余榕捷
- 作品数：72 被引量：207H指数：8
- 供职机构：暨南大学更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生农业科学化学工程更多>>
- 重组蛋白PTD-HSP27的制备及其穿细胞膜和角膜组织的功能研究被引量：5
- 2015年
- 目的:制备PTD-HSP27蛋白并研究其能否穿过人晶状体上皮细胞SRA01/04细胞膜及新西兰大白兔的角膜组织进入眼前房。方法:利用重叠延伸PCR法获得重组目的基因片段PTD-HSPB1-6His,构建重组质粒p KYB-PTD-HSP27-6His,原核诱导PTD-HSP27蛋白表达及纯化重组蛋白后对其进行Western blotting鉴定;用异硫氰酸荧光素(FITC)标记重组蛋白PTD-HSP27并检测其穿透SRA01/04细胞膜的能力及兔眼角膜组织的能力。结果:成功构建并纯化制备目的蛋白PTD-HSP27,在PTD-HSP27孵育后的SRA01/04细胞及结膜囊滴注PTDHSP27兔眼前房内均可检测出重组蛋白PTD-HSP27。结论:通过重叠延伸PCR法及镍柱层析纯化法可以获得较纯的重组蛋白PTD-HSP27;重组蛋白PTD-HSP27能够穿透SRA01/04细胞膜及穿越兔眼角膜进入房水。
- 刘莲余榕捷戴云曾智星郭晓令季青山钟敬祥
- 关键词：蛋白转导域热休克蛋白27晶状体上皮细胞
- 一种垂体腺苷酸环化酶激活多肽衍生物及其制备方法
- 本发明属于基因工程技术领域，涉及一种腺苷酸环化酶激活多肽衍生物，该衍生物其氨基酸序列如序列表所示，其特征在于它的氨基端添加一个甲硫氨酸(Met)，羧基端通过硫酯键连接一个β－巯基乙醇分子；该腺苷酸环化酶激活多肽衍生物及其...
- 洪岸余榕捷
- 文献传递
- 重组VPAC1受体特异激动剂RVPAC1－A及其表达方法与应用
- 本发明公开了一种重组VPAC1受体特异激动剂RVPAC1－A及其表达方法与应用。本发明的重组多肽RVPAC1－A是新型的重组的VPAC1受体的特异激动剂，鉴于VPAC1作为PACAP和VIP共同的受体，在中枢神经系统、周...
- 洪岸余榕捷
- 文献传递
- 荧光互补与光能量共振转移检测B类G蛋白偶联受体PAC1二聚化被引量：2
- 2012年
- G蛋白偶联受体(G-protein couple receptors,GPCRs)是最大的超家族膜受体,其中它的B家族成员垂体腺苷酸环化酶激活肽1(PAC1)是垂体腺苷酸环化酶激动多肽(PACAP)的特异受体,介导PACAP神经保护等功能,是神经系统疾病药物开发的重要靶点之一。二聚化或寡聚化是GPCRs普遍存在的现象,但是目前尚没有关于PAC1形成同源二聚体或寡聚体的报道。为了验证PAC1也能进行同源二聚化,该文采用生物发光能量转移(bioluminescence resonance energy transfer,BRET)方法进行检测,结果显示不同浓度梯度共转染中国仓鼠卵巢细胞(Chinese hamster ovary,CHO)的PAC1-Rluc与PAC1-EYFP重组载体,在底物腔肠素h(coelenterazine h)作用下呈现明显的BRET信号。双分子荧光互补(BiFC)检测显示,带有EYFP N端基因标记的PAC1与带有EYFP C端基因标记的PAC1共转染CHO细胞,能呈现完整的EYFP荧光信号。同时,Western blot检测也显示,高表达PAC1的细胞中可检测到PAC1二聚体的大分子。因此,PAC1是能够进行正常同源二聚化的,这个发现将为后续神经损伤药物的开发奠定全新的理论基础,同时也为其他GPCRs同源二聚化的研究起到启发和借鉴作用。
- 郭晓令余榕捷钟佳萍李梅曾智星刘晓飞
- 关键词：GPCRS
- 重组VPAC2型受体特异激动剂RMROM及其表达方法与应用
- 本发明公开了一种重组VPAC2型特异激动剂RMROM及其表达方法与应用。本发明的RMROM是新型的VPAC2型受体的特异激动剂，具有更高的降低血糖的功能，可应用于与VPAC2型受体密切相关的疾病的诊断和治疗。同时，利用本...
