高志敏
- 作品数：54 被引量：211H指数：8
- 供职机构：西北农林科技大学动物科技学院国家干细胞工程技术研究中心陕西分中心更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技攻关计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 奶牛不排卵状况的研究综述被引量：6
- 2003年
- 卵泡生长可分为三个阶段:卵泡出现;卵泡的选择优势化与闭锁分离;卵泡排卵。不排卵的情况可分为:①生长卵泡不能生长至“分离期”。原因可能是极度的营养缺乏。②卵泡可生长到“分离期”,但没有达到排卵体积。这方面研究得较多,认为这类牛比正常牛有更强的E_2对GnRH/LH的负反馈,在营养不良或吮乳时可引起这类不排卵状况。③卵泡生长的最终体积大于排卵卵泡,这类牛的特征是下丘脑对E_2的正反馈作用不敏感;高产奶牛常见。对于第一种情况,关键在于预防,提高育成期的饲管水平。后两种常见的不排卵状况是由于下丘脑对E_2反应的敏感性改变;常用增加血液循环中P4的浓度改变GnRH/LH释放的脉冲以协助卵泡最后阶段的生长,或重新建立下丘脑对E_2的正反馈来治疗。
- 杨炜峰窦忠英高志敏
- 关键词：奶牛卵泡生长发育持久黄体
- 由猪囊胚内细胞团分离胚胎干细胞的研究被引量：4
- 2003年
- 以 PMEF为饲养层培养猪 7～ 9日龄囊胚分离 ES细胞 ,ICM初次传代时间为 4～ 7d,ES细胞传代时间为 4～ 5 d,ES细胞传至 1～ 5代的胚胎数分别为 1 2 (1 8.8% ) ,8(1 2 .5 % ) ,5 (7.8% ) ,3(4 .7% ) ,2 (3.1 % ) ,并进行体外分化和 AKP染色鉴定。对影响猪 ES细胞分离与克隆的因素进行比较 ,结果表明 :(1 ) 9和 1 4日龄小鼠胎儿 PMEF饲养层培养 9日龄猪囊胚 ,贴壁率 (83.3% ,88,9% ) ,ICM形成率 (75 .0 % ,77.8% )和 1代 ES细胞克隆率(2 5 .0 % ,2 2 .2 % )无显著性差异 (P>0 .0 5 )。 (2 ) 7,8和 9日龄胚胎随胚龄增加 ,胚胎贴壁率 (5 .9% ,5 7.1 % ,87,9% )和 ICM形成率 (0 .0 % ,2 8.6 % ,81 .8% )升高 ,差异显著 (P<0 .0 1 )。(3) 9日龄囊胚直径 0 .8～ 1 .2 m m培养36～ 4 8h贴壁 ,贴壁率 1 0 0 % ,ICM形成率 1 0 0 % ;直径 >1 .2 mm囊胚贴壁时间为 4 8～ 72 h,贴壁率 5 7.1 % ,ICM形成率 5 7.1 % ,差异显著 (P<0 .0 5 )。去除直径 >1 .2 m m囊胚部分滋养层细胞培养 36～ 4 8h,贴壁率 91 .7% ,ICM形成率 83.3% ;(4 )添加外源 L IF没有提高贴壁率 (86 .4 % ,90 .9% ;P>0 .0 5 )和 ICM形成率 (81 .8% ,81 .8% ;P>0 .0 5 )
- 冯秀亮高志敏杨春荣雷安民樊敬庄窦忠英
- 关键词：囊胚内细胞团胚胎干细胞培养基
- 胚胎移植技术的现状与展望被引量：36
- 2002年
- 统计与分析了1991～2000年国际胚胎移植状况,结果表明胚胎移植已成为畜牧产业中最活跃的领域之一。胚移比例最大的依然是牛,其它种类的动物胚胎移植,如:绵羊、山羊、猪、马、鹿、美州驼、羚羊等,也十分活跃。牛的胚胎移植,有几个重要指标分析结果如下:(1)供体牛的品种分布基本相同,肉牛与奶牛所占比例接近,但不同国家之间差别很大;(2)每头供体所得可用胚数在5～6枚之间;(3)鲜胚移植与冻胚移植的比例基本持平,但近年来冻胚移植的比例稍大于鲜胚移植;(4)通过IVF体外方式生产胚胎数目有所增长,目前每年大约在3～4万枚;(5)妊娠率:鲜胚移植妊娠率在60％以上,冻胚移植妊娠率在50％以上,IVF体外方式生产胚胎妊娠率在40％左右;(6)胚胎移植技术的发展状况在全世界分布不均衡,北美和欧洲胚移技术最成熟;(7)胚胎贸易有所增长。最后,对该技术存在的问题与发展前景提出了探讨和展望。
- 杨炜峰徐小明高志敏窦忠英
- 关键词：胚胎移植技术
- 波尔山羊胚胎移植技术推广应用
- 2003年9~11月份,使用CIDR+FSH超排供体波尔山羊60只.在放入CIDR的第12~15d,连续四天递减量肌肉注射FSH(澳大利亚)400mg.55只供体羊发情、配种、采胚(有效率91.67﹪55/60),平均采...
- 高志敏马霄飞杨炜峰雷安民杨春荣窦忠英
- 关键词：胚胎移植超数排卵同期发情波尔山羊
- 文献传递
- 牛胚胎干细胞的研究
- 窦忠英华进联李松徐小明钱永胜雷安民高志敏安立龙杨奇杨春荣樊敬庄
- 胚胎干细胞(ES细胞)是自附置前早期胚胎或附置后胚胎原始生殖细胞分离克隆的一种具有自我更新和全向分化能力的细胞。ES细胞既象培养的一般体细胞一样可扩增、遗传操作选择和冻存，又类似于早期胚胎细胞，含有正常的二倍体核型，具有...
