刘正华
- 作品数：9 被引量：58H指数：5
- 供职机构：湖南师范大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划高等学校骨干教师资助计划更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 草鱼基因组DNA一些RAPD位点的遗传分析及分子标记筛选被引量：7
- 2006年
- RAPD技术的实验结果很容易因实验条件和反应参数的不同而造成差异。为了建立能通用的草鱼基因组多态性分析RAPD分子标记体系,需要利用RAPD位点按照孟德尔共显性规律遗传的特点,用不同遗传背景的材料对多态性的RAPD位点进行统计遗传学比较分析以判断其真实性。为此,本实验选择具有遗传多态性的湘江流域草鱼群体和经连续两代人工诱导雌核发育获得的雌核发育草鱼品系,对一些可能作为草鱼基因组DNA分子标记的RAPD位点进行了遗传学比较分析。所用的10条多态性随机引物共检测到30个多态性RAPD位点。两个不同遗传背景群体的遗传统计对比分析结果表明:这30个多态位性位点在湘江流域草鱼群体和雌核发育草鱼群体中的分布符合孟德尔遗传规律,可以作为草鱼基因组DNA分析的可靠分子标记。本实验的观察结果还表明:在人工诱导雌核发育过程中,存在RAPD位点的快速丢失现象,两次人工诱导雌核发育过程中共丢失了17个多态性位点。因此,加强对自然水体中草鱼种质资源多样性的保护和利用各种现代生物学技术纯化、筛选和组合优良性状基因,是草鱼遗传育种中同样重要和不可或缺的两个方面。
- 刘正华陈金辉黄明敏郑康罗琛
- 关键词：草鱼多态性位点分子标记
- 金鱼雌核单倍体发育过程中基因表达的调控障碍
- 建立在两性生殖基础上的二倍体依赖型发育是脊椎动物中普遍存在的发育模式。在哺乳动物配子发生时,父母本分别选择不同的基因打上甲基化印记,使来自精子和卵子的基因组在功能上存在差异但又互补,因而对正常发育都是必需的。然而,基因组...
- 罗敏娜李冰霞郑康刘正华张琼宇童英邱猛生罗琛
- 文献传递
- 草鱼连续两代的雌核发育群体及湘江流域群体基因组DNA的微卫星比较分析(英文)被引量：12
- 2007年
- 对湘江流域草鱼群体,一代及连续两代极体型人工诱导雌核发育草鱼群体基因组DNA的微卫星引物统计分析结果表明:湘江流域草鱼群体存在一定程度的遗传多态性;大多数被检测的微卫星位点上存在两个以上的等位基因,但遗传多样性程度较低。一代人工诱导雌核发育草鱼群体中个体的基因位点已基本纯合,但就整个群体而言,个体之间的基因型还不完全一致,表现出一定的多态性。连续两代人工诱导雌核发育草鱼群体中不仅所检测个体的基因位点已完全纯合,并且各个体的基因型也完全相同。这些观察结果说明所检测的两代人工诱导雌核发育草鱼群体是纯合的,经连续两代人工诱导雌核发育可能建立起草鱼纯系。该实验结果还发现不仅草鱼的微卫星位点上存在等位基因的多态性,而且微卫星位点本身也存在多态性;在人工诱导草鱼雌核发育的过程中不仅存在微卫星等位基因快速丢失的现象,而且也存在微卫星位点丢失的现象。因此,加强对自然水体中草鱼种质资源多样性的保护和利用各种现代生物学技术纯化、筛选和组合优良性状基因,是草鱼遗传育种中同样重要和不可或缺的两个方面。
- 郑康林凯东刘正华罗琛
- 关键词：草鱼雌核发育基因组微卫星位点
- 金鱼胚胎发育过程的功能蛋白质组学研究
- 发育是一种生物的基因组按一定的时间和空间秩序选择性表达为功能蛋白质组的过程。不断发展的蛋白质组学技术为分子发育生物学研究,特别是发育调控机制的揭示提供了新的技术平台。金鱼胚胎发育过程表现出二倍体依赖性,二倍体可正常发育,...
- 曹晶李冰霞刘正华张玲愈晓燕谢锦云罗琛梁宋平
- 文献传递
- 金鱼中vsx1基因抑制脊索中胚层发育调节基因ntl的表达被引量：1
- 2009年
- vsx1是最先在金鱼中发现,在神经视网膜双极细胞的增殖、分化和正常生理功能维持中具有重要作用的转录因子基因.在已经检测的脊椎动物物种中,该基因都在胚胎发育的早期即开始表达,而且其在不同物种中的时空表达模式相似,提示该基因在胚胎发育早期可能具有重要的调节功能.但vsx1在眼睛发育之外的发育调节功能研究尚无报道.本研究对金鱼vsx1过表达和功能抑制对胚胎形体模式形成的影响进行了分析,发现抑制vsx1的功能及其过表达都能严重干扰胚胎背中线脊索结构的发育.基因表达原位杂交分析表明,vsx1过表达能显著抑制脊索中胚层发育关键调节基因ntl在背中线的表达,而vsx1被抑制则ntl在背中线的表达范围显著扩展.凝胶阻滞分析证明VSX1蛋白作为转录因子可与ntl启动子的特定序列直接结合.基因表达分析证明,vsx1能有效抑制ntl启动子控制的报告基因GFP转录.这些结果都证明,vsx1能直接抑制脊索中胚层发育关键调控基因ntl的表达,提示vsx1在胚胎发育早期的主要功能之一可能是抑制脊索中胚层基因在神经管中异位表达,以保障中枢神经系统按正确的模式发育.
