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倪海峰: 作品数：10 被引量：29H指数：3; 供职机构：东南大学附属中大医院更多>>; 发文基金：国家自然科学基金江苏省自然科学基金自治区科技支疆项目计划更多>>; 相关领域：医药卫生更多>>

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血液透析患者动脉粥样硬化进展的机制探讨: 刘晶马坤岭高民倪海峰刘宏王艳丽张晓良刘必成

冬虫夏草菌粉对5／6肾大部切除大鼠肾脏纤维化的抑制作用及机制被引量：8: 2013年; 目的探讨冬虫夏草菌粉对5／6肾大部切除术大鼠肾脏纤维化的抑制作用及其可能机制。方法30只雄性SD大鼠随机分为3组：假手术组（Sham组，n=10）、5／6肾大部切除模型组（SNX组，n=10）以及5／6肾大部切除＋冬虫夏草菌粉干预组（CS组，n=10）。术前及术后4、8、12周分别检测大鼠体质量、尿蛋白量变化，并于术后第12周末处死大鼠，检测血尿素氮、肌酐变化，取肾组织切片行HE、Masson染色观察肾脏病理变化，免疫组化观察转化生长因子β1（TGF—β1）及其I型受体（T13RI）、Ⅱ型受体（T13RII）的表达，免疫荧光观察E—cadherin、α—SMA的表达，Western印迹法检测肾脏组织TGF-β1、TβRI、TβR1I、磷酸化（P）Smad2／3、Smad7、E钙黏蛋白（E—cadherin）、α平滑肌肌动蛋白（α—SMA）的表达。结果术后CS组大鼠的体质量高于SNx组，尿蛋白量及血尿素氮、血肌酐低于SNx组。肾脏组织病理分析显示，CS组肾小球硬化、肾小管间质损伤程度均显著低于SNx组（均P〈0．01）。CSs组TGF-β1、T13RI、TβRII、p-Smad2／3蛋白表达量均显著低于SNx组（均P〈0．05），E—cadherin蛋白表达量显著高于SNx组（P〈0．05），α—SMA蛋白表达量显著低于SNx组（P〈0．05），Smad7蛋白表达量显著高于SNx组（P〈0．05）。结论冬虫夏草菌粉对5／6肾大部切除大鼠肾脏纤维化具有明显的抑制作用，其机制可能是与其抑制TGF-β1及其下游信号通路以及抑制EMT的发生有羊．; 潘明明张明辉倪海峰陈俊峰徐敏刘必成; 关键词：冬虫夏草纤维化转化生长因子Β1

CKD患者尿沉渣中CCN2/CCN3 mRNA检测的临床意义探讨: 2013年; 目的:探讨慢性肾脏疾病(CKD)患者尿沉渣中CCN2(结缔组织生长因子,CTGF)和CCN3(肾母细胞瘤过度表达因子,NOV)mRNA检测及其在监测肾脏损伤中的意义。方法:研究包括35名非糖尿病的CKD患者和12名健康成人。尿沉渣中CCN2/CCN3 mRNA的检测采用Real time-PCR方法。35例CKD患者中17例患者接受了肾活检,这些肾活检组织的肾小球病变程度经PAS染色后评估。结果:CKD患者组尿CCN2/CCN3 mRNA的表达较正常对照组显著升高,而其尿沉渣mRNA的水平与患者的蛋白尿水平并不相关,尿沉渣CCN3mRNA的水平与肾小球病变程度呈负相关。此外,尿沉渣中CCN2/CCN3的比率与肾小球硬化的程度密切相关。结论:尿沉渣中CCN2/CCN3mRNA的比值与CKD患者的肾小球硬化程度密切相关,提示该项检测可能成为非创伤性评估CKD患者肾脏病变程度的有效检查手段。; 陈珑高民高民高民刘丹刘丹倪海峰刘必成; 关键词：慢性肾脏疾病

