高福生
- 作品数：7 被引量：25H指数：4
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- 吸入烟曲霉孢子对支气管哮喘大鼠气道黏蛋白MUC2表达的影响被引量：1
- 2009年
- 气道黏液过度分泌是支气管哮喘（简称哮喘）加重和死亡的危险因素。MUC2是由杯状细胞分泌的不溶性黏蛋白，哮喘患者MUC2表达上调，呼吸道黏液黏稠度和黏滞性增加，更易导致气道阻塞。流行病学资料显示烟曲霉（Aspergillus fumigatus）暴露与哮喘病情加重密切相关。我们用卵清白蛋白（ovalbumin，OVA）致敏和激发的方法建立大鼠慢性哮喘模型，然后给予长期的烟曲霉孢子吸入，观察对黏蛋白MUC2表达的影响，探讨烟曲霉暴露加重哮喘的机制。
- 高福生金先桥乔建瓯张轶
- 关键词：气道黏蛋白MUC2流行病学资料细胞分泌
- 烟曲霉菌提取物对人支气管上皮细胞Muc5ac表达的影响被引量：2
- 2009年
- 目的:探讨烟曲霉菌对呼吸道上皮细胞的黏液蛋白Muc5ac表达的影响及其可能机制。方法:分别应用不同浓度(0、8、16、20mg/L)的烟曲霉菌提取物(AFE)作用体外培养人支气管上皮细胞16HBE-14o不同的时间。实验还应用热处理的AFE(HT-AFE)、丝氨酸蛋白酶抑制剂(抑肽酶)和蛋白激酶激活受体-2(PAR-2)阻断剂(FSLLRY-NH2)。应用细胞免疫组织化学和酶联免疫法(ELISA)检测细胞Muc5ac蛋白量,同时应用RT-PCR检测Muc5acmRNA的表达。结果:正常未给予AFE刺激培养条件下的对照组细胞仅表达少量Muc5ac,而给予不同浓度的AFE作用后,细胞合成和分泌Muc5ac的量明显高于对照组(P<0.01),并呈明显的时间和浓度依赖性。丝氨酸蛋白酶抑制剂和PAR-2特异性阻断剂可以明显抑制AFE的上述作用。另外,热处理的AFE蛋白酶活性完全灭活,不能促进细胞Muc5ac表达增加。结论:AFE依赖其蛋白酶活性激活受体PAR-2,促进呼吸道上皮细胞Muc5ac表达增加,使黏液分泌增加。
- 龙飞高福生丁星祁卉卉王妍金先桥
- 关键词：曲霉菌支气管上皮细胞黏蛋白类蛋白酶激活
- 慢性烟曲霉暴露对哮喘大鼠气道上皮细胞损伤及表皮生长因子受体表达的影响被引量：3
- 2010年
- 目的探讨慢性烟曲霉暴露对哮喘大鼠气道上皮细胞损伤及表皮生长因子受体(EGFR)表达的影响。方法56只雄性Wistar大鼠随机分为7组(每组8只):慢性哮喘组(A组),慢性哮喘+烟曲霉孢子吸入1周(B组)、3周(C组)和5周(D组)组,慢性哮喘+生理盐水吸入组(E组),卵白蛋白(OVA)致敏生理盐水激发组(F组),OVA致敏生理盐水激发+烟曲霉孢子吸入组(G组)。测定大鼠基础气道阻力和气道阻力变化率,ELISA法测定BALF中表皮生长因子(EGF)及转化生长因子α(TGF-α)浓度,肺组织切片HE染色观察气道上皮细胞损伤脱落程度,过碘酸雪夫染色(PAS)观察气道上皮杯状细胞增生程度,免疫组化染色测定气道上皮细胞EGFR表达强度,免疫印迹测定肺组织EGFR蛋白表达。结果B、C、D组大鼠BALF中EGF[(51.72±8.54)、(68.12±7.85)、(86.24±9.12)pg/mL]、TGF-α[(55.26±9.30)、(75.58±11.56)、(96.75±14.66)pg/mL]、脱落上皮/气道上皮[(11.25±3.12)%、(26.45±5.56)%、(28.50±7.50)%]、杯状细胞/上皮细胞面积比值[(16.42±5.24)%、(22.64±6.82)%、(36.38±9.21)%]、气道上皮细胞EGFR阳性信号累积光密度(IOD)值(82±15、120±19、165±21)、肺组织EGFR蛋白表达IOD值(0.91±0.26、1.61±0.52、2.52±0.78)均高于A、E、F及G组(P<0.05或<0.01)。