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利用锌指核酶技术制备MSTN基因敲除的牛胎儿成纤维细胞: 肌肉生成抑制素(Myostatin，MSTN)是骨骼肌生长发育的负调控因子，其与肌纤维细胞的生长和数量密切相关。MSTN基因的缺失会造成肌肉过度肥大的现象，即所谓的“双肌”现象，“双肌”牛较普通牛产肉率可提高40％左右，...; 云亭; 关键词：肌肉生长抑制素; 文献传递

牛肌肉生长抑制素基因敲除打靶载体的构建被引量：3: 2012年; 【目的】构建两套用于牛肌肉生长抑制素(myostation,MSTN)基因敲除的置换型打靶载体。【方法】设计并合成含有限制性内切酶酶切位点的引物,利用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)以牛耳皮肤组织基因组DNA为模板分别扩增出两套打靶载体的同源短臂和长臂,再分别插入到两套打靶专用基础载体pMCS-PLP和PⅢ中,构建两套用于牛MSTN基因敲除的置换型打靶载体pPLP-MSTN和PⅢ-MSTN。【结果】经过PCR、T载体连接和DNA测序,证实载体pPLP-MSTN包含2.8 kb同源短臂和4.0 kb同源长臂,载体PⅢ-MSTN包含1.3 kb同源短臂和6.8 kb同源长臂;经过限制性内切酶酶切鉴定,证实两套载体的同源臂分别正确插入到基础载体内。【结论】两套牛MSTN基因敲除打靶载体pPLP-MSTN和PⅢ-MSTN构建成功,载体pPLP-MSTN为不含负筛选标记的传统基因敲除打靶载体,载体PⅢ-MSTN为不含负筛选标记的荧光蛋白启动子捕获打靶载体。; 赵丽华梁浩云亭李荣凤; 关键词：胎儿成纤维细胞

一种敲除牛MSTN基因的打靶载体及其应用: 本发明公开了一种敲除牛肌肉生长抑制素MSTN基因的启动子捕获型打靶载体PIII-MSTN，其可敲除牛MSTN基因第一、二外显子的全部和第三外显子的大部分，敲除的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示；PIII-MSTN核...; 李荣凤赵丽华李雪玲梁浩云亭; 文献传递

牛滋养层干细胞的培养与鉴定: 在哺乳动物胚胎发生过程中滋养层细胞的分化是首次分化事件,对胎盘的形态和生理起着重要作用.利用含有两个小分子抑制剂的培养系统，成功地从牛体外受精囊胚获得牛滋养层干细胞样细胞.这些细胞可以在添加B27,N2,Glutamax...; 黄翔华韩雪洁乌云毕力格云亭赵宇航李荣风李雪玲; 关键词：胚胎发育滋养层细胞体外分化; 文献传递

一种敲除牛MSTN基因的打靶载体及其应用: 本发明公开了一种敲除牛肌肉生长抑制素MSTN基因的启动子捕获型打靶载体PIII-MSTN，其可敲除牛MSTN基因第一、二外显子的全部和第三外显子的大部分，敲除的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示；PIII-MSTN核...; 李荣凤赵丽华李雪玲梁浩云亭; 文献传递

制备肌肉生长抑制素(MSTN)基因敲除肉牛的研究: 本研究通过MSTN基因敲除打靶载体的构建与胎儿成纤维细胞基因转染，成功获得了一个MSTN基因敲除细胞系，证实载体构建和细胞转染实验体系成功建立。进一步利用MSTN基因敲除细胞作为核供体，获得基因敲除体细胞克隆囊胚及妊娠母...; 赵丽华梁浩云亭李荣凤; 关键词：肌肉生长抑制素基因敲除体细胞核移植

ZFNs介导的牛MSTN基因敲除和定点整合外源基因的方法: 本发明提供了一种ZFNs介导的牛MSTN基因敲除和定点整合外源基因的方法，根据牛肌肉抑制素基因序列，设计ZFNs特异位点表达载体，并根据ZFNs作用位点设计含有外源基因的且可以整合至宿主基因组中的打靶载体，然后将上述表达...; 李荣凤李雪玲赵宇航云亭梁浩; 文献传递

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云亭