糖尿病肾病患者尿液足细胞相关mRNA水平研究: 郑敏吕林莉倪杰倪海峰李青马坤岭刘必成

石蜡切片免疫荧光染色在肾活检组织病理诊断中的应用被引量：4: 2013年; 目的探讨使用10%中性福尔马林固定、石蜡包埋的肾活检组织做免疫荧光染色在病理诊断应用中的可行性。方法选择慢性肾脏病患者的肾穿刺活检组织标本,分别留取作石蜡切片及冰冻切片。对石蜡切片进行脱蜡、抗原修复及直接免疫荧光染色,并将染色结果与冰冻切片免疫荧光染色结果进行比较。结果石蜡切片经高温修复联合酶消化法进行免疫荧光染色,C1q及C3阳性率、分布部位和强度与冰冻切片免疫荧光染色结果相一致;石蜡切片IgA、IgM及IgG染色分布部位与冰冻切片无差别,阳性率和染色强度略低于冰冻切片,但不影响诊断,其结果与冰冻切片染色的诊断符合率吻合度较高。且石蜡切片具有组织结构保存好、免疫沉积物清晰、易于判断结果等优点。结论石蜡切片与冰冻切片的免疫荧光染色效果相当,可在肾脏病理诊断中作为冰冻切片免疫荧光染色一种较好的技术补充方法。; 弓玉祥刘晶倪海峰张洋马坤岭; 关键词：肾穿刺活检石蜡切片冰冻切片免疫荧光染色

炎性反应激活CXC型趋化因子配体16信号通路进而促进糖尿病肾病进展被引量：3: 2016年; 目的探讨微炎症状态下CXC型趋化因子配体16（CXC chemokine ligand 16,CXCL16）及其受体CXC型趋化因子受体6（CXC chemokine receptor6，CXCR6）途径在糖尿病肾病（diabetic nephropathy，DN）进展中的作用。方法8周龄雄性2型糖尿病小鼠（db／db小鼠）随机分为DN组（n=8）和DN微炎症组（n=8）。参照本课题组既往建立的方法，背部皮下注射10％酪蛋白制备微炎症模型。体外肾小管上皮细胞（HK-2细胞）分为高糖组和高糖＋IL-1β组，观察各组细胞中脂质沉积及细胞损伤的情况；并应用RNA于扰沉默CXCL16的表达，分为高糖＋IL-1β组、高糖＋IL-1β＋siCXCL16组、高糖＋IL-1β＋空载体组，以验证CXCL16信号通路的作用。24h尿蛋白量及尿N-乙酰-β—D-氨基葡萄糖苷酶（NAG）评估8周内小鼠。肾功能变化，电镜观察第8周肾组织的超微结构。Filipin染色及细胞内游离胆固醇定量观察肾组织及HK一2细胞中胆固醇沉积情况；免疫组化、Western印迹检测肾组织CXCL16信号通路相关分子（CXCL16、CXCR6、解整合素样金属蛋白酶10）、纤维化相关分子（纤连蛋白和α平滑肌肌动蛋白）的蛋白表达；实时定量PCR和Western印迹分别检测HK-2细胞中CXCL16信号通路相关分子、纤维化相关分子的mRNA和蛋白表达，及细胞免疫荧光检测HK-2细胞中CXCL16信号通路相关分子表达。结果微炎症组小鼠24h尿蛋白量及尿NAG高于DN组，第8周两组差异均有统计学意义（均P〈0．05）。与DN组比较，微炎症组小鼠电镜下肾小管细胞中空泡增多，同时伴有线粒体水肿、变形以及数量减少；且微炎症组小鼠肾组织中的胆固醇沉积，纤维化相关分子的蛋白表达均高于DN组（均P〈0．05）；进一步研究表明，与DN组比较，微炎症组小鼠肾组织CXCL16信号通路相关分子的蛋白表达均增加（均P〈0．05）。体外高糖＋IL-1β组细胞CXCL16信号通路相关分子、纤维; 胡泽波马坤岭张洋王桂花刘亮鲁荐陈佩佩倪海峰刘必成; 关键词：糖尿病肾病炎症脂代谢障碍趋化因子CXCL16