C和D组大鼠气道阻力变化率[(61.91±5.26)%、(84.69±6.38)%]均高于A、E、F及G组(P值分别<0.05或<0.01)。气道上皮细胞EGFR表达IOD值与脱落上皮/气道上皮(%)及杯状细胞/上皮细胞面积比值(%)呈正相关(r=0.692,P<0.01;r=0.657,P<0.01)。结论慢性烟曲霉暴露加重哮喘大鼠气道上皮细胞损伤,上调哮喘大鼠气道上皮细胞EGFR表达,促进杯状细胞增生,加重气道高反应性。
- 高福生金先桥乔建瓯张轶
- 关键词：哮喘烟曲霉表皮生长因子受体气道上皮细胞
- 反复吸入烟曲霉孢子对慢性阻塞性肺疾病大鼠气道炎症和重构的影响被引量：5
- 2008年
- 目的观察反复吸入烟曲霉(AF)孢子对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠气道炎症和重构的影响。方法50只Wistar大鼠随机分为A、B、C、D及E组,每组10只。A、B、C和D组用气管内吸入脂多糖联合熏香烟的方法建立COPD模型,E组为正常对照组。建模后A、B和C组分别经鼻吸入高浓度AF孢子(1×106cfu/次)、低浓度AF孢子(1×103cfu/次)和生理盐水100μL,每周2次,连续5周;D组无处理。测定支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞总数及分类,白细胞介素8(IL-8)和转化生长因子β(TGF-β)的水平;肺组织病理切片HE、PAS和Masson染色,观察气道炎症并行半定量评分及病理图像的形态学测量分析。结果与E组比较,D组大鼠出现典型COPD病理改变,模型建立成功。A组和B组BALF中白细胞总数、中性粒细胞及淋巴细胞百分比均高于C组和D组(P均<0.01);A组和B组BALF中的IL-8和TGF-β浓度均高于C组和D组(P均<0.01);A组的气道炎症评分高于B、C和D组(P均<0.01);A组和B组的管壁总厚度(WAt/Pbm)、平滑肌层厚度(WAm/Pbm)、管壁胶原沉积厚度(WCt/Pbm)、管壁外层胶原沉积厚度(WCo/Pbm)及杯状细胞占上皮细胞比例均高于C组和D组(P均<0.01);A组和B组BALF中IL-8与中性粒细胞百分比、气道炎症评分及杯状细胞占上皮细胞百分比呈正相关(r=0.856,P<0.01;r=0.884,P<0.01;r=0.702,P<0.05);TGF-β与WAt/Pbm、WCt/Pbm、WCo/Pbm及杯状细胞占上皮细胞百分比呈正相关(r=0.706,P<0.05;r=0.802,P<0.01;r=0.876,P<0.01;r=0.713,P<0.05)。结论反复吸入AF孢子可加重COPD大鼠气道炎症,并促进气道重构。
- 高福生龙飞祁卉卉张轶金先桥
- 关键词：慢性阻塞性肺疾病烟曲霉孢子气道炎症气道重构
- 吸入烟曲霉孢子对哮喘大鼠气道上皮重构和MUC5AC表达的影响被引量：4
- 2008年
