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褪黑素的生理活性研究进展被引量：21: 2006年; 介绍褪黑素生理活性及作用机制的研究进展,讨论褪黑激素在药品和功能保健品研究开发方面的广阔前景。; 何炜李晓晔石鑫侯建伟洪良健张生勇; 关键词：褪黑素松果体素生理活性

重组人半乳凝集素-1的原核表达、纯化及生物活性检测: 2010年; 目的:在大肠杆菌中表达半乳凝集素-1(galectin-1),并进行纯化及生物活性检测。方法:将人半乳凝集素-1基因克隆至带有His融合标签的原核表达载体pQE-30上,转化大肠杆菌M15,经IPTG诱导表达,表达产物经亲和层析纯化后,进行Western印迹鉴定,并用红细胞凝集试验检测其生物学活性。结果:双酶切鉴定和核苷酸序列测定表明重组表达质粒pQE-30-Galectin-1构建正确;重组蛋白的表达量约占菌体总蛋白的50%,主要以可溶形式表达,纯化后蛋白纯度达95%以上,且具有良好的红细胞凝集活性。结论:在大肠杆菌中表达了重组人半乳凝集素-1,且具有良好的生物活性。; 李晶贺丽清舒震侯建伟陈霖徐玉金张伟张英起; 关键词：原核表达纯化

PD-1核心启动子的获得及活性鉴定: 2010年; 目的:构建PD-1(programmed death receptor 1)全长启动子及不同截短体的报告基因,并对其转录活性进行检测。方法:通过PCR及双酶切方法,从人全血基因组DNA中获得PD-1基因编码序列,包含不同长度碱基的PD-1启动子序列,分别克隆到报告基因pGL3-Basic载体上,构建8个不同长度PD-1启动子的报告基因;用脂质体转染法将8个报告基因分别转染至Jurkat细胞系;采用双萤光素酶报告基因系统评估PD-1启动子的活性。结果:经PCR方法扩增出大小分别为1650、1450、1250、1128、874、674、474和274 bp的不同长度的PD-1启动子序列,测序正确(与GenBank报道一致),酶切鉴定正确;瞬时转染Jurkat细胞系后经报告基因检测,8个启动子均具有转录活性。结论:构建了PD-1启动子的报告基因,并证实均有转录活性,且以pGL3-1128活性最高,为PD-1的核心启动子,为进一步研究PD-1的转录调控奠定了实验基础。; 侯建伟秦鑫李晶舒震陈霖徐玉金赵薇张伟张英起; 关键词：PD-1 核心启动子转录调控

高效液相色谱荧光法测定Beagle犬血浆中酒石酸美托洛尔对映体浓度被引量：2: 2006年; 目的：建立Beagle犬血浆中酒石酸美托洛尔对映体浓度的高效液相色谱荧光测定方法。方法：Beagle犬口服消旋体酒石酸美托洛尔100rag后取1．5h血样进样测定，手性色谱柱为Chiralcel OD—H，流动相为正己烷-异丙醇-二乙胺（65：35：0．1），荧光检测波长Ex和Em分别为267nm、290nm，柱温为25℃，流速为0．6ml／min，内标物为（S）-阿替洛尔。结果：酒石酸美托洛尔2种对映体检测浓度在10～2000ng／m1范围内线性关系良好，平均回收率为96．12％～116．9％（RSD〈7．6％）。结论：该分析方法选择性好、准确性高、重现性好，适于酒石酸美托洛尔对映体的药动学研究。; 刘雪英张巍巍苗青杨默媛侯建伟王庆伟张生勇; 关键词：酒石酸美托洛尔高效液相色谱荧光法 BEAGLE犬

重组人B7-H1IgV发酵纯化工艺的建立及其抑瘤活性被引量：1: 2010年; 目的建立大规模生产重组人B7-H1IgV(rhB7-H1IgV)的发酵和纯化工艺,并检测纯化蛋白的抑瘤活性。方法对rhB7-H1IgV工程菌进行发酵培养,IPTG诱导表达,采用超声裂菌分离包涵体,梯度复性,2次Ni亲和层析等步骤纯化目的蛋白,并进行SDS-PAGE、Westernblot分析及抑瘤活性检测。结果在建立的发酵工艺下,rhB7-H1IgV的表达量可达菌体总蛋白的(10～11)%;纯化的rhB7-H1IgV蛋白经HPLC检测,纯度可达95%以上,Westernblot检测具有良好的反应原性;动物实验表明纯化的重组蛋白能诱导BALB/c小鼠产生高滴度的抗B7-H1抗体,且对肿瘤的生长具有明显的抑制作用。结论所建立的rhB7-H1IgV发酵纯化工艺简单迅速,为其开发和应用奠定了基础。; 陈霖李晶侯建伟舒震张伟张英起; 关键词：B7-H1 发酵纯化抑瘤活性

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侯建伟