高亚芹
- 作品数：5 被引量：16H指数：2
- 供职机构：中国中医科学院广安门医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 过表达人TSHR-A亚单位的重组腺病毒Ad-TSHR289/6xHis载体构建与鉴定被引量：3
- 2014年
- 目的:构建以促甲状腺激素受体(thyroid stimulating hormone receptor,TSHR)A亚单位(TSHR289)基因片段为免疫原的重组腺病毒载体,以期建立Graves病(Graves’s disease,GD)动物模型,为探讨中药复方对GD的防治作用提供条件。方法:利用重叠PCR技术从pSV2neoECE-TSHR289-6H-dhfr质粒中将目的基因TSHR289扩增至载体attB1-Kozak-TSHR289/6xHis/IRES/eGFP-attB2,琼脂糖凝胶电泳回收,Gateway R技术构建重组腺病毒载体(pAV.EX1d-TSHR289/6xHis/IRES/eGFP,pAdTSHR289/6xHis),转化到大肠杆菌Stbl3中,菌落PCR筛选阳性克隆、测序鉴定。将pAd-TSHR289/6xHis转染HEK293A细胞包装腺病毒,CsCl梯度离心法纯化腺病毒,TCID50法检测病毒滴度。RT-PCR法检测HEK293A中TSHR289的mRNA表达。应用该腺病毒免疫BALB/c小鼠制备GD模型。结果:菌落PCR筛选阳性克隆,测序证明构建正确;细胞感染腺病毒后出现明显细胞病变及增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,eGFP)表达;RT-PCR检测证实重组腺病毒转染的细胞中TSHR289的mRNA表达量是未转染的285倍;实验测得病毒滴度为3.16×1010 PFU/ml;BALB/c小鼠免疫第10周T4、TSHR抗体(TRAb)阳性率7/10。结论:成功构建了过表达人TSHR289基因的重组腺病毒载体,动物实验证明该腺病毒诱发自身免疫,产生TRAb。为下一步体内药物治疗GD试验提供了条件。
- 朱晓云刘丽娟杨东甲高亚芹刘喜明
- 关键词：GRAVES病重组腺病毒促甲状腺激素受体动物模型
- 毒性弥漫性甲状腺肿中医药研究进展被引量：2
- 2012年
- 毒性弥漫性甲状腺肿(Graves病)属于中医学瘿气、瘿瘤、瘿囊等范畴。中医药治疗本病手段灵活多样,大致可分为:辨证论治、分期治疗、专方专药治疗、中药内服联合穴位注射、中西医结合治疗等。虽然中医药治疗Graves病取得了一定进展,但是研究仍存在许多不足之处。今后应进一步开展中医药治疗Graves病的规范化研究,制定出统一的辨证分型标准,严格科研设计,同时加强基础研究,有效利用动物模型,以便对本病做更深入的研究。
- 高亚芹刘喜明
- 关键词：毒性弥漫性甲状腺肿中医病机中医药疗法
- 化痰散结中药及应季蔬菜碘含量的测定被引量：10
- 2012年
- 目的:测定临床常用化痰散结中药及应季蔬菜中碘的含量。方法:采用湿法消化处理样品,以国标规定碘盐中碘的测定方法为标准,以淀粉为指示剂,用硫代硫酸钠溶液滴定。结果:昆布的含碘量为558.92μg/g、海藻377.47μg/g、紫菜35.76μg/g、生牡蛎27.77μg/g、香附14.91μg/g、夏枯草8.86μg/g、贝母4.77μg/g、土贝母2.02μg/g、玄参1.85μg/g、芹菜1.88μg/g、菠菜0.75μg/g、木耳0.16μg/g、油菜0.00μg/g,其中由夏枯草等中药组成的甲肿消复方含碘量为2.11μg/g。结论:昆布、海藻的含碘量最高,紫菜、生牡蛎、香附、夏枯草次之,贝母、土贝母、玄参、芹菜中含碘量较少,木耳、菠菜、油菜中几乎不含碘,甲肿消复方含碘量并不高于单味药。
- 岳颖朱晓云高亚芹金磊王吉刘喜明
- 关键词：中药化痰散结含碘量
- Graves病动物模型建立研究进展被引量：1
- 2012年
- Graves病(GD)为甲状腺功能亢进中最常见的类型,约占80%～85%。目前,GD的发病机制尚未明确,建立成功的动物模型,有助于研究该病免疫系统功能异常的发生机制及制定新的治疗策略。本文从细胞免疫、核酸免疫、腺病毒免疫、转基因动物模型等对近年来制备GD动物模型的研究进展作一综述。
- 高亚芹刘喜明
- 关键词：GRAVES病动物模型甲状腺功能亢进免疫系统
- 甲肿消对甲状腺细胞凋亡及过氧化物酶活性的影响
- 2012年
- 目的研究甲肿消对甲状腺细胞凋亡及甲状腺过氧化物酶(TPO)活性的影响。方法用甲状腺FRTL细胞,按甲肿消剂量不同分为:0(对照组)、0.2、0.4、0.8、1.6 mg.mL-1组。甲状腺细胞培养24 h后,Hoechst33258染色观察细胞凋亡形态;流式细胞仪检测细胞凋亡指数;改良愈创木酚法检测TPO活性。结果给药24 h后,荧光显微镜下可见凋亡小体及细胞核碎片。0、0.2、0.4、0.8、1.6 mg.mL-1组细胞凋亡率(%)分别为:5.367±0.816、7.517±0.646、14.183±0.752、17.033±1.461、23.767±0.734,与药物呈剂量依赖性,组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。各组TPO活性(单位:GU.mg-1蛋白×103)分别为:9.395±1.79、7.289±1.205、6.175±1.818、4.347±0.948、2.93±1.977,随着给药剂量的升高而降低,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论甲肿消可能通过诱导甲状腺细胞凋亡及抑制TPO酶活性来影响甲状腺功能。
- 高亚芹岳颖朱晓云刘喜明
- 关键词：细胞凋亡甲状腺过氧化物酶
