- 一种SARS病毒DNA疫苗pVFS
- 本发明涉及医药生物工程技术领域，是一种用于预防严重急性呼吸道综合征的SARS病毒DNA疫苗pVFS。它由pVFS病毒S蛋白的改造后编码基因插入真核表达载体所构成。该重组质粒转化感受态大肠杆菌DH5α就成pVFS工程菌，可...
- 孙树汉陈则郭瀛军黄力王开宇张术
- 文献传递
- 一种SARS病毒DNA疫苗pVPS
- 本发明涉及医药生物工程技术领域，是一种用于预防严重急性呼吸道综合征的SARS病毒DNA疫苗pVPS。它由SARS病毒S蛋白抗原决定簇编码序列与纤溶酶原激活剂TPA的信号肽编码序列组成的分泌型S蛋白抗原决定簇编码序列S-P...
- 孙树汉郭瀛军黄力王开宇张术
- 文献传递
- 一种SARS病毒DNA疫苗pVPM
- 本发明涉及医药生物工程技术领域，是一种用于预防严重急性呼吸道综合征的SARS病毒DNA疫苗pVPM。它由SARS病毒M蛋白抗原决定簇编码序列与纤溶酶原激活剂TPA的信号肽编码序列组成的分泌型M蛋白抗原决定簇编码序列M－P...
- 孙树汉郭瀛军黄力张术王开宇
- 文献传递
- SARS相关冠状病毒S1融合蛋白的原核表达与纯化被引量：6
- 2003年
- 目的 :克隆严重急性呼吸综合征相关冠状病毒 (SARS- Co V) S1蛋白编码 DNA,构建原核表达质粒 p GEX- 5 T/ S1,并诱导表达谷胱甘肽巯基转移酶融合蛋白。方法 :采用 PCR方法扩增合成 S1片段 ,并克隆入载体中 ,经双酶切鉴定和测序后把S1序列定向插入原核表达载体 p GEX- 5 T的多克隆位点 ,转化大肠杆菌 K80 2 ,将纯化后的融合蛋白用于 SARS- Co V抗体阳性血清的检测。结果 :GST- S1融合蛋白以可溶形式表达 ,纯化后的蛋白用 EL ISA法检测 ,结果与对照相符。结论 :成功诱导原核表达并纯化出融合蛋白 S1,为将其应用于 SARS- Co
- 张术王开宇郭瀛军黄力陈祖欢朱维佳孙树汉
- 关键词：严重急性呼吸综合征相关冠状病毒原核表达SARS
- SARS相关冠状病毒S2基因的克隆及其DNA疫苗的免疫效果被引量：3
- 2003年
- 目的 :构建抗原基因为 SARS相关冠状病毒 (severe acute respiratory syndrome coronavirus,SARS- Co V) S2基因的DNA疫苗 ,将其接种小鼠后观察病毒特异性抗体产生情况。方法 :将合成的 S2基因片段克隆至真核表达载体 ,随之将质粒进行小鼠肌内接种免疫 ,定期检测血清中抗 SARS- Co V的病毒特异性抗体水平。结果 :疫苗接种后第 2周就能检测出病毒特异性抗体 ,随着时间的延续 ,抗体水平逐步升高 ,而空质粒对照组未检测出明显的特异性抗体。 结论 :以 S2为抗原基因的 DNA疫苗能诱导
- 郭瀛军黄力王开宇张术陈祖欢朱维佳陈则孙树汉
- 关键词：冠状病毒S2基因DNA疫苗免疫效果严重急性呼吸综合征
- SARS相关冠状病毒M基因片段的克隆及其DNA疫苗诱导的体液免疫被引量：10
- 2003年
- 目的 :构建含有 SARS相关冠状病毒 (severe acute respiratory syndrom e coronavirus,SARS- Co V) M基因片段的核酸疫苗 ,观察其免疫小鼠后病毒特异性抗体产生情况。方法 :将合成的 M基因片段克隆到核酸疫苗真核表达载体 p VAX1中 ,免疫小鼠后 ,用 SARS- Co V抗体 EL ISA检测试剂盒定期检测免疫小鼠血清中抗 SARS- Co V的病毒特异性抗体水平。 结果 :构建了重组核酸疫苗质粒 p VCo- M,免疫小鼠后可诱导产生出病毒特异性抗体。 结论 :以 M为抗原基因的 DNA疫苗能诱导SARS病毒特异性抗体 ,为进一步改进或探索同类 DNA疫苗提供有益启示。
- 黄力郭瀛军张术王开宇陈祖欢朱维佳孙树汉
- 关键词：克隆DNA疫苗体液免疫严重急性呼吸综合征
- 一种SARS病毒DNA疫苗pVFS
- 本发明涉及医药生物工程技术领域，是一种用于预防严重急性呼吸道综合征的SARS病毒DNA疫苗pVFS。它由pVFS病毒S蛋白的改造后编码基因插入真核表达载体所构成。该重组质粒转化感受态大肠杆菌DH5α就成pVFS工程菌，可...
