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光谱法研究Cu^(2+)诱导的不同时间的LDL体外氧化被引量：3: 2009年; 氧化低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein,oxLDL)被认为是动脉硬化的关键致病因素。文章综合运用紫外吸收光谱、荧光光谱、同步荧光光谱及圆二色(circular dichroism,CD)光谱研究了Cu2+诱导不同时间的LDL体外氧化过程。随着氧化时间的增加,生成的丙二醛(malonaldehyde,MDA)的量逐渐增加,其相对应的430nm处的荧光强度也随之加强,氧化过程中生成了新的氧化产物。氧化低密度脂蛋白紫外吸收增强;表征氨基酸残基信息的特征荧光强度和同步荧光强度降低;载脂蛋白B-100(apolipoprotein B-100,apoB-100)α-螺旋含量减少。实验结果表明,LDL氧化过程中Cu2+不仅诱导了氧化产物的生成,而且改变了apoB-100的构象进而导致了生色基团的微环境的变化。; 孙霞刘庆平郑学仿刘哲王仁军黄振宇张帆; 关键词：氧化低密度脂蛋白紫外光谱荧光光谱同步荧光光谱

抗磷脂综合症动脉血栓发病机理研究: 刘庆平松浦荣次王仁军张帆迟彦刘哲林芃李清朱永宁逄越董晓宇李文哲; 本项目属医药卫生基础研究领域，是在国家自然科学基金30371380和教育部留学人员科研启动基金资助下完成的。抗磷脂综合症(antiphospholipid syndrome; APS)是1986年新确立的一种隶属于系统性...; 关键词：; 关键词：抗磷脂抗体氧化型低密度脂蛋白

β_2-糖蛋白I及第五结构域cDNA克隆和序列分析: 2008年; β2-糖蛋白I(β2-glycoprotein I:β2-GPI)是抗磷脂综合症抗磷脂抗体的主要抗原,其与自身免疫性疾病、动脉硬化以及血栓形成等疾病密切相关。在本研究中,我们从人肝组织中成功克隆出人β2-糖蛋白I及其第五结构域的基因,并构建了蛋白表达体系,为寻找β2-糖蛋白I及其功能区与自身免疫性疾病相关抗原和抗体之间、与动脉硬化与血栓形成之间的相关性,为这些疾病的临床治疗和诊断提供理论依据。; 刘哲刘庆平孙霞迟艳王仁军张帆

几种基因组DNA提取方法的比较研究被引量：5: 2008年; 基因组DNA的提取是分子生物学试验中的重要手段,目前提取方法很多,各有优缺点。但每种方法最关键的3步为:破碎细胞壁和细胞膜使DNA释放到缓冲液中;消除蛋白质和多糖色素等杂质污染;防止DNA的降解。一个好的DNA提取方法应符合以下标准:所得到的DNA应当完整,电泳检测应得到高度的精确性和重复性:所得的DNA纯度应应该满足后续试验要求。; 刘哲刘庆平孙霞迟艳王仁军张帆; 关键词：SDS法 CTAB法

C型产气荚膜梭菌α毒素基因的克隆与表达被引量：4: 2005年; 利用PCR技术,从C型产气荚膜梭菌染色体基因组中扩增了1.2kb的α毒素基因,将纯化的PCR产物与载体pGEM-T连接,转化至受体菌JM109中,经NcoI/EcoRI和BamHI/EcoRI酶切鉴定及核苷酸序列测定证实,重组质粒pXCPA1中含有α毒素全基因。随后用NcoI/EcoRI酶切质粒pXCPA1,回收α毒素基因片段,插入到事先经同样酶切处理的载体pET28c中相应酶切位点,构建了表达质粒pETXA1,经NcoI/EcoRI和BamHI/EcoRI酶切鉴定及核苷酸序列测定证实,表达质粒含有α毒素基因且基因序列和阅读框架正确。重组菌株BL21(DE3)(pETXA1)表达产物经ELISA检测和SDS-PAGE分析,重组菌株表达的α毒素蛋白能够被α毒素单抗识别,其表达量占菌体总蛋白相对含量的16.28%。; 许崇波许崇利刘哲陈永燕王仁军; 关键词：C型产气荚膜梭菌 Α毒素基因基因克隆基因表达

C型产气荚膜梭菌β_1毒素基因表达被引量：5: 2004年; 利用PCR技术 ,从C型产气荚膜梭菌染色体DNA中扩增出 β1 毒素基因 ,然后用限制性核酸内切酶BamHI和EcoRI对其进行双酶切处理 ,回收 0 .95kb的β1 毒素基因片段 ,最后将其定向克隆在事先经同样内切酶处理的载体pET - 2 8c中相应位点上 ,转化至受体菌BL2 1(DE3)中。经BamHI和EcoRI双酶切鉴定和核苷酸序列测定证实 ,构建的重组质粒pETXB1含有 β1 毒素基因 ,并且具有正确的基因序列和阅读框架。重组菌株BL2 1(DE3) (pETXB1)经IPTG诱导后 ,其表达产物经ELISA检测和SDS -PAGE分析 ,结果表明重组菌株可以高效表达β1 毒素蛋白 ,该蛋白占菌体总蛋白相对含量的 12 .2 4 %。; 许崇波许崇利朱永宁曹阳刘哲刘庆平; 关键词：C型产气荚膜梭菌基因表达

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刘哲