卢卓强
- 作品数：17 被引量：54H指数：5
- 供职机构：福建医科大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：福建省教育厅科技项目留学人员科技活动项目择优资助经费福建省教育厅资助项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 遗传相关的低高密度脂蛋白胆固醇血症与冠状动脉性心脏病的关系:荟萃分析
- 2016年
- 目的 以胆固醇酯转运蛋白（CETP）基因-629位点C/A变异为工具变量,通过孟德尔随机化荟萃分析探讨血浆高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）与冠状动脉性心脏病（冠心病）发病风险之间的潜在因果关系。方法检索PubMed和EMBASE数据库,收集2015年12月以前发表的关于CETP-629C/A多态性与冠心病及血脂水平相关性的所有前瞻性或回顾性研究,利用STATA软件对HDL-C与冠心病的相关性进行荟萃分析。结果 总共有12篇（包括15组研究群体：冠心病患者4894例,对照人群7462名）关于CETP-629C/A多态性与冠心病发病风险的巢式病例对照研究和9篇（包括19组研究群体,22 140名研究对象）关于CETP-629C/A多态性与血浆三酰甘油和（或）HDL-C水平相关性的文献纳入分析。总体分析表明,CETP-629C等位基因在等位基因模型、纯合子模型和显性模型下分别使患冠心病的风险增加3%（OR=1.03,95%CI 0.93~1.14,P=0.603）,12%（OR=1.12,95%CI0.95~1.32,P=0.186）和11%（OR=1.11,95%CI0.96~1.28,P=0.174）,但结果无统计学意义。亚组分析显示,在关于高加索人、心肌梗死患者、前瞻性或大规模的研究中,携带-629C等位基因增加罹患冠心病的风险（P〈0.05）。-629CC基因型人群[加权均数差（WMD）-3.48,P〈0.01]或携带-629C等位基因人群（WMD-3.01,P〈0.01）血浆中的HDL-C水平均显著降低。而不同基因型人群的血浆三酰甘油水平差别没有统计学意义;孟德尔随机化分析中,由遗传因素所致血浆中HDL-C水平下降1、5、10mg/dL（1mg/dL=0.026mmol/L）的因果关系优势比在高加索人中分别为1.11、1.67、2.79,心肌梗死患者中分别为1.07、1.43、2.03,前瞻性研究中分别为1.07、1.41、1.99,大规模研究中分别为1.07、1.38、1.90。结论 遗传相关的低HDL-C血症在高加索人群中作为冠心病的危险因素有临床意义。
- 卢卓强晋学庆龚晶婧蔡瀚林金秀
- 关键词：冠状动脉性心脏病三酰甘油高密度脂蛋白胆固醇胆固醇酯转运蛋白
- ACE2基因表达增加对人脐静脉内皮细胞增殖、凋亡的影响
- 2013年
- 目的探索在AngII干预下ACE2基因表达增加对人血管内皮细胞增殖、凋亡的影响。方法原代培养人脐静脉血管内皮细胞。用构建、包装好的慢病毒重组ACE2基因表达载体（Lentiviral—ACE2）以感染复数为10（MOI=10）感染人脐静脉内皮细胞（HUVEC）。感染72h后，以AnglI（终浓度为10。mol／L）干预细胞，倒置相差显微镜观察各组HUVEC的形态学变化，AlamarBlue试剂检测各组HUVEC增殖功能，TUNEL细胞凋亡检测试剂盒检测各组HUVEC的凋亡。结果AngⅡ组与AngII＋Lentiviral—GFP组细胞生长状态差，生长缓慢，形态不规则并且有不同程度脱壁悬浮的细胞；而正常细胞对照组与AngII＋Lentiviral—ACE2组细胞生长状态良好，圆形、卵圆形，饱满，形态正常呈“铺路石”样生长，紧密贴壁，悬浮细胞少。