脂蛋白a促进终末期肾病患者动脉粥样硬化进展: 2017年; 目的:研究脂蛋白a(lipoprotein a,Lpa)在终末期肾病(end-stage renal disease,ESRD)动脉粥样硬化中的作用,并进一步探讨CXC趋化因子配体16(CXC chemokine ligand 16,CXCL16)和低密度脂蛋白受体(low density lipoprotein receptor,LDLr)是否介导了Lpa的胞内摄入。方法:根据血浆Lpa质量浓度将46例ESRD患者分为对照组[ρ(Lpa)<300 mg·L^(-1),n=23]和高Lpa组[ρ(Lpa)≥300 mg·L^(-1),n=23]。检测两组患者的生化指标和脂质谱。取ESRD患者动静脉内瘘手术时桡动脉边缘切除的组织,HE染色观察其泡沫细胞形成、Filipin染色观察其胆固醇沉积;免疫组化和免疫荧光染色观察其Lpa的沉积;免疫组化观察LDLr和CXCL16的表达;免疫荧光共染分别观察Lpa和LDLr、Lpa和CXCL16的共表达。结果:与对照组比较,高Lpa组ESRD患者的桡动脉中泡沫细胞增多、胆固醇沉积增加、Lpa沉积增加、CXCL16和LDLr表达增加(均P<0.05);相关性分析显示,血浆Lpa质量浓度与Lpa沉积程度(r=0.72,P<0.01)、LDLr表达(r=0.54,P<0.01)、CXCL16表达(r=0.6,P<0.01)均呈正相关。进一步免疫荧光共染发现,高Lpa组的桡动脉组织中Lpa与LDLr、CXCL16共表达均增加(均P<0.05)。结论:Lpa在ESRD患者桡动脉中沉积,促进泡沫细胞形成,进而导致动脉粥样硬化的发生,LDLr和CXCL16可能是介导Lpa进入桡动脉组织细胞内的主要脂蛋白受体。; 贡铁凯弓玉祥胡泽波张洋王桂花刘亮鲁荐陈佩佩芦琛琛倪海峰刘必成马坤岭; 关键词：脂蛋白A 动脉粥样硬化低密度脂蛋白受体终末期肾病

微炎症致脂质稳态失调在小鼠心肌纤维化中的作用被引量：2: 2013年; 目的观察微炎症致脂质稳态失调在载脂蛋白E基因敲除（apolipoprotein E knockout，ApoE-／-）小鼠心肌纤维化中的作用，并探讨内皮-问充质转化（endothelial-mesenehymal transition，End—MT）在其中的作用机制。方法24只ApoE-／-小鼠分为对照组（普通饮食，n：8），高脂组（高脂饮食，n=8）和高脂炎症组（高脂饮食，且每日背部皮下注射10％酪蛋白0．5ml，n=8）。干预8周后处死小鼠，检测血清脂质谱及炎症标志物淀粉样蛋白A（serumamloidA，SAA）水平；采用苏木素伊红染色观察心脏内血管泡沫细胞的形成；Masson染色观察心肌纤维化情况；免疫组织化学、免疫荧光染色及Westernblot检测End—MT相关蛋白表达水平，如CD31、胶原I、α-平滑肌肌动蛋白（α-smoothmuscleaetin，α—SMA）。结果高脂炎症组小鼠SAA水平明显高于对照组和高脂组[（127．42±26．99）ng／ml比（15．40±7．62）ng／ml和（8．17±0．72）ng／ml，P值分别为0．003和0．002]，而高脂炎症组血清甘油三酯（TG）、总胆同醇（TC）及低密度脂蛋白胆固醇（LDL—C）水平却均明显低于高脂组[TG值为（3．43±0．79）mmol／L比（7．53±2．05）mmol／L；TC值为（14．94±1．92）mmol／L比（27．80±3．99）mmol／L；LDL—C值为（9．46±1．31）mmol／L比（11．56±2．56）mmol／L，P均〈0．05]。苏木素伊红染包及Masson染色显示，与对照组和高脂组相比，高脂炎症组小鼠心脏内血管有更多泡沫细胞形成，且心肌纤维化程度更重。免疫组织化学及Westernblot结果显示，高脂炎症组胶原I、α-SMA表达水平均较对照组和高脂组高（P均〈0．001），而CD31表达水平则均较对照组和高脂组低（P均〈0．05）。结论微炎症致脂质稳态失调在ApoE-／-小鼠心肌纤维化过程中发挥着重要作用，其机制可能与诱导End—MT发生有关.; 马坤岭刘晶倪杰张洋倪海峰吕林莉刘必成; 关键词：心肌纤维化

