刘飞
- 作品数：31 被引量：85H指数：6
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 用M1细胞检测IL-6生物学活性的方法探讨被引量：1
- 1998年
- 白细胞介素６（ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ，ＩＬ－６）是参与免疫调节的重要细胞因子［１］。ＩＬ－６的生物学活性常用其依赖的细胞系７ＴＤ１作为指示细胞进行检测［２］。但７ＴＤ１细胞系对ＩＬ－６的依赖性易受多种因素的影响，而使其失去对ＩＬ－６的依赖性导致检测的...
- 李琦朱勇刘山金刘飞杨琨金伯泉
- 关键词：白细胞介素6生物学活性
- 抗细菌硫氧化还原蛋白Thioredoxin单克隆抗体的制备、鉴定与初步应用被引量：4
- 1999年
- 硫氧化还原蛋白Ｔｈｉｏｒｅｄｏｘｉｎ(Ｔｒｘ)是一类存在于细菌、植物及动物等多种生物体内的耐热蛋白[1],含有保守的ＷＣＧＰＣ序列。还原态的Ｔｒｘ具有很强的蛋白二硫键氧化还原酶活性,作为核酸还原酶的供氢体在ＤＮＡ的合成与复制中起重要作用。大肠杆菌Ｔｒｘ蛋白...
- 刘飞刘崟金伯泉董帮权刘惠萍朱勇
- 关键词：THIOREDOXIN单克隆抗体
- 激光照射对急性脊髓损伤后脊髓再生的促进作用被引量：7
- 2009年
- 建立大鼠皮质脊髓背侧束全横断模型,利用弱激光照射脊髓受损部位的皮肤,观察激光照射对急性脊髓损伤后脊髓再生的促进作用。30只SD大鼠,随机分成对照组和照射组。照射组:急性皮质脊髓背侧束全横断后15min进行连续14d采用弱激光照射脊髓受损部位的皮肤。对照组:急性皮质脊髓背侧束全横断后未行弱激光经皮照射治疗。术后两组分别于第3,7,14d分别取材,用苏木精-伊红染色法(HE)染色和免疫荧光标记染色观察。实验发现,脊髓损伤后14d,照射组的空洞及瘢痕形成面积小于对照组,有统计学差异(p<0.05);对照神经胶质酸性组蛋白(GFAP)和硫酸软骨素(CS)表达强烈分布紧密,照射组GFAP和CS56表达达微弱且分布稀疏;对照组少量神经微丝蛋白(NF)在损伤区周围,神经生长相关蛋白(GAP43)形态肿大变形分布紊乱,照射组大量成纤维丝状的NF分布在损伤区周围,并与GAP43相伴行。结果表明,脊髓损伤急性期采用弱激光照射脊髓受损部位的皮肤,可减少脊髓损伤后空洞形成,并促进轴突再生。
- 王哲夏雷龚凯刘飞王健徐新智罗卓荆
- 关键词：医用光学弱激光照射脊髓损伤胶质瘢痕
- 酶联免疫化学发光法检测SEB方法的建立
- 目的：建立测定SEB的酶联免疫化学发光法(CLIA),使其敏感性达到国外同类方法的检测水平.意义：金黄色葡萄球菌肠毒素(SE)是一组可溶性单肽链蛋白,经典的SE分为SEA、SEB、SEC、SED、SEE五型.SE引起的食...
- 刘飞李永明董邦权宋朝君李琦李娜杨琨金伯泉
- 关键词：金黄色葡萄球菌肠毒素B
- 截短型BAP31/GST基因重组质粒的构建及融合蛋白的表达、纯化和鉴定
- 2011年
- 目的构建编码截短型肿瘤抗原BAP31(△BAP31)与GST融合基因的原核表达载体,在大肠杆菌中表达并对融合蛋白(△BAP31/GST)进行纯化和初步鉴定。方法 PCR扩增编码△BAP31的基因片段,上下游分别引入EcoR I及Xho I酶切位点,亚克隆至含有GST标签的原核表达载体pGEX4T-1中,构建重组表达载体pGEX4T1-△BAP31,将该载体转化大肠杆菌DH5α,IPTG诱导表达△BAP31/GST,用GST亲和层析分离纯化原核表达的△BAP31/GST,表达产物分别用SDS-PAGE和West-ern blot进行鉴定。结果重组质粒经限制性内切酶EcoR I和Xho I双酶切鉴定和IPTG诱导表达△BAP31/GST的SDS-PAGE分析表明,表达产物的相对分子质量为40 000,与理论值相符,并主要以可溶性蛋白形式存在;经过对融合蛋白表达条件的优化,在IPTG浓度为1 mmol/L,诱导6 h目的蛋白表达量最高;灰度扫描分析发现,融合蛋白表达量占菌体蛋白总量的70.6%,纯化产物的纯度最高可达94.5%,Western blot证实该△BAP31/GST可与抗GST单克隆抗体(mAb)发生特异性结合反应,分子量为△BAP31与GST分子量之和,提示为融合蛋白。结论成功构建了编码△BAP31基因原核表达载体pGEX4T1-△BAP31,利用大肠杆菌表达系统和GST亲和层析,获得了较高纯度的△BAP31/GST融合蛋白,为进一步研究肿瘤抗原BAP31的功能及开发以BAP31作为靶点的肿瘤疫苗提供了试验基础。