AngII组较正常细胞对照组、Ang1I＋Lentiviral—ACE2组AlamarBlue被还原率明显降低（P〈O．05）。Ang11组的凋亡指数为（0．1165±0．0181），与正常细胞对照组凋亡指数（0．0373±0．0113）和AngⅡ＋Lentiviral—ACE2组凋亡指数（0．0540±0．0061）相比差异有统计学意义（P〈0．05）。AngII组与AngⅡ＋Lentiviral—GFP相比、正常细胞对照组与AngII＋Lentiviral—ACE2组相比，AlamarBlue被还原率和凋亡指数差异无统计学意义。结论AngⅡ具有促进人脐静脉内皮细胞增殖能力下降和凋亡增加的作用。ACE2表达增~IIII抑制AngⅡ诱导的人脐静脉内皮细朐增殖活件降低和凋亡增加．对人脐静脉内皮细胞具有保护作用。
- 王前胜刘东亮董艳彩晋学庆卢卓强
- 关键词：血管紧张素转化酶2人脐静脉内皮细胞增殖凋亡
- 血管紧张素转换酶2基因转染抑制平滑肌细胞增殖被引量：7
- 2011年
- 目的通过血管紧张素转换酶2（ACE2）基因转染大鼠血管平滑肌细胞（VSMC），观察其对血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）促VSMC增殖的影响。方法将大鼠VSMC分为正常细胞组、AngⅡ组、空载体＋AngⅡ组及pm—ACE2＋AngⅡ组，通过CCK8细胞计数试剂盒和流式细胞仪检测各组细胞周期，观察ACE2基因转染对AngⅡ促VSMC增殖效应的影响。结果与正常细胞组相比，AngII组细胞计数明显增高，pm—ACE2＋AngⅡ组与AngII组相比显著降低（0．535±0．004比0．866±0．026，P〈0．05）；同时，AngⅡ组在G0／G1期细胞的百分率明显降低（58．80％±2．00％，P〈0．05），S期的则显著增高（35．90％±1．00％，P〈0．05），与AngⅡ组相比，pmACE2＋AngⅡ组在Go／G，期的百分率明显升高（63．90％±1．40％，P〈0．05），S期则显著降低（27．80％±0．46％，P〈0．05）。结论ACE2基因转染能抑制Ang1I的促VSMC异常增殖效应。
- 晋学庆卢卓强林旭
- 关键词：基因血管
- 血管内皮损伤程度决定动脉硬化斑块的稳定性 缺血再灌注动脉硬化模型的建立被引量：10
- 2013年
- 目的利用大鼠颈动脉设计一种缺血再灌注的动脉硬化模型，以观察动脉硬化的病理过程及其机制。方法SD大鼠30只，分为正常对照组（对照组）、假手术组和颈总动脉缺血再灌注损伤（IRI）组，每组10只。采用夹闭颈总动脉的方法造成缺血再灌注损伤。4周后苏木精伊红（HE）染色检测新生内膜面积／中膜面积（I／M）值，免疫组织化学法检测新生内膜中血小板内皮细胞黏附分子（CD31）的表达。结果（1）IRI组大鼠血管内膜增生明显，I／M值高于对照组和假手术组（1．328±0．301比0．011±0．004和0．017±0．008，P均〈0．01）。（2）IRI组大鼠血管新生内膜由小到大，从覆盖局部到整个管腔。小的新生内膜相对稳定，而大的新生内膜，病变覆盖整个管腔，呈环状的病变发生自发性断裂，表现不稳定，断裂的新生内膜导致血栓形成。（3）免疫组织化学结果显示，表面覆盖有完整内皮细胞的斑块表现稳定，没有内皮细胞层覆盖的大的斑块表现不稳定。结论大鼠颈动脉缺血再灌注可以形成稳定的动脉硬化模型。血管表面内皮细胞的不完整是动脉硬化斑块破裂的决定因素之一。
- 晋学庆吴旭玮卢卓强龚晶婧王华军许昌声
- 关键词：动脉硬化再灌注损伤
- 小鼠ACE2基因真核表达载体的构建及其对血管平滑肌细胞增殖的影响
- 目的本研究拟构建小鼠ACE2基因的真核表达载体,并观察ACE2基因转染大鼠血管平滑肌细胞/(VSMC/)后对AngⅡ促VSMC异常增殖效应的影响,初步探讨产生该影响的可能机制。
方法1.通过RT-PCR从小鼠...
