何东海
- 作品数：18 被引量：105H指数：7
- 供职机构：中国海洋大学更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：环境科学与工程生物学理学自动化与计算机技术更多>>
- 利用流动注射型乙酰胆碱酯酶传感器监测海水中马拉硫磷被引量：7
- 2005年
- 将乙酰胆碱酯酶(AChE)传感器引入流动注射系统中,研究了传感器连续监测海水中马拉硫磷的可行性。系统中的载液为不含马拉硫磷的海水。传感器适宜的工作条件为:载液和样品的流速为0.39mL/min,进样时间为20min;底物(碘化硫代乙酰胆碱)溶液的浓度为41.6mmol/L,注射量为40μL。利用次氯酸钠溶液对含马拉硫磷的海水样品进行预氧化处理,可以大大提高传感器的灵敏度,对马拉硫磷的检出限达到0.05μg/L;而不进行氧化时的检出限为1.3μg/L。另外,海水样品经过预氧化处理后,传感器对其中0.1～10μg/L的马拉硫磷具有良好的线性响应关系(r=0.991)。测定含马拉硫磷的海水样品后,向传感器持续通入0.5mmol/L的2PAM溶液15min,可以完全恢复受到100μg/L马拉硫磷抑制的固定化酶活性。结果表明:所设计的酶传感器适于海水中马拉硫磷的连续、灵敏和准确监测。
- 孟范平何东海朱小山杨正先马冬冬
- 关键词：马拉硫磷酶传感器预氧化处理乙酰胆碱酯酶水样品
- 基于固定化AChE的流动注射型酶传感器研究被引量：7
- 2006年
- 以固定化鲅鱼脑组织乙酰胆碱酯酶[acetylcholinesterase，ACHE（EC3．1．1．7）]为识别元件，以pH电极为换能器，构建流动注射型AChE酶传感器．该传感器在以磷酸盐缓冲液为载液的条件下具有良好的重现性（RSD=1．427%，n=10）和敏感性，可实现对有机磷化合物的在线监测；对甲基对硫磷具有线性响应的浓度范围为4.29×10^-10～4.29×10^-8mol·L^-1，最低检测限为1．3×10^-10mol·L^-1。在以清洁海水为载液条件下，该传感器对海水中甲基对硫磷的敏感性较差，但是采用NaCIO溶液对海水中甲基对硫磷进行预氧化后，传感器对其的最低检测限可达到2．16×10^-7mol·L^-1。
- 朱小山孟范平朱琳何东海
- 关键词：固定化乙酰胆碱酯酶有机磷农药
- 有机磷农药的检测方法及其装置
- 有机磷农药的检测方法及其装置，先由蠕动泵将清洁水样泵入酶传感器一定时间后，再同时由计量泵脉冲注入几十μL的底物溶液，产生对照信号峰；然后同样泵入待测水样产生样品信号峰，皆由已有计算程序计算出有机磷农药浓度并显示；在测量下...
- 孟范平王旭柱马冬杨正先朱小山何东海
- 文献传递
- 黄鱼(Hexagrammosotakii)脑组织AChE的亲和层析被引量：15
- 2004年
- 采用亲和层析法对黄鱼脑组织的乙酰胆碱酯酶进行分离纯化。纯化酶最大比活力为6 3.1 36 U /mg蛋白 ,最适 p H为 8,最适反应温度为 35℃。此酶经过 SDS- PAGE呈一条带 ,表明其纯度达电泳纯。对纯化酶进行底物特异性、过量底物抑制效应和抑制剂选择性检验 ,结果证实该酶为乙酰胆碱酯酶。
- 朱小山孟范平何东海
- 关键词：黄鱼乙酰胆碱酯酶分离纯化
- 有机磷农药识别元件及其制作方法
- 有机磷农药识别元件及其制作方法，本发明是一个两端为细管的管状体内注有半固体状态的固定化乙酰胆碱酯酶的结构体。还可以在管状体下部设置一种防止固定化酶流失的阻酶层。上述固定化酶是以凝胶为载体的乙酰胆碱酯酶，呈半固体状态。其制...