- 刘正华陈金辉马珊珊童英罗琛
- 关键词：金鱼VSX1过表达发育
- 异源四倍体鲫鲤及其原始亲本遗传变异的RAPD分析被引量：25
- 2003年
- 在优化RAPD检测条件的基础上,从100个随机引物中筛选出60个扩增较好的引物对异源四倍体鲫鲤及其原始亲本红鲫和湘江野鲤相互间扩增DNA片段的异同性进行比较研究。结果显示,60个引物共产生1554条带,单一引物扩增的DNA片段数在6～20条之间,片段大小在200～3500bp之间。遗传相似率分析表明,异源四倍体鲫鲤与其原始母本红鲫的相似率为69.41%,与其原始父本野鲤的相似率为64.47%,说明异源四倍体鲫鲤接受原始母本红鲫的遗传物质要多一些;而红鲫和野鲤之间的相似率为42.18%,说明两者的基因组成有较大的相似性,从分子水平证实了红鲫和野鲤的远缘杂交具有较大的亲和性。在分析中,还发现异源四倍体鲫鲤有4条非亲本带,非亲本带谱率达0.72%,这些非亲本带可以作为异源四倍体鲫鲤特异性的分子标记。
- 李建中鲁双庆刘少军刘正华张轩杰刘筠
- 关键词：异源四倍体红鲫野鲤RAPD
- 金鱼Vsx1基因结构及其内含子多态性分析被引量：9
- 2007年
- Vsx1是第一个在金鱼中发现的编码含有同源异型框(homeodomain)和CVC结构域蛋白的基因。该基因在胚胎发育的不同阶段在胚胎的不同区域和不同组织中表达,并已经证明它在视网膜视锥双极细胞的分化和正常功能的维持中具有重要作用。为了进一步研究该基因在不同发育阶段组织特异性表达的调节机制,实验用PCR方法分析了金鱼Vsx1的基因组结构和内含子多态性。结果表明:金鱼Vsx1基因由5个外显子和4个内含子组成,与斑马鱼、人、小鼠的Vsx1基因结构相同。4个内含子中,第一内含子有两种序列差异明显的类型,但第二、三、四内含子无明显差异。第一内含子的一种类型比另外一种类型多39个碱基,这39个碱基中包括了真核生物增强子的核心序列。这一观测结果提示金鱼Vsx1第一内含子可能与该基因的发育阶段特异性和组织特异性表达调节有关。同时,第一内含子序列的明显差异也为分析Vsx1不同等位基因或基因拷贝的表达活性,以及组织特异性表达调节方式提供了合适的探针序列。
- 童英李冰霞陈金辉刘正华郑康罗琛
- 关键词：金鱼VSX1基因结构内含子多态性
- 雌核发育草鱼基因组DNA的一些RAPD位点及微卫星标记的遗传分析
- 本实验利用随机扩增多态性DNA技术和微卫星DNA分析技术对湘江流域普通草鱼群体、一代及连续两代人工诱导雌核发育获得的极体型雌核发育草鱼群体的基因纯合性及遗传多样性进行了分析。
本实验选择具有遗传多态性的湘江流域草鱼...
- 刘正华
- 关键词：草鱼雌核发育随机扩增多态性DNA微卫星DNA多态性位点
- 文献传递
- 异源精子遗传物质对雌核发育草鱼基因组的影响分析被引量：6
- 2008年
- 为分析外源精子对人工诱导雌核发育草鱼基因组的影响,用随机扩增多态性和微卫星技术对经两代连续人工诱导,遗传背景一致的雌核发育草鱼以及母本草鱼和父本鲤鱼的基因组DNA进行了比较分析。10个随机引物在雌核发育草鱼中共检测到104个RAPD位点,在鲤鱼中检测到103个位点。7对微卫星引物在雌核发育草鱼中共扩增出4个微卫星位点,在鲤鱼中检测到22个位点。两种方法在雌核发育草鱼和鲤鱼中所检测到的位点均没有一个相同。根据RAPD和微卫星分析数据进行的遗传相似度分析表明二代人工雌核发育草鱼群体与其一代人工诱导雌核发育草鱼母本的遗传相似度从0.9903到1.000,与父本鲤鱼的遗传相似度为0.000。这些实验结果证明在适当的紫外线处理强度下,鲤鱼精子的遗传物质能够被完全破坏,不会对雌核发育草鱼的基因组造成遗传污染。
- 胡海星郑康陈金辉刘正华张琼宇罗琛
- 关键词：雌核发育草鱼RAPD微卫星遗传相似度