- 卢卓强
- 关键词：ACE2血管平滑肌细胞
- 文献传递
- 慢病毒重组ACE2基因表达载体的构建及其感染人脐静脉内皮细胞的研究被引量：2
- 2010年
- 目的构建携带血管紧张素转换酶2（ACE2）基因的慢病毒表达载体，观察其感染人脐静脉内皮细胞后ACE2基因的转录及表达水平。方法采用PCR技术从含有ACE2基因的质粒克隆模板pc—DNA3．1-hygro（＋）一mACE2上钓取ACE2基因，并将ACE2基因重组到慢病毒载体表达质粒pGC—FU中，构建重组慢病毒载体表达质粒pGC—FU—ACE2，通过酶切、测序验证ACE2基因后，将pGC—FU—ACE2质粒和包装质粒pHelper1．0、pHelper2．0共同转染人胚胎肾上皮细胞系293T细胞，获得携带ACE2基因的重组慢病毒Lentiviral—ACE2；然后感染人脐静脉内皮细胞，通过RT—PCR、Western—blot检测ACE2基因的转录和蛋白表达水平。结果成功构建携带ACE2基因的慢病毒表达载体Lentiviral—ACE2，并获得大量高纯度的慢病毒浓缩液。目的基因ACE2能被重组慢病毒高效地导入人脐静脉血管内皮细胞，并能高水平表达。结论慢病毒表达载体Lentiviral—ACE2成功构建并能高效率感染人脐静脉内皮细胞，为研究ACE2对血管内皮细胞的影响和更深入地探索ACE2基因的功能奠定了基础。
- 王前胜晋学庆卢卓强
- 关键词：血管紧张素转化酶2慢病毒表达载体人脐静脉内皮细胞
- ACE2小干扰RNA对平滑肌细胞AT1受体蛋白表达及其下游信号通路的影响被引量：4
- 2020年
- 目的研究ACE2 siRNA干预SD大鼠平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)后,探讨ACE2对血管紧张素Ⅱ1型受体(AngⅡtype 1 receptor,ATlR)蛋白表达、ERK1/2、STAT3蛋白磷酸化水平的影响。方法(1)用脂质体法将含有ACE2基因的质粒DNA及si-ACE2转染到各对应干预组VSMCs;(2)Western blot检测各组细胞ACE2、AT1R蛋白表达水平以及p-ERK1/2、p-STAT3蛋白的磷酸化水平。结果(1)对比空白对照组、GFP组、脂质体组,si-ACE2组、AngⅡ组ACE2蛋白表达明显降低,而AT1R蛋白表达和p-ERK1/2、p-STAT3蛋白磷酸化水平明显增加(P<0.05);(2)分别对比AngⅡ组和AngⅡ+ACE2组,AngⅡ+si-ACE2组和AngⅡ+ACE2+si-ACE2相应的ACE2蛋白表达均降低,而AT1R蛋白表达、p-ERK1/2、p-STAT3蛋白磷酸化水平均增加(P<0.05)。结论ACE2 siRNA和AngⅡ均能抑制ACE2蛋白的表达,且两者对ACE2起协同抑制作用;ACE2蛋白表达的减少能上调AT1受体蛋白表达,同时提高其下游信号通路ERK1/2、STAT3蛋白磷酸化水平。
- 龚晶婧李荣通卢卓强许昌声王华军晋学庆
- 关键词：血管紧张素转换酶2信号转导和转录激活因子3小干扰RNA
- 血管紧张素转换酶2基因转染抑制大鼠平滑肌细胞血管紧张素Ⅱ1型受体表达及下游转录激活子3信号通路被引量：6
- 2012年
- 目的利用构建的血管紧张素转化酶（ACE）2慢病毒表达载体转染平滑肌细胞，探讨ACE2对血管紧张素Ⅱ1型受体（AT1R）表达的影响。方法培养平滑肌细胞，并进行分组及干预：（1）空白对照组：仅加入无血清培养基。（2）慢病毒重组绿色荧光蛋白表达空载体（Lentiviral—GFP，GFP）组：加入感染复数（MOI）为10的Lentiviral—GFP空载体。（3）血管紧张素（Ang）Ⅱ组：加入终浓度为10^-2mol／L的AngU。（4）AngU＋慢病毒重组ACE2表达载体（Lentiviral—ACE2，ACE2）组：同时加入浓度为10^-2mol／L的AngII和MOI为10的Lentiviral—ACE2。