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牛骨胳肌卫星细胞分离培养体系的建立及MyoG与Myf-6基因在细胞分化过程中的作用: 本文成功建立了牛骨骼肌卫星细胞的体外分离培养、鉴定及诱导分化的方法，该细胞培养技术平台的建立对于研究肌肉分化途径、改良家畜肉质及畜牧业生产具有重要的价值。本研究通过MyoG及Myf-6的高表达及RNA干扰技术研究表明，M...; 兴孝友刘聪聪佟慧丽李树峰严云勤; 关键词：骨骼肌卫星细胞 MYOG 分化

牛骨骼肌卫星细胞的分离培养及诱导分化方法的建立: 2013年; 为了给牛骨骼肌卫星细胞的分离培养及诱导分化方法及进一步揭示肌肉分化的机理及转基因肉牛的研究提供重要帮助，试验以新生胎牛的骨骼肌为试验材料，分别采用胶原酶I和胶原酶Ⅺ与胰蛋白酶结合对其进行消化，; 兴孝友佟慧丽李树峰; 关键词：骨骼肌卫星细胞诱导分化肉牛胰蛋白酶胶原酶转基因

牛MyoG基因启动子的克隆及功能的初步分析被引量：26: 2012年; 本研究旨在比较日本和牛MyoG基因的不同长度片段启动子的活性强弱并初步探讨其中的机制。根据GenBank已公布的牛MyoG基因的启动子序列,设计特异性PCR引物扩增日本和牛MyoG基因的一系列启动子缺失序列,构建重组克隆载体pMD18-T-MyoGpro,对阳性克隆进行限制性酶切鉴定、测序及生物信息学分析,进而构建一系列启动子缺失片段的pGL3-MyoGpro双荧光素酶表达载体,转染牛肌源干细胞(MDSCs)和牛胎儿成纤维细胞,并进行双报告基因活性检测。结果表明,日本和牛MyoG基因的166～2 125bp启动子都能不同程度的启动双荧光素酶报告基因在牛肌源干细胞中的表达,且具有肌肉特异性。通过生物信息学分析得知日本和牛MyoG启动子序列中有1个TATA盒,15个E-box,并可能含有MyoD、MEF2、MEF3、MTBF、TEF1、PRDF、Sp1、多个SRF、ERE、GRE及多个Oct-1等转录因子调控结合位点,本试验通过比较不同长度启动子片段的活性并结合对上述转录因子的分析,认为这些转录因子可能对启动子活性起着重要的调控作用。对牛MyoG基因启动子的克隆与功能和序列分析为进一步研究MyoG基因的表达调控奠定了基础。; 王秋华曹允考李树峰佟慧丽兴孝友李光鹏严云勤; 关键词：MYOG基因启动子序列转染生物信息学分析

牛肌卫星细胞的体外分离培养及诱导分化的方法: 牛肌卫星细胞的体外分离培养及诱导分化的方法，它涉及细胞的体外分离培养及诱导分化的方法。它解决了现有牛肌卫星细胞的分离培养存在成本高，传代稳定性不好，且诱导分化存在所获肌管数量少及不具有收缩功能的问题。方法：清洗组织，用胰...; 严云勤佟慧丽李树峰兴孝友高学军陆黎敏李光鹏金慧然; 文献传递

牛骨骼肌卫星细胞的分离培养及诱导分化方法的建立被引量：10: 2012年; 为了给牛骨骼肌卫星细胞的分离培养及诱导分化方法及进一步揭示肌肉分化的机理及转基因肉牛的研究提供重要帮助,试验以新生胎牛的骨骼肌为试验材料,分别采用胶原酶Ⅰ和胶原酶Ⅺ与胰蛋白酶结合对其进行消化,并通过差速贴壁法对骨骼肌卫星细胞进行分离纯化,同时采用免疫荧光染色、RT-PCR、Western-blot法对骨骼肌卫星细胞进行鉴定。结果表明:研究成功获得了大量的牛骨骼肌卫星细胞;该细胞的标志性分子的mRNA及其蛋白表达的纯度在98%以上;细胞生长状态良好,可稳定传至90代并保持旺盛的增殖活力;细胞分化效率高,2%的马血清能够诱导细胞分化使其融合形成多核肌管,数量众多的肌管可自发融合为更粗的肌管,并可观察到其具有收缩现象。; 兴孝友佟慧丽李树峰严云勤; 关键词：骨骼肌卫星细胞诱导分化

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兴孝友