刘小慧
- 作品数：4 被引量：4H指数：2
- 供职机构：遵义医学院附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金贵州省优秀科技教育人才省长资金项目博士科研启动基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 兔动员外周血间充质干细胞集落形成能力与神经元诱导分化研究被引量：2
- 2014年
- 目的研究动员后兔外周血间充质干细胞(PBMSCs)的存在频率,并对PBMSCs进行神经元诱导分化鉴定。方法采用粒细胞集落刺激因子(G-CSF)皮下注射动员,结合密度梯度离心和贴壁培养法分离、培养兔外周血样品中的PBMSCs,利用集落形成率分析动员兔PBMSCs的存在频率,并对PBMSCs的神经元分化能力进行体外诱导鉴定。结果动员后的PBMSCs原代培养24h后,可见较多短梭形及多角形贴壁细胞,3～4d后出现集落样生长,传代培养的PBMSCs形态均一、呈长梭形漩涡状生长;未动员的外周血样品中的贴壁细胞少,集落形成少,且易老化,无法传代。集落形成率实验显示,动员后的PBMSCs在每百万外周血单个核细胞中有2.8～10.8个;而未动员组PBMSCs仅有0～3个。免疫细胞化学染色显示,PBMSCs经神经诱导7d后其神经元特异性烯醇化酶(NSE)、神经元特性核蛋白(NeuN)染色阳性。结论动员剂可提高兔外周血中的PBMSCs含量,所获取的PBMSCs具备神经元分化能力。
- 刘小慧章涛张潜刘金伟刘祖林汤宁宁
- 关键词：神经元诱导分化
- 家兔外周血间充质干细胞的富集及生物学特性研究
- 目的:建立从动员后家兔外周血分离、扩增外周血间充质干细胞(PBMSCs)的方法，并就家兔PBMSCs表型特征、集落形成率及体外多向分化能力等生物学特性进行研究评价，以确证家兔存在PBMSCs，并为外周血作为间充质干细胞的...
- 刘小慧
- 关键词：间充质干细胞成骨细胞肝样细胞密度梯度离心法
- 人VEGF基因腺病毒表达载体修饰大鼠骨髓间充质干细胞
- 2012年
- 目的探讨含人血管内皮细胞生长因子(VEGF)基因腺病毒表达载体Ad-VEGF转染大鼠骨髓间充质干细胞(BM-MSCs)的可行性。方法采用贴壁培养筛选法富集大鼠BM-MSCs。将HEK293细胞中扩增并经效价分析后的Ad-VEGF转染大鼠BM-MSCs,通过对细胞转染效率、生长和活力的观察分析,以确定理想的感染复数(MOI)值。结果本实验经HEK293细胞扩增制备的Ad-VEGF的病毒效价达8×108pfu/ml;当MOI值为50时,Ad-VEGF转染大鼠BM-MSCs效率可达最高值53%;而MOI值高于50时,Ad-VEGF转染对BM-MSCs活性抑制明显。结论成功实现Ad-VEGF转染大鼠BM-MSCs,其最适MOI值为50。
- 刘艳枚刘小慧方宁刘金伟章涛
- 关键词：血管内皮细胞生长因子腺病毒骨髓间充质干细胞
- 确证家兔外周血中存在具有多向分化能力的间充质干细胞被引量：2
- 2013年
- 本研究确证家兔外周血中存在具有多向分化潜能的间充质干细胞(MSC)。取成年新西兰大白兔,经每日皮下注射粒细胞集落刺激因子30μg/kg动员6 d后采集外周血样品,用Ficoll密度梯度离心和贴壁培养法分离纯化外周血间充质干细胞(PBMSC),镜下观察其生长形态并绘制增殖曲线;流式细胞术分析其表型特征;并分别对培养的PBMSC进行成骨、成软骨及成脂细胞诱导分化能力鉴定。结果表明:①原代培养24 h后,可见较多短梭形及多角形贴壁细胞,3-4 d后出现集落样生长,传代培养的PBMSC形态均一、呈长梭形漩涡状生长;②PBMSC增殖能力旺盛,培养2 d后进入对数生长期,细胞倍增时间为37.4 h;③流式细胞术检测显示,培养的PBMSC高表达CD29,不表达CD14;④PBMSC经成骨诱导培养21 d后,茜素红染色显示有明显的钙结节形成;经微团无血清软骨培养体系诱导培养21 d后,细胞团切片,阿利新蓝染色呈强阳性反应;经成脂诱导培养21 d后,油红染色显示诱导细胞胞浆内有大量脂滴。结论:成功从兔外周血中分离培养了PBMSC,在适宜诱导培养条件下具有向成骨、成软骨、成脂分化的能力。
- 刘小慧章涛方宁张潜黄跃刘金伟汤宁宁
- 关键词：外周血间充质干细胞诱导分化成骨细胞成软骨细胞
