刘洁
- 作品数：16 被引量：27H指数：3
- 供职机构：江苏省农业科学院更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划江苏省农业科技自主创新基金江苏省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>
- 大肠杆菌O157:H7鼠血清抗体胶体金免疫层析检测试纸条
- 本发明涉及一种大肠杆菌O157:H7鼠血清抗体胶体金免疫层析检测试纸条，属于抗体检测试剂盒技术领域。由颗粒为20nm的胶体金溶液标记纯化的羊抗鼠IgG制成胶体金垫、分别用大肠杆菌O157:H7抗原和纯化的鼠血清IgG包被...
- 王永山刘洁夏兴霞何孔旺张雪寒费荣梅
- 文献传递
- 大肠杆菌O157:H7抗体胶体金免疫层析检测试纸条的研制
- 用颗粒为20nm的胶体金溶液标记纯化的羊抗鼠IgG,制备金标探针,喷涂于玻璃纤维膜上;将大肠杆菌O157:H7抗原和抗大肠杆菌O157:H7单克隆抗体F1分别包被于硝酸纤维素膜上作为检测线和质控线,组装成鼠血清O157:...
- 刘洁夏兴霞王永山张雪寒费荣梅何孔旺
- 关键词：肠出血性大肠杆菌O157:H7胶体金
- 大肠杆菌O157:H7抗体胶体金免疫层析检测试纸条的研制
- 用颗粒为20nm的胶体金溶液标记纯化的羊抗鼠IgG,制备金标探针,喷涂于玻璃纤维膜上;将大肠杆菌O157:H7抗原和抗大肠杆菌O157:H7单克隆抗体F1分别包被于硝酸纤维素膜上作为检测线和质控线,组装成鼠血清O157:...
- 刘洁夏兴霞王永山张雪寒费荣梅何孔旺
- 关键词：肠出血性大肠杆菌O157:H7胶体金
- 文献传递
- 肠出血性大肠杆菌O157：H7 rfbE与fliC基因的表达及鉴定被引量：7
- 2009年
- 利用PCR技术将肠出血性大肠杆菌O157∶H7的rfbE与fliC基因片段分别克隆到pET原核表达系统,在E.coliBL21(DE3)中表达。结果显示rfbE、fliC以包涵体形式表达,表达产量高达总菌体蛋白的40%左右,经His-Bind镍柱纯化目的蛋白,在E.coliBL21(DE3)中表达的rfbE、fliC具有良好的免疫活性。
- 潘群兴王永山刘洁夏兴霞何孔旺张雪寒
- 关键词：肠出血性大肠杆菌FLIC免疫活性
- 动物源性人兽共患细菌病防控生物新制剂的研究Ⅰ．分泌抗大肠杆菌O157：H7单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立被引量：9
- 2009年
- 将E．coli O157：H7（EHEC—O157：H7）用甲醛灭活、超声破碎，免疫BALB／c小鼠，制备免疫脾细胞；与SP2／0骨髓瘤细胞融合后，获得7株分泌抗E．coli O157：H7单克隆抗体（mAbs）的杂交瘤细胞株，分别命名为F5、B8、E7、G9、G11、F1和C3，Ig亚类分别是IgG2ak、IgG2aK、IgG1K、IgMK、IgMh、IgMK和IgG2aK。用间接ELISA检测，E7和F1细胞培养上清液的效价为1．6×10^3，腹水效价均为1×10^11；C3、F5、B8、G9和G11细胞培养上清液的效价为1×10～2×10^2，腹水效价均为1×10^3。相加ELISA结果显示，F1、G9和G113株mAbs对应相同的抗原表位，而其它4株对应不同的抗原表位。用间接ELISA分析特异性，7株mAbs与某些其他血清型的大肠杆菌有交叉反应。Westernblotting表明，c3、E7和F13株mAbs在蛋白分子量28×10^3处有特异性条带，而其它4株mAbs则未显示蛋白带。
- 夏兴霞刘洁王永山诸玉梅欧阳伟何孔旺张雪寒
- 关键词：人兽共患病
- 大肠杆菌O157:H7鼠血清抗体胶体金免疫层析检测试纸条
- 本发明涉及一种大肠杆菌O157:H7鼠血清抗体胶体金免疫层析检测试纸条，属于抗体检测试剂盒技术领域。由颗粒为20nm的胶体金溶液标记纯化的羊抗鼠IgG制成胶体金垫、分别用大肠杆菌O157:H7抗原和纯化的鼠血清IgG包被...