- 孙树汉陈则郭瀛军黄力王开宇张术
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- 抗阿尔茨海默病重组真核表达载体的构建
- 2004年
- 目的 :将淀粉样蛋白 N端的抗原表位基因以 4种不同的组合与小鼠 Ig G重链区基因融合 ,构建抗阿尔茨海默病的重组质粒。方法 :通过 RT- PCR技术从小鼠脾组织中克隆 Ig G重链区 c DNA,将柔性接头与抗原表位基因序列设计在 5′端引物中 ,然后以克隆出的小鼠 Ig G重链区 c DNA为模板 ,用 PCR法克隆出由柔性接头将抗原表位和 Ig G重链区基因融合在一起的序列 ,并插入到 p VAX质粒载体中。结果 :扩增出来的 4种不同组合的抗原表位基因和 Ig G重链区基因融合序列大小分别为 999、1 0 2 0、1 0 0 5、1 0 2 6 bp,均与 Gen Bank上登录的相符 ;p VAX重组质粒酶切结果表明融合基因正确地插入到 p VAX载体中 ,全自动测序亦显示抗原表位基因和 Ig G重链区基因为所需基因 ,接头序列也完全正确。结论 :成功构建了抗阿尔茨海默病的 4种表位基因 - Ig G重链区融合表达的重组质粒 。
- 何颖黄力章亚男黎怀星陈蕊雯孙树汉
- 关键词：阿尔茨海默病抗原基因序列基因表达
- 一种SARS病毒DNA疫苗pVPS
- 本发明涉及医药生物工程技术领域，是一种用于预防严重急性呼吸道综合征的SARS病毒DNA疫苗pVPS。它由SARS病毒S蛋白抗原决定簇编码序列与纤溶酶原激活剂TPA的信号肽编码序列组成的分泌型S蛋白抗原决定簇编码序列S－P...
- 孙树汉郭瀛军黄力王开宇张术
- 文献传递
- 含三联密码AAA的Kozak类似序列特异性增强口蹄疫DNA疫苗的免疫效果被引量：1
- 2006年
- 目的引入6种不同的Kozak类似序列制备口蹄疫DNA疫苗,比较分析Kozak类似序列中不同碱基组成对口蹄疫DNA疫苗表达水平及免疫效果的影响作用。方法在口蹄疫DNA疫苗抗原编码基因VP1起始位点引入Kozak通用序列及所设计的5种Kozak类似序列(KZ1-KZ6),插入真核表达载体pVAX1,制备口蹄疫DNA疫苗,对6～8周龄BALB/c小鼠进行免疫,用间接ELISA分析实验动物外周血VP1的抗体滴度；同时插入带有绿色荧光蛋白的融合表达载体pEGFP-N1构建6种体外表达质粒,转染HeLa细胞,进行瞬时表达并分析体外表达水平。结果引入含三联密码AAA的Kozak类似序列KZ6的疫苗质粒pKV6接种动物后产生的免疫抗体滴度高于其他组；相应的体外表达质粒pKG6转染HeLa细胞后体外表达水平亦高于其他组。结论含三联密码AAA的Kozak类似序列KZ6的口蹄疫DNA疫苗,能特异性地增强口蹄疫DNA疫苗的表达水平及免疫效果。
- 张秀伟郭瀛军王开宇黄力杨勇军张术陈祖欢王凯慧杨康鹃孙树汉
- 关键词：口蹄疫DNA疫苗免疫效果