- 李海涛宋朝君孙元杰魏玉英李永明刘飞刘志佳张葵金伯泉杨琨
- 关键词：GST融合蛋白蛋白表达
- 一种新的gp130结合分子的序列分析和真核表达被引量：3
- 1998年
- 目的对以ＧＳＴ－ｇｐ１３０融合蛋白为探针，筛选人胎盘ｃＤＮＡ文库而得到的一个分子（ＧＡＭ，ｇｐ１３０ａｓｓｏｃｉａｔｅｄｍｏｌｅｃｕｌｅ）ｃＤＮＡ序列进行测定并做真核表达。方法进行噬菌体制备及克隆测序，并做同源性检索和构型、亲水性分析，ＣＯＳ细胞转染和３５Ｓ－蛋氨酸标记。结果所得ＧＡＭ分子与另一已克隆成功但功能还不清楚的称为ｈＡＥＳ－１的分子同源性达９７．７％。此外，ＧＡＭｃＤＮＡ还与果蝇ｅｎｈａｎｃｅｒｏｆｓｐｌｉｔ基因相关的分子有较高同源性。ＧＡＭ分子具有一个５８８个核苷酸的开放读框，编码１９６个氨基酸。将ＧＡＭ分子ｃＤＮＡ转染ＣＯＳ细胞后，细胞裂解液电泳可见一分子量约为２４×１０３的表达带，与预期的分子量相符合。结论ＧＡＭ分子与ｈＡＥＳ－１分子在开放读框内仅相差一个氨基酸（且不排除测序的个别错误），其分子量也与已报道的ｈＡＥＳ－１分子量相同，故认为两者很可能是同一分子。
- 金伯泉刘飞
- 关键词：GP130信息传导DNA
- PTA1酵母双杂交载体的构建被引量：3
- 1999年
- 李德敏金伯泉刘飞欧阳为明张建平李林
- 关键词：PTA1酵母双杂交
- 纤维蛋白胶包裹嗅神经鞘细胞促进脊髓轴突再生的实验研究被引量：12
- 2003年
- 目的 观察纤维蛋白胶 (FG)包裹嗅神经鞘细胞 (OECs)植于成年大鼠脊髓全横断断端间隙内对损伤轴突再生的促进作用。 方法 成年雄性SD大鼠 16只 ,行脊髓T11节段全横断术。FG OECs组于间隙内移植FG包裹的OECs ,FG对照组移植等量的FG ,OECs对照组移植等量DF12 OECs悬液 ,单纯全切对照组未做任何移植 ,每组动物 4只。术后 2周处死动物 ,脊髓损伤区冰冻水平切片 ,荧光显微镜下观察OECs的存活及迁移 ,并行抗神经丝 (NF)和生长相关蛋白 4 3(GAP 4 3)抗体免疫组织化学染色。 结果 OECs及单纯全切对照组脊髓两断端连接较差 ,而FG对照组及FG OECs组两断端连接良好。FG、OECs及单纯全切对照组损伤区可见少量NF及GAP 4 3免疫反应纤维 ;FG OECs组间隙内OECs大量存活 ,并迁移至两侧脊髓实质内 ,大量NF及GAP 4 3免疫反应纤维通过间隙。 结论 FG包裹的OECs可在成年大鼠脊髓全横断断端间隙内存活并迁移至脊髓实质内 。
- 孟晓梅王春婷游思维刘惠玲杨浩焦西英刘飞史明鞠躬
- 关键词：纤维蛋白胶嗅神经鞘细胞脊髓轴突再生脊髓全横断脊髓损伤
- TLE1与AES、gp130分子间相互作用对其细胞内定位的影响研究
- gp130是白细胞介素6(IL—6)等多种细胞因子受体中的共用信号传导链,在体内分布广泛,具有多种重要功能。新近研究发现,转录协同抑制分子AES(amino terminal enhancer of split)和TLE...
- 刘飞金伯泉欧阳为明朱勇谢鑫
- 关键词：GP130AES蛋白质相互作用
- 文献传递
- 细胞因子信号传导JAK-STAT途径的研究进展被引量：4
- 1997年
- ＪＡＫ－ＳＴＡＴ途径是新近发现的一条多种细胞因子共用的信号传导途径，其作用模式已基本搞清，但对其作用环节中的调控及与其它细胞因子信号传导途径的联系仍有待深入研究。
- 刘飞
- 关键词：信号传导JAKSTAT细胞因子激酶