- 孟范平唐学玺朱小山何东海马冬杨正先
- 文献传递
- 对有机磷农药敏感的海鱼脑AChE筛选研究被引量：15
- 2006年
- 以10种海洋鱼类：鲅鱼、黄花鱼、鲈鱼、黄鱼、美国红鱼、真鲷、黑鲷、面包鱼、黑头鱼和鳗鲡为实验材料，采用半抑制浓度（IC50）和双分子速率常数（Ki）为指标，通过体外抑制作用比较了这10种海鱼脑AChE对马拉硫磷和甲基对硫磷的敏感性，并分析了海鱼脑AChE作为监测海水中有机磷农药指示酶的可行性，由此筛选出适于制备海水有机磷农药酶传感器的指示酶．实验表明：10种海鱼脑AChE的基础活性在4．62～35．65μmol／（min·g）之间，面包鱼的酶活性最高，黄花鱼的酶活性最低．对马拉硫磷，由IC50所得到的AChE敏感性为：鲅鱼、黄鱼、鲈鱼、真鲷〉黑鲷〉黑头鱼、鳗鲡〉美国红鱼、黄花鱼〉面包鱼；由Ki所得到的AChE敏感性为：鲅鱼〉黄鱼、鲈鱼、真鲷〉黑鲷、黑头鱼、鳗鲡〉美国红鱼、黄花鱼〉面包鱼．对甲基对硫磷，由IC50所得到的AChE敏感性为：鲅鱼〉鲈鱼〉黄鱼、黄花鱼、真鲷、黑鲷、黑头鱼、鳗鲡〉美国红鱼〉面包鱼；由Ki所得到的AChE敏感性为：鲅鱼〉鲈鱼、黄鱼、黄花鱼、黑鲷、黑头鱼、鳗鲡〉真鲷〉美国红鱼〉面包鱼．鲅鱼脑AChE对2种有机磷农药都较为敏感．影响鱼脑AChE对有机磷农药敏感性的主要因素为生物来源、农药种类和抑制方式，而与酶的基础活性无关．海鱼脑AChE活力抑制作用与水体中的有机磷农药具有良好的剂量-效应关系，在1～50mg／L浓度范围内，两者间呈现较好的线性相关性（r^2≥0．93）．根据AChE的敏感性及其对有机磷农药的线性响应程度，鲅鱼脑AChE适于作为监测马拉硫磷和甲基对硫磷酶传感器的指示酶．
- 朱小山孟范平朱琳何东海杨瑶
- 关键词：海洋鱼类乙酰胆碱酯酶有机磷农药
- 有机磷农药对海洋动物乙酰胆碱酯酶(AChE)的毒性效应研究进展被引量：35
- 2003年
- 近几十年来，农业和海水养殖业所使用的有机磷农药 (OPs) 造成沿岸海水的严重污染，威胁到海洋动物的生存。有机磷农药的海洋生态毒理学研究已经成为海洋环境科学中的热门领域之一。作为动物神经传导过程中的关键酶，乙酰胆碱酯酶 (AChE) 能够被有机磷农药专一性抑制，因此，有机磷农药对海洋动物 AChE 的影响受到更多的关注。本文以近年来该领域的研究成果为基础，综述了有机磷农药对海洋动物乙酰胆碱酯酶的毒性效应。
- 何东海孟范平朱小山
- 关键词：有机磷农药OPS乙酰胆碱酯酶海洋动物
- 鲅鱼脑组织AChE的分离纯化及某些生化性质被引量：21
- 2006年
- 采用亲和层析法对鲅鱼[Scomberomorus niphonius （Cuvier）]脑组织的胆碱酯酶[acetylcholinesterase （ACHE），EC3．1．1．7]进行分离纯化，然后对其进行底物特异性、过量底物抑制效应和抑制剂选择性检验。结果证实：该酶为乙酰胆碱酯酶（ACHE），其最大比活力为297．82μmol／（min·mg），最佳pH范围在7．0～8．0之间，最佳温度为30℃。此酶经过SDS—PAGE呈一条带，表明其纯度达电泳纯。
- 朱小山孟范平何东海
- 关键词：乙酰胆碱酯酶分离纯化生化性质
- 有机磷农药的检测装置
- 有机磷农药的检测装置，它包括清洁水样与待测水样的进样装置、识别元件与pH电极构成的酶传感器计算机自动控制装置，其特征是它还包括分别与识别元件及蠕动泵相通的底物注入和酶传感器活性恢复装置。上述进样装置分别为相应的电磁阀制动...
- 孟范平何东海杨正先马冬朱小山李桂芳
- 海水条件下固定化乙酰胆碱酯酶(AChE)的基本性质研究
- 2007年
- 以固定化AChE为识别元件,以pH电极为换能器构成流动注射型生物传感器,由蠕动泵持续输送海水,然后向体系中注入一定量的底物溶液,所产生的模拟信号经过A/D转换装置后成为数字信号(电位),并在计算机上显示。结果表明,该固定化酶在同种海水中所表现的酶活之间具有良好的重现性(RSD=2.33%,n=12);底物(碘化硫代乙酰胆碱)溶液的最佳浓度和注射量分别为41.6 mmol/L和40μL,过量底物对此固定化酶有抑制作用;海水的适宜流速为0.39 mL/min;环境条件对固定化酶的活性有一定影响,在盐度为24.9、温度为30℃时,固定化酶具有最高活性。
- 何东海孟范平
- 关键词：固定化酶生物传感器
