%、33.21%。(2)HE染色显示,实验组细胞异型性、核浆比相对较小;Tunel染色显示,HEC-1A、Ishikawa细胞系实验组细胞凋亡率均显著高于对照组(P均<0.05)。(3)免疫组织化学结果显示,PTX能降低p-Akt的表达,HEC-1A实验组与对照组比较差异显著(P<0.05),Ishikawa实验组与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:PTX可能通过抑制GPR30及其介导的PI3K/Akt通路,抑制子宫内膜癌裸鼠移植瘤的生长,促进其凋亡。
- 乔玉环胡冬梅郭瑞霞葛新马秀英雷佳
- 关键词：子宫内膜癌裸鼠HEC-1AISHIKAWA百日咳毒素磷脂酰肌醇3激酶