- 王永山刘洁夏兴霞何孔旺张雪寒费荣梅
- 文献传递
- 动物源性人兽共患细菌病防控生物新制剂的研究 Ⅰ.分泌抗大肠杆菌0157:H7单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立
- 引言/目的:食源性病原微生物已成为当今不断增多的食品安全和突发性公共卫生事件的主要诱因。全世界每年至少有200万人死于以感染性腹泻为主的食源性疾病。在食源性病原微生物中,肠出血性大肠杆菌(EHEC)占有重要地位。O157...
- 夏兴霞刘洁王永山诸玉梅欧阳伟何孔旺张雪寒
- 文献传递
- 大肠杆菌O157:H7抗体胶体金免疫层析检测试纸条的研制被引量：10
- 2010年
- 为建立快速检测鼠感染大肠杆菌O157∶H7后的抗体,本研究采用颗粒为20nm的胶体金溶液标记纯化的羊抗鼠IgG,制备金标探针,喷涂于玻璃纤维膜上;将大肠杆菌O157∶H7抗原和抗大肠杆菌O157∶H7单克隆抗体F1分别包被于硝酸纤维素膜上作为检测线和质控线,组装成鼠血清O157∶H7抗体胶体金免疫层析检测试纸条。实验结果表明,该试纸条仅与O157∶H7阳性鼠血清发生特异性反应,用该试纸条与常规间接ELISA平行比较检测O157∶H7免疫鼠血清,抗体效价分别为1×106和1×105,两者的敏感度相当。该试纸条操作简便,10min可出结果,适用于调查与追溯鼠O157∶H7感染状况时的现场检测。
- 刘洁夏兴霞王永山张雪寒费荣梅何孔旺
- 关键词：胶体金
- 动物源性人兽共患细菌病防控生物新制剂的研究Ⅰ．分泌抗大肠杆菌O157∶H7单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立
- 将E.Coli O157∶H7(EHEC-O157∶H7)用甲醛灭活超声破碎，免疫BALB/c小鼠，制备免疫脾细胞;与SP/20骨髓瘤细胞融合后，获得七株分泌抗E.Coli O157∶H7单克隆抗体(mAbs)的杂交瘤细...
- 夏兴霞刘洁王永山诸玉梅欧阳伟何孔旺张雪寒
- 关键词：肠出血性大肠杆菌O157H7单克隆抗体人兽共患病
- 文献传递
- 传染性法氏囊病安徽近期毒株VP2基因在昆虫细胞中的表达被引量：3
- 2009年
- 为真核表达传染性法氏囊病病毒(IBDV)VP2基因,将2007年12月从安徽境内发生的传染性法氏囊病(IBD)免疫预防失败的病鸡法氏囊组织中克隆的IBDV VP2基因插入到pFastBac1供体质粒中,转化E.coliDH10Bac感受态细胞,经抗性筛选,获得重组杆状病毒表达质粒rBac-VP2,用脂质体法转染Sf9细胞。对rBac-VP2感染的Sf9细胞,用间接免疫荧光试验(IFA)检测,具有特异性荧光;用western blot分析,在50ku处出现1条特异蛋白条带;电镜观察重组VP2蛋白能够自组装成病毒样颗粒。本实验为研制针对近期流行IBDV的新型病毒样颗粒疫苗和新型检测试剂奠定了基础。
- 欧阳伟王永山张海彬潘群兴王晓丽刘洁周宇曹冰玉王忠灿
- 关键词：传染性法氏囊病病毒VP2基因杆状病毒病毒样颗粒