- 洪岸余榕捷
- 文献传递
- 垂体腺苷酸环化酶激活肽基因合成表达和产物纯化与鉴定被引量：3
- 2004年
- 为利用基因工程技术获得垂体腺苷酸环化酶激活肽 (pituitaryadenylatecyclaseactivatingpolypeptide ,PACAP) ,根据大肠杆菌的密码偏好性 ,设计并人工合成编码 38个氨基酸的PACAP基因 .克隆到表达载体pET 35b(+) ,构建重组质粒pET PACAP ,转化大肠杆菌BL2 1 (DE3)pLysS+ .实现纤维素结合域 (cellulosebindingdomain ,CBD)与PACAP融合蛋白的表达 ,并在两者之间引入 (凝血 )因子Ⅹa识别位点 (Ile Glu Gly Arg↓ ) .融合蛋白CBD PACAP经纤维素亲和层析纯化后 ,因子Ⅹa酶切释放PACAP .在因子Ⅹa识别位点前引入 7个氨基酸的柔性短肽 (Gly Thr Gly Gly Gly Ser Gly)明显提高了融合蛋白对因子Ⅹa的敏感性 .HPLC进一步纯化得到纯度大于 95 %PACAP多肽 .所得的PACAP多肽的Western印迹鉴定为阳性 ;激光飞行质谱测定分子量结果与理论值相符 .生物活性分析表明 ,所制备的PACAP具有促进胰腺癌细胞株SW 1
- 余榕捷洪岸张玲周天鸿戴云高媛
- 关键词：垂体腺苷酸环化酶激活肽基因合成
- 靶向神经肽受体PAC1-R的小分子别构调节化合物SPAM及其制备方法和用途
- 本发明公开了靶向神经肽受体PAC1‑R的小分子别构调节化合物SPAM及其制备方法和用途。其结构式如式（Ⅰ）所示，其中R<Sup>1</Sup>=OH或NH；R<Sup>2</Sup>=无或H<Sub>2</Sub>0或H...
- 余榕捷
- 文献传递
- SZZ-Harpin融合蛋白在苏云金芽孢杆菌中的表达及活性测定被引量：4
- 2003年
- PCR扩增编码SZZ短肽与植物过敏素 (harpin)融合蛋白的 1 5kb基因片段 ,克隆到苏云金杆菌 (Bacillusthuringiensis ,Bt)表达载体pHZB1上 ,并置于晶体蛋白cry1类基因的启动子下游 ,从而构建表达质粒pHSZH。将表达载体pHSZH电激转化晶体缺陷型的BtK CryB菌株 ,获得工程菌Bt pHSZH。SDS PAGE蛋白分析和生物测定结果显示 ,培养 4 8h的Bt pH SZH明显表达SZZ Harpin融合蛋白 。
- 余榕捷洪岸庞义余健秀董春
- 关键词：过敏反应苏云金芽孢杆菌
- Maxadilan 对兔角膜上皮细胞的促增殖作用
- 2011年
- 目的探讨垂体腺苷酸环化酶激活肽(pituitary adenylate cyclase activating polypeptide,PACAP)的PAC1受体特异激动剂Maxadilan对角膜上皮细胞的促增殖作用。方法分离新西兰大白兔角膜上皮细胞,并在含体积分数10%胎牛血清的DMEM培养基中培养。利用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测兔角膜上皮细胞PACAP的PAC1受体;细胞增殖实验采用CCK-8法检测,角膜上皮细胞培养基中分别加入0.01μmol.L-1、0.03μmol.L-1、0.05μmol.L-1、0.10μmol.L-1、0.15μmol.L-1Maxadilan作为实验组,未加入Maxadilan作为对照组,检测不同浓度的Maxadilan对角膜上皮细胞增殖的影响;流式细胞仪分析0.10μmol.L-1Maxadilan对细胞周期的影响。结果 RT-PCR检测显示兔角膜上皮细胞含有PACAP的PAC1受体;CCK-8法检测显示0.05μmol.L-1、0.10μmol.L-1、0.15μmol.L-1Maxadilan实验组分别比对照组细胞增多29.1%、41.5%、32.5%,与对照组相比差异有统计学意义(P分别为0.001、0.000、0.000);流式细胞仪分析显示0.10欁μmol.L-1Maxadilan组细胞增殖指数平均值为35.98%,与对照组细胞细胞增殖指数平均值29.48%相比,差异有统计学意义(P=0.014)。结论角膜上皮细胞存在PACAP的PAC1受体,Maxadilan对角膜上皮细胞有促增殖作用。
- 招志毅陈建苏余榕捷谭美华李红阳李红阳刘晓飞
- 关键词：MAXADILAN角膜上皮细胞细胞增殖
- 小环肽CHSDGIC对兔角膜碱烧伤愈合的作用
- 2011年
- 目的研究垂体腺苷酸环化酶激活多肽衍生的小环肽CHSDGIC对兔角膜碱烧伤愈合的促进作用,为临床治疗提供新思路。方法制作兔角膜碱烧伤模型。14只新西兰大白兔随机平均分为2组:一组为实验组,碱烧伤后给予小环肽滴眼液滴眼(100μmol.L-1),每天3次,持续21d;另一组为对照组给予生理盐水滴眼。碱烧伤后每天观察眼前段情况,在不同的时间点(碱烧伤后第2、7、14、21天)通过角膜荧光素染色测量角膜着色面积,并在治疗结束后进行角膜组织学检查。结果角膜碱烧伤后在不同时间点(第2、7、14、21天)测量的角膜荧光素染色面积,实验组分别为(1.85±0.10)mm2、(4.56±0.22)mm2、(3.39±0.13)mm2、(0.44±0.10)mm2;对照组分别为(2.33±0.15)mm2、(6.80±0.26)mm2、(9.09±0.24)mm2、(5.03±0.24)mm2,两组之间差异均有统计学意义(均为P<0.05)。HE染色检查发现实验组角膜上皮修复较完整,基质层未见明显炎症细胞及少量血管内皮细胞。对照组角膜上皮与基底部结合疏松,可见明显炎性细胞。结论小环肽CHSDGIC能促进碱烧伤后角膜上皮的修复,可能成为恢复角膜完整性及透明性的极有潜力的治疗药物。
- 丁勇汤翠翠汤翠翠黄霖余榕捷赵秀丽黄霖
- 关键词：角膜碱烧伤