- 目的研究吸入烟曲霉孢子(A f)对哮喘大鼠气道上皮重构和黏蛋白5AC(MUC5AC)表达的影响。方法64只雄性W istar大鼠随机分为正常对照组(A)、慢性哮喘模型组(B)、慢性哮喘+A f孢子吸入组(C)、慢性哮喘+生理盐水吸入组(D)。C、D两组又分为吸入1周、3周和5周组(C1、C3、C5和D1、D3、D5组),每组8只。测定肺泡灌洗液(BALF)中Il-4和IFN-γ水平、气道阻力变化率、杯状细胞增生程度、气道上皮细胞MUC5AC和肺组织MUC5AC mRNA的水平。结果C组BALF中IL-4水平、杯状细胞面积与上皮细胞面积比值、气道阻力变化率、气道上皮细胞MUC5AC表达及肺组织MUC5AC mRNA水平在不同时间点均高于B组和D1、D3、D5组(P<0.05),且C1、C3、C5三组间比较差异有统计学意义(P<0.05);MUC5AC的表达强度与杯状细胞面积/上皮细胞面积比值正相关(r=0.757,P<0.01),与气道阻力变化率正相关(r=0.521,P<0.05)。结论反复吸入A f孢子可上调哮喘大鼠气道MUC5AC的表达,促进杯状细胞增生,增加气道阻力和气道反应性。
- 高福生龙飞祁卉卉张轶金先桥
- 关键词：烟曲霉菌孢子气道上皮黏蛋白5AC
- 烟曲霉菌提取物对人支气管上皮细胞粒-巨噬细胞集落刺激因子表达的影响被引量：6
- 2008年
- 目的:探讨烟曲霉菌对呼吸道上皮细胞的粒-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)表达的影响及其可能机制。方法:分别应用不同浓度(0、8、16、20 mg/L)的烟曲霉菌提取物(Aspergillus fumigatus extract,AFE)作用体外培养人支气管上皮细胞16HBE-14o不同的时间(12、24、48、72 h)。同时还应用热处理的AFE(heat-treated AFE,HT-AFE)、丝氨酸蛋白酶抑制剂(抑肽酶)、蛋白激酶激活受体-2(PAR-2)激动剂(SLIGLV-NH2)和PAR-2阻断剂(FSLLRY-NH2)作用16HBE-14o细胞。应用ELISA法检测细胞上清液GM-CSF含量,同时应用RT-PCR法检测GM-CSF mRNA的表达。结果:正常培养条件下的对照组细胞仅表达分泌少量GM-CSF,而给予不同浓度的AFE作用后,细胞合成和分泌GM-CSF的量较对照组明显增加(P<0.05),并呈明显的时间和浓度依赖性。PAR-2激动剂同样可以促进细胞合成分泌GM-CSF。丝氨酸蛋白酶抑制剂和PAR-2阻断剂几乎完全抑制AFE的上述作用。HT-AFE的蛋白酶活性完全灭活,不能促进细胞GM-CSF表达增加。结论:AFE依赖其蛋白酶活性激活PAR-2受体,促进呼吸道上皮细胞GM-CSF合成和分泌,从而促进哮喘的发生和发展。
- 龙飞高福生丁星祁卉卉金先桥
- 关键词：烟曲霉菌支气管上皮细胞粒-巨噬细胞集落刺激因子蛋白酶激活受体-2
- COPD并发持续喘息与痰真菌培养阳性的相关分析被引量：9
- 2009年
- 目的探讨COPD患者并发持续喘息与痰真菌培养阳性之间的相关性。方法收集2005年1月～2007年12月于上海交通大学附属第一人民医院、复旦大学附属中山医院、复旦大学附属华东医院3家医院呼吸科住院的COPD急性加重患者的病史资料，进行回顾性分析。结果共收集到符合入选标准的COPD持续喘息组患者35例，COPD非喘息组患者43例。持续喘息组中32例（91．4％）痰真菌培养阳性，非喘息组中11例（25．6％）阳性，两组比较差异显著（P〈0．01）。细菌阳性率无显著差异（28．6％比39．5％，P〉0．05）。在真菌的菌种构成方面，持续喘息组32例痰真菌阳性患者中曲霉阳性12例，非喘息组11例痰真菌阳性患者中未检出曲霉，曲霉在两组中分布有显著差异（P〈0．05）。持续喘息组抗真菌治疗后症状缓解率显著高于未抗真菌治疗者（81．0％比36．4％，P〈0．05）。结论COPD患者并发持续喘息与真菌，特别是曲霉在气道内定植感染有关。
- 祁卉卉谢国钢高福生金先桥
- 关键词：慢性阻塞性肺疾病真菌曲霉
