丁生才 作品数:22 被引量:79 H指数:6 供职机构: 第三军医大学新桥医院 更多>> 相关领域: 医药卫生 农业科学 更多>>
“三镜技术”在微创胆道外科中的应用 2008年 丁生才 李靖 王细文 左国华 黄小兵 高明发 梁平关键词:外科治疗 胆道 十二指肠 腹腔镜 shRNA干扰肝癌细胞Kir6.2基因表达对细胞内钙离子浓度的影响 被引量:2 2008年 目的研究shRNA干扰肝癌SK-Hep1细胞Kir6.2基因表达及对细胞内钙离子浓度的影响。方法脂质体转染法将shRNA质粒载体pGenesil-3共转染SK-Hep1细胞,实验分为SK组(未转染)、HK组(阴性对照)、K1组(干扰序列1)和K2组(干扰序列2)。经G418筛选出单克隆培养,RT-PCR和Western Blotting分别检测Kir6.2 mRNA和蛋白的表达,筛选出抑制Kir6.2表达的有效序列。Fluo4-AM孵育各组细胞,流式细胞仪检测荧光强度。结果RT-PCR结果显示K1、K2组Kir6.2 mRNA的表达与HK、SK组比较均降低。K1、K2组Kir6.2蛋白的量与HK、SK组比较均降低。K1和K2组钙离子浓度远远低于SK和HK组。结论shRNA抑制了肝癌细胞Kir6.2基因的表达,钙离子浓度显著降低。 苏晓通 梁平 丁生才 李靖 杨彤翰 李洪艳关键词:WESTERN BLOTTING 钙离子浓度 腹腔镜手术实时多媒体教学培训系统的建立与应用 被引量:1 2005年 腹腔镜技术在临床已经广泛开展,我们建立了腹腔镜手术实时多媒体教学培训系统,使枯燥的理论知识及操作技能的讲解与示范形象化、具体化,并在对低年资住院医师、研究生、进修生进行腹腔镜手术教学培训、腹腔镜手术新技术推广示范、国内外著名专家手术演示中取得了良好的效果。 左国华 梁平 李靖 丁生才 李红艳 马小干 刘锡能 高明发 黄小兵关键词:腹腔镜 临床教学 手术 多媒体 上腹部手术后行腹腔镜胆囊切除的临床体会 被引量:7 2005年 目的探讨有上腹部手术史患者再次行腹腔镜胆囊切除术(LC)的可行性及临床疗效。方法对2000年1月 ̄2004年7月间施行的有上腹部手术史的48例LC病例(A组)进行回顾分析,并随机选择同期进行的无上腹部手术史的100例LC病例(B组)进行对比。结果A组有2例中转开腹(中转率为4%),B组有1例中转开腹(中转率为1%);平均手术时间:A组(68.6±15.7)min,B组(38.6±5.4)min,P<0.01;平均住院天数:A组(5.12±0.61)d,B组(4.96±0.48)d,P>0.05。两组病例均无手术并发症。结论对有上腹部手术史的胆囊病变,LC是安全、有效的,仍可作为首选的治疗方法。 李靖 梁平 杨彤翰 黄小兵 刘锡能 左国华 丁生才 李洪艳 韩克强关键词:上腹部手术史 平均手术时间 平均住院天数 中转开腹 胆囊病变 中转率 腹腔镜胆囊逆行切除术的临床应用与意义 被引量:2 2006年 杨彤翰 高明发 王志刚 李靖 刘锡能 左国华 黄小兵 丁生才关键词:胆囊结石 胆囊炎 腹腔镜胆囊切除 逆行切除术 腹腔镜胆囊切除术治疗肝硬化合并的胆囊疾患 被引量:4 2006年 目的:探讨肝硬化合并胆囊病变患者行腹腔镜胆囊切除术(LC)的临床特点。方法:对照研究同一时期36例肝硬化伴胆囊病变和41例不伴肝硬化的胆囊病变患者行LC术的治疗经过及结果。结果:在肝硬化患者组,LC完成34例,因术中出血中转2例,术后发生并发症3例,两组在手术时间、术中出血量和术后住院时间均有显著性差异(P<0.05);两组均无严重并发症和手术死亡。结论:肝硬化患者行LC难度较大,但安全可行,疗效满意,注重围手术期处理、掌握手术特点是LC成功的关键。 左国华 梁平 李靖 丁生才 李洪艳关键词:腹腔镜 胆囊切除 肝硬化 shRNA干扰肝癌细胞Kir6.2基因表达载体的构建及鉴定 被引量:1 2008年 目的:构建shRNA体内表达载体pGenesil-3-siRNA,筛选出抑制Kir6.2基因表达的有效靶序列。方法:以Kir6.2基因为目的基因,以产生shRNA质粒载体pGenesil-3为表达模板,细胞内转录合成2条siRNA,脂质体转染法将shRNA质粒载体pGenesil-3共转染SK-Hep1细胞,将细胞分为SK组(未转染)、HK组(转染阴性对照质粒)、K1组(转染重组质粒K1)和K2(转染重组质粒K2)组。