黄勋
- 作品数：5 被引量：9H指数：2
- 供职机构：第四军医大学唐都医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 大鼠原位气管移植模型的建立
- 2015年
- 目的建立同种异体大鼠原位气管移植模型,为研究者提供可参考的建立模型的步骤。方法将10只SD大鼠气管作为供体,质量匹配后原位移植入20只SD大鼠体内。于移植后第10天取移植气管样本做苏木素和伊红染色及马松染色,观察上皮覆盖、纤维化程度。结果大鼠气管移植模型手术存活19例,从样本采集到手术成功用时(65±15)min。10 d后取材,苏木素和伊红染色可见上皮覆盖杂乱,但上皮覆盖完整;马松染色可见上皮下纤维沉积。结论新建的大鼠气管移植模型可以用于气管移植相关领域的研究,可避免操作繁复、不能模拟呼吸运动引起的气管活动及气流的影响,避免异位移植容易出现的移植气管机化。
- 段鸿涛黄勋刘宏刚闫小龙李小飞
- 关键词：气管移植动物模型
- 单免疫球蛋白白细胞介素1受体相关蛋白在脂多糖诱导的急性肺损伤小鼠肺组织中表达的研究被引量：1
- 2013年
- 目的通过构建小鼠急性肺损伤(ALI)模型,观察单免疫球蛋白白细胞介素1受体相关蛋白(SIGIRR)在正常小鼠及ALI小鼠模型肺组织中的表达规律,为SIGIRR在ALI预防及治疗方面的应用提供基础。方法将30只雄性BALB/C小鼠随机分为对照组及脂多糖(LPS)组,每组15只。腹腔注射戊巴比妥钠麻醉满意后,行气管插管,呼吸机辅助呼吸。气管内缓慢滴入LPS溶液(1 mg/kg,500/μg)构建ALI模型。对照组按上述操作步骤,气管内注射人生理盐水。观察小鼠肺弹性阻力的变化;肺水肿程度观察;肺组织病理切片HE染色后光镜下观察肺组织病变情况;收集小鼠支气管肺泡灌洗液(BALF),FLSA法检测细胞因子白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和IL-6浓度;收集肺组织,ELISA法检测肺组织匀浆内一氧化氮(NO)浓度和髓过氧化物酶(MPO)活性;免疫组化检测肺组织中SIGIRR表达,Western blot检测各个时间点肺组织SIGIRR表达水平的变化。结果模型小鼠肺弹性阻力较对照组明显上升;模型小鼠肺组织湿/干重比值较对照组明显增高;模型小鼠肺组织的病理呈现典型的ALI病理改变特征,对照组小鼠则表现为正常的肺组织病理学特点;模型建立3 h后,ELISA法检测ALI小鼠BALF中IL-1β、TNF-α及IL-6浓度分别为(517±18)pg/mL.、(3523±168)pg/mL和(676±25)pg/mL,显著高于对照组(P
- 梁晓华黄勋田丰高坤祥王艳李小飞姜涛
- 关键词：急性肺损伤
- 小鼠SIGIRR基因重组腺病毒的构建及鉴定被引量：2
- 2013年
- 拟构建小鼠SIGIRR基因重组腺病毒并进行鉴定,为SIGIRR在小鼠急性肺损伤预防及治疗方面的研究提供基础。利用AdEasyTM系统构建SIGIRR基因重组腺病毒,并检测SIGIRR mRNA及蛋白在感染细胞及组织中的表达。通过多次扩增后,大量制备高滴度腺病毒。结果表明,本试验成功构建了携带小鼠源性SIGIRR基因的重组腺病毒表达载体Ad-mSIGIRR,病毒感染滴度为5×1010 pfu/mL,滴度符合下一步试验要求。Western blot和免疫组化方法分别检测到mSIGIRR在体内的高效表达,且经气管滴注感染小鼠后,不会引起正常小鼠肺组织发生病理变化。明确了SIGIRR基因的重组腺病毒可以在小鼠活体内使mSIGIRR过表达,且经气管滴注5×109pfu的病毒感染小鼠后,不会引起正常小鼠肺组织发生病理变化。
- 梁晓华王艳田丰黄勋高坤祥李小飞姜涛
- 关键词：腺病毒载体
- SIGIRR对HMGB1诱导的A549细胞炎性反应的影响被引量：4
- 2011年
- 目的观察单免疫球蛋白白细胞介素1受体相关蛋白(SIGIRR)对高迁移率族蛋白B1(HMGB1)诱导的人肺泡上皮细胞株A549炎性反应的影响。方法构建含有SIGIRR cDNA全长的真核表达载体pCDNA3.1(+),瞬时转染人Ⅱ型肺泡上皮细胞来源的A549细胞,使SIGIRR在A549细胞中过表达,采用Western blot和RT-PCR法检测其表达。HMGB1刺激A549细胞后,双荧光素酶报告基因系统检测转染前后核转录因子κB(NF-κB)转录活性的改变,ELISA检测转染前后炎症因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)蛋白表达水平的变化。结果转染SIGIRR表达载体的A549细胞,其SIGIRR表达量显著上升。HMGB1刺激后,双荧光素酶报告系统检测发现,NF-κB转录活性明显升高,而转染SIGIRR表达载体后NF-κB转录活性下降。ELISA实验结果表明,过表达SIGIRR的A549细胞在接受HMGB1刺激后其炎症因子TNF-α及IL-1β蛋白表达水平明显低于对照组。结论 SIGIRR表达上调可以抑制HMGB1诱导的A549细胞产生炎症因子TNF-α和IL-1β。A549细胞转染前后NF-κB转录活性的改变提示SIGIRR的抗炎作用可能与其参与NF-κB转录活性的调控有关。
- 黄勋梁晓华田丰姜涛
- 关键词：高迁移率族蛋白B1A549
- SIGIRR在固有免疫中的负性调节作用被引量：2
- 2011年
- 单一免疫球蛋白白细胞介素1受体相关蛋白（SIGIRR,或TIR8）是Toll-IL-1受体（TIR）超家族的成员之一。它广泛分布于被覆上皮组织的器官,如肾脏、肺、结肠等,并且可以负性调节白细胞介素1受体（IL-1R）、Toll样受体（TLRs）介导的固有免疫应答。固有免疫是机体防御病原体的第一道防线,对适应性免疫也起到调节作用。固有免疫反应过度可导致炎症因子瀑布样释放,从而造成对机体的损害。
- 黄勋姜涛
- 关键词：负性调节作用固有免疫应答SIGIRR白细胞介素1受体受体相关蛋白IL-1受体