- 关键词：
- 关键词：分离克隆体外分化胚胎克隆
- 成年昆明小鼠雄性生殖干细胞的分离培养及其多能性研究被引量：4
- 2010年
- 【目的】从成年昆明小鼠睾丸组织中分离具有多能性的雄性生殖干细胞(Male germline stem cells,mGSCs)。【方法】采用机械法和2步酶消化法分离出成年昆明小鼠的精原细胞,经差速贴壁后,培养在小鼠胎儿成纤维细胞(MEF)饲养层上,2周后得到类胚胎干细胞(ESCs)样mGSCs。对得到的mGSCs进行碱性磷酸酶(AP)染色、免疫荧光染色、RT-PCR、体内分化等检测。【结果】mGSCs具有类似ESCs的形态和多能性,AP染色呈阳性,免疫荧光Oct4、Vasa染色呈阳性,RT-PCR检测其表达Oct4、Nanog、Sox2等多能性基因和Vasa、C-kit等生殖细胞的标记基因,在免疫缺陷鼠体内能形成畸胎瘤,组织学检测其可形成包括3个胚层在内的多种类型细胞。【结论】从成年昆明小鼠睾丸分离的精原细胞,在体外培养去分化形成了具有类ESCs生物学特性的mGSCs,mGSCs既具有多能性,也具有生殖细胞的基本生物学特性。
- 潘少辉胡玥张姗姗王静李飞飞高志敏杨春荣华进联
- 关键词：精原细胞多能性
- 密闭气袋在牛卵母细胞体外成熟培养中的应用被引量：3
- 2011年
- 通过简易避光密闭气袋在人体呼出的气相环境下(CO2浓度约5%,O2浓度约15%),利用生化培养箱进行牛卵母细胞的体外成熟培养。结果显示,牛卵母细胞在密闭气袋中培养与对照组(正常培养)相比成熟率(74.79%比71.69%,P>0.05)、孤雌激活后卵裂率(83.07%比81.39%,P>0.05)和囊胚发育率上(26.75%比22.87%,P>0.05)均无显著差异,但是密闭气袋培养各项数据均略高于对照组。本试验验证了该技术的方便性和有效性,为此技术在生产实践中的推广应用提供依据。
- 赵贵民吴苏君刘文强井勇杨文琳高志敏雷安民
- 关键词：卵母细胞体外成熟低氧
- 一种简易的卵母细胞体外成熟培养方法
- 本发明公开了一种简易的卵母细胞体外成熟培养方法，包括以下步骤：A1.卵母细胞的收集；A2.密闭气袋的制备及卵母细胞的体外成熟培养；A3.卵母细胞的孤雌激活及体外培养：在体外成熟培养22～24h挑选排出第一极体的成熟卵母细...
- 雷安民赵贵民吴苏君刘文强井勇杨文琳高志敏
- 文献传递
- 某些因素对牛和小鼠类胚胎干细胞分离与培养的影响被引量：15
- 2002年
- 以荷斯坦牛胚胎和小鼠胚胎为材料 ,研究了犊牛血清、饲养层、培养液、添加物和消化液对牛胚胎干细胞和小鼠胚胎干细胞克隆效率的影响。结果表明 ,在 2 4h内使小鼠胚胎贴壁率达 86 %以上的犊牛血清可用于小鼠和牛胚胎干细胞的分离 ;在 ES细胞分离与克隆中 ,以 15 %～ 2 0 %犊牛血清为宜 ,在 DMEM(L)培养基中添加 0 .1μmol/LNa2 Se O3 +0 .1mmol/Lβ-巯基乙醇 +10 μg/L IGF+10 0 0 IU/m L L IF,能显著提高牛 ES细胞分离与克隆效率 ;在TCM199、DMEM(高糖 )和 DMEM(低糖 ) 3种培养基中 ,低糖 DMEM更适宜于牛 ES细胞的分离 ;优秀胚胎形成的团状 ICM更适宜于分离与克隆 ES细胞 ,在 37℃用低浓度消化液处理 ICM或 ES细胞集落 ,再以机械将其离散为细胞小块 ,ES细胞克隆效率最高。
- 安立龙杨奇窦忠英高志敏雷安民杨春荣邱怀
- 关键词：小鼠胚胎干细胞内细胞团克隆
- 山羊胚胎干细胞的分离与培养
- 2008年
- 对关中奶山羊配种后6～7天的桑椹胚和囊胚，分别采用全胚培养法、酶消化法和免疫外科法进行处理。将处理后的胚胎培养于小鼠胎儿成纤维细胞（MEF）饲养层上，分离培养山羊胚胎干细胞（Embryonic stem cell，ESC）。对分离传代的山羊ESCs分别进行免疫组化染色，RT-PCR检测和体外诱导分化试验。结果表明，全胚培养法易于胚胎贴壁形成原代集落，采用全胚培养法获得的ESCs有一株目前已传至18代。山羊ESCs Nanong、Oct4、SSEA-3免疫组化染色呈阳性，SSEA-1免疫组化染色呈弱阳性，SSEA-4免疫组化染色呈阴性，RT-PCR检测显示其表达Nanog、Oct4、端粒酶、CD117。山羊ESCs经DMSO体外诱导可以向心肌细胞分化，这些试验均表明该细胞具有ESCs的生物学特性。
- 闫龙雷蕾杨春荣高志敏雷安民马晓玲窦忠英
- 关键词：山羊胚胎干细胞内细胞团