一例单克隆IgG3κ沉积的增生性肾小球肾炎合并活动性丙型肝炎临床分析: 2021年; 病例资料患者,女,77岁,因"反复双下肢水肿2个月,加重1周"于2019年9月18日入院。患者2月前无明显诱因出现双下肢水肿,晨轻暮重,双下肢皮温正常,无胀痛,无间歇性跛行,无关节疼痛,当地医院查24 h尿蛋白定量1.4 g, 血肌酐79 μmol//L,丙肝病毒RNA定量 1.31×106 IU/mL,建议患者行肾穿刺活检术同时感染科就诊行抗丙肝治疗,患者及家属拒绝,予对症治疗。近一周双下肢水肿加重,乏力纳差,自诉尿泡沫较前增多。; 徐超莫颖倪海峰刘必成王凤梅张蕾; 关键词：丙型肾活检

冬虫夏草菌粉对5/6肾大部切除大鼠肾脏氧化应激及线粒体功能的影响被引量：12: 2015年; 目的观察冬虫夏草菌粉对5/6肾大部切除大鼠肾脏氧化应激及线粒体功能的影响,初步探讨其肾脏保护机制。方法 30只雄性SD大鼠按随机数字表法分为假手术组、模型组和治疗组,每组10只。采用一步法5/6肾大部切除术制备大鼠模型。治疗组大鼠给予2.0 g/(kg·d)虫草菌粉剂量行灌胃处理,1天1次,同时假手术组及模型组灌胃给予等量的双蒸水,持续12周。观察各组大鼠一般情况及大鼠术前、术后第2、4、6、8、10、12周体重及血压变化;检测各组大鼠24 h尿蛋白定量、尿N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶(NAG)、血清肌酐(SCr)及尿素氮(BUN)量;光镜下观察肾脏病理改变及评分比较;透射电镜观察肾小管上皮细胞线粒体形态变化;检测新鲜肾组织匀浆氧化应激相关指标:还原型谷胱甘肽(GSH)、锰超氧化物歧化酶(MnSOD)及丙二醛(MDA);提取肾组织线粒体检测膜电位及活性氧(ROS)变化;Western blot检测线粒体及胞浆细胞色素-C(Cyto-C)、抗增殖蛋白(Prohibitin)表达程度。结果 (1)与假手术组比较,模型组术后第2周体重下降(P<0.01),术后第4周血压升高(P<0.05);与模型组比较,治疗组术后第12周体重升高(P<0.01),术后第8周血压明显降低(P<0.01)。(2)与假手术组比较,模型组大鼠24 h尿蛋白定量、尿NAG、血SCr及BUN明显升高(均P<0.01);与模型组比较,治疗组尿、血生化指标均明显下降(均P<0.01)。(3)肾脏病理评分结果:模型组肾小球小球硬化指数、小管间质纤维化及炎症细胞浸润程度均高于假手术组(均P<0.01),而治疗组各检测指标较模型组明显改善(P<0.01)。(4)与假手术组比较,模型组大鼠Mn SOD、GSH-Px活性明显下降(均P<0.01),MDA含量明显升高(P<0.01);与模型组大鼠比较,治疗组Mn SOD、GSH-Px活性升高(P<0.05,P<0.01),MDA含量下降(P<0.01)。(5)与假手术组比较,模型组线粒体膜电位明显降低(P<0.01),ROS升高(P<0.01);与模型组比较,治疗组线粒体膜电位升; 张明辉潘明明倪海峰陈俊峰徐敏弓玉祥陈平圣刘必成; 关键词：冬虫夏草氧化应激线粒体纤维化肾脏

倪海峰

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