经G418筛选出单克隆进行培养,用RT-PCR和Western Blotting分别检测Kir6.2 mRNA和蛋白的表达,筛选出抑制Kir6.2表达的有效siRNA靶序列。结果:SK、HK、K1和K2组Kir6.2 mRNA表达的相对量分别为0.936±0.042、0.848±0.058、0.225±0.0360、0.171±0.029,K1、K2组Kir6.2mRNA的表达与HK、SK组比较均明显降低(P<0.05)。SK、HK、K1和K2组的Kir6.2蛋白表达的量分别为0.925±0.045、0.901±0.067、0.269±0.024、0.318±0.031,K1、K2组Kir6.2蛋白的量与HK、SK组比较均明显降低(P<0.05)。结论:shRNA抑制了肝癌细胞Kir6.2基因的表达。 苏晓通 梁平 李靖 丁生才 杨彤翰关键词:RT-PCR WESTERN BLOTTING shRNA沉默肝癌细胞Kir6.2基因对K_(ATP)通道电流的影响 2008年 目的研究shRNA干扰肝癌细胞Kir6.2基因后KATP通道电流的变化。方法脂质体法将构建的3种shRNA质粒表达载体HK(隐性对照质粒)、K1(质粒携带干扰序列1)、K2(质粒携带干扰序列2)分别转染肝癌细胞。实验分为4组:SK组(未转染)、HK组、K1组、K2组。采用膜片钳全细胞记录方法记录KATP通道电流。高阻封接后,用10mmol/L2-脱氧-D-葡萄糖灌流液灌流10min,测量各组的电流,最后换成100μM格列本脲灌流液灌流10min,再次测量电流,再次电流相减即可得格列本脲敏感的KATP电流。绘制Ⅰ-Ⅴ曲线。结果在SK、HK、K1、K2 4组中,KATP电流分别为(n=7)(nA)(1.80±0.673)、(1.87±0.541)、(5.16±1.011)、(3.89±1.287)。K1、K2组与SK组比较差异有统计学意义。K1、K2组KATP电流的幅度明显高于HK组。结论shRNA沉默肝癌细胞Kir6.2基因后KATP通道电流改变明显。 苏晓通 梁平 丁生才 杨彤翰 韩克强关键词:SHRNA 肝癌细胞 全细胞记录 格列本脲 经脐单孔腹腔镜胆囊切除术 被引量:13 2010年 目的 探讨经脐单孔腹腔镜胆囊切除术临床应用的安全性及疗效.方法 回顾性分析2008年1月至2010年5月第三军医大学新桥医院完成的16例行经脐单孔腹腔镜胆囊切除术患者的临床资料.取紧邻脐孔右侧缘行约1.5 cm的切口,入腹后置入连接好2个5 mm Trocar和1个10 mm Trocar所形成的三通道防漏气操作装置,制造气腹,以10 mm Trocar进入腹腔镜镜头,自2个5 mm Trocar各进入一把腹腔镜器械和5 mm超声刀,按常规腹腔镜操作方法完成胆囊切除术.结果 16例患者手术均获成功,手术时间为50~150 min,未放置引流管,术后无出血及胆汁漏等并发症发生.患者恢复良好,脐部无明显手术瘢痕.结论 经脐单孔腹腔镜胆囊切除术切口美观,安全可行.但操作难度较传统LC大,进一步完善脐部操作装置及手术器械,可望在一定程度上取代传统LC. 梁平 黄小兵 左国华 李靖 丁生才 王细文腹腔镜处理胆囊变异的临床体会 被引量:1 2008年 目的探讨腹腔镜技术处理胆囊变异的可行性及其临床疗效。方法对近10年间施行腹腔镜胆囊切除时遇到的46例胆囊变异病例(A组)进行回顾性分析,并随机选择同期进行的无胆囊变异的80例LC病例(B组)进行对比。结果A组有3例中转开腹(中转率6.5%),B组无中转开腹病例。平均手术时间:A组(46.7±10.3)min,B组(36.5±4.8)min,P<0.05;平均术后胃肠功能恢复时间:A组(26.3±6.2)h,B组(25.8±6.1)h,P>0.05;术后平均住院时间:A组(3.4±0.6)d,B组(3.2±0.5)d,P>0.05。A组有1例发生右肝管损伤,B组无术中及术后并发症,两组治疗效果均较满意。结论胆囊变异给LC带来一定困难,术中应重视胆囊可能的变异情况,只要能及时发现胆囊变异并采取相应措施,腹腔镜下处理胆囊变异是安全有效的。 李靖 杨彤翰 梁平 黄小兵 左国华 郑璐 丁生才 韩克强 高明发 赵弘智关键词:胆囊 腹腔镜胆囊切除术