丁建芳
- 作品数:6 被引量:4H指数:2
- 供职机构:中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家攀登计划更多>>
- 相关领域:生物学医药卫生更多>>
- SARS冠状病毒3CL蛋白酶多克隆抗体的制备及纯化被引量:2
- 2008年
- SARS病毒(SARS-CoV)3CL蛋白酶在病毒的复制过程中起到关键作用,是抗病毒药物设计的重要靶标。本工作用在大肠杆菌中表达并纯化的SARS-CoV 3CL蛋白酶免疫新西兰大耳兔,获得了多克隆抗体血清;利用抗原偶联柱对血清进行了亲和纯化。SDS-PAGE以及Western-Blot结果显示纯化后的抗体纯度较高,特异性较强,为免疫学方法检测SARS-CoV 3CL在宿主细胞内的活动打下了基础。
- 童国珍单玉飞丁建芳许根俊赵辅昆
- 关键词:SARS多克隆抗体
- 果糖1,6-二磷酸酯酶结构功能
- 许根俊赵辅昆胡国富张凤文丁建芳林胜祥
- 果糖1,6一二磷酸酯酶催化果糖1,6一二磷酸生成果糖6-磷酸和无机磷是由四个相同亚基组成的分子量为144Kd的别构酶,它受AHP别构抑制,是糖元异生作用的重要关键酶。国外实验室主要集中研究肝,肾,的果糖1,6一二磷酸酯酶...
- 关键词:
- 鸡肝6-磷酸果糖-2-激酶/果糖-2-,6-二磷酸酯酶单克隆抗体制备及对酶活力影响
- 1996年
- 利用鸡肝-6-磷酸果糖-2-激酶/果糖-2,6-二磷酸酯酶(6PF-2-K/Fru-2,6-P_2ase)的单克隆抗体对其结构和功能进行了初步研究.用鸡肝6PF-2-K/Fru-2,6-P_2ase为抗原免疫Balb/C小鼠,最后获得7株单克隆抗体.其中6株抗体的抗原决定簇位于6PF-2-K/Fru-2,6-P_2ase的酯酶结构域部分,而另一株H_2的抗原决定簇则位于其激酶结构域部分.7株单克隆抗体都能引起鸡肝6PF-2-K/Fru-2,6-P_2ase的激酶活力提高2倍左右,而对酯酶活力的影响大致相同.它们激活该酶的酯酶活力至4倍左右,但却不影响分离的鸡肝果糖-2,6-二磷酸酯酶结构域的酯酶活力.以上结果再次提示6PF-2-K/Fru-2,6-P_2ase双功能酶和分离的Fru-2,6-P_2ase结构域的酯酶处于2种不同的构象和活性状态.
- 李同元丁建芳李林许根俊
- 关键词:果糖单克隆抗体
- 萤火虫荧光素酶单克隆抗体的制备与抗原决定簇的研究
- 1999年
- 以大肠杆菌表达的萤火虫荧光素酶 (fireflyluciferase)为抗原 ,免疫小鼠并进一步筛选与克隆 ,共得到 6株单克隆抗体 .制备腹水并纯化获得抗体后 ,对这 6株抗体与天然态和热变性态蛋白质以及蛋白酶解片段的结合性质进行了鉴定 .认为这 6株抗体的抗原决定簇都是顺序决定簇 .发现其中有 2株单抗与热变性态蛋白质及酶解片段的结合能力较强 ,而不与天然态蛋白质结合 ,其抗原决定簇可能是位于蛋白质内部的肽段 .另外 4株抗体既可与热变性态蛋白质以及酶解片段结合 ,也可与天然态蛋白质结合 ,其抗原决定簇可能位于蛋白质分子表面 .
- 徐沁丁建芳胡红雨许根俊
- 关键词:荧光素酶蛋白质萤火虫抗原决定簇单克隆抗体