（5）AngⅡ＋厄贝沙坦组：同时加入终浓度为10^-7mob/L的AngⅡ和厄贝沙坦。（6）AngⅡ＋ACE2＋厄贝沙坦组：同时加入终浓度为10。mol／L的AngⅡ和厄贝沙坦以及MOI为10的Lentiviral—ACE2。（7）ACE2组：仅加入MOI为10的Lentiviral—ACE2。将上述干预细胞提取RNA后运用实时PCR检测细胞ATlRmRNA的表达，Westernblot技术分别检测细胞ATlR蛋白表达，以及下游信号通路信号转导子和转录激活子3（STAT3）蛋白磷酸化水平。运用CCK-8试剂盒检测上述干预组的细胞增殖水平。结果（1）AnglI＋ACE2组和AngⅡ＋ACE2＋厄贝沙坦组的ATIRmRNA表达均低于AngⅡ组（分别为0．39±0．02和0．24±0．01比I．80±0．08，P分别〈0．05和0．01）。（2）AngⅡ＋ACE2组和AngⅡ＋ACE2＋厄贝沙坦组的ATIR蛋白表达均低于AngⅡ组（分别为0．83±0．07和0．52±0．07比1．10±0．13，P分别〈0．05和0．01）。（3）AngⅡ＋ACE2组和AngⅡ＋ACE2＋厄贝沙坦组的STAT3蛋白磷酸化水平均低于AngⅡ组（分别为0．09±0．01和0．02±0．01比0．50±0．10，P分别〈0．05和0．01）。（4）AnglI＋ACE2组和An如＋ACE2＋厄贝沙坦组的细胞增殖水平均低于Angll组（分别为0．84±0．08和0．77±0．10比1．16±0．11，P分别〈0．05和0．01）。结论ACE2通过抑制ATIR和下�
- 龚晶婧卢卓强曹金龙许昌声王华军晋学庆
- 关键词：肽基二肽酶ASTAT3转录因子
- 小鼠血管紧张素转化酶2基因表达型载体的构建及体外表达被引量：3
- 2010年
- 背景:通过转基因疗法使血管紧张素转化酶2(angiotensin-converting enzyme,ACE2)过度表达来治疗心血管病是当前ACE2研究的趋势,而构建含ACE2基因的载体则能为该研究方法提供工具。目的:构建含小鼠血管紧张素转化酶2基因的真核表达载体,并验证其蛋白的表达。方法:采用RT-PCR的方法从C57小鼠肾脏扩增出ACE2基因全长cDNA序列,并通过酶切连接和转化等分子生物学方法将其定向克隆至载体pcDNA3.1/Hygro(+)上,构建小鼠ACE2基因的真核表达载体pm-ACE2,并通过酶切及测序鉴定。通过脂质体转染法将所构建的pm-ACE2转染COS7细胞,并利用Western blot检测COS7细胞中ACE2蛋白的表达。结果与结论:通过测序并与GeneBank上的小鼠血管紧张素转化酶2序列(NM_027286.3)比对,证实实验成功克隆小鼠ACE2基因全长cDNA至载体pcDNA3.1/Hygro(+)上,测序结果提示存在3处同义突变;所构建的pm-ACE2在真核细胞中具有ACE2蛋白的表达。结果提示实验成功构建了小鼠ACE2基因真核表达载体,此载体具有表达ACE2蛋白的功能。
- 卢卓强晋学庆
- 关键词：COS7细胞真核细胞基因表达
- 血管紧张素转换酶2基因转染抑制大鼠颈总动脉缺血再灌注损伤后内膜新生被引量：3
- 2013年
- 目的 探讨慢病毒重组血管紧张素转换酶（LV-ACE）2基因过表达对于大鼠颈总动脉缺血再灌注损伤（IRI）后内膜新生的影响和相关机制。 方法 将SD大鼠分为正常对照组、假手术组、IRI后1、2、4周亚组，每组10只，采用夹闭颈总动脉方法制造动脉硬化模型，HE染色观察各组新生内膜面积/中膜面积（I/M）值；另选SD大鼠50只，分为5组：对照组、IRI组、IRI＋慢病毒重组绿色荧光蛋白（LV-GFP）组（GFP组）、IRI＋LV-ACE2组（ACE2组）和IRI＋紫杉醇组（紫杉醇组），每组10只，夹闭法后利用LV-ACE2干预，并用LV-GFP、紫杉醇等作为对照。HE染色观察各组I/M值，免疫组织化学方法观察各组新生内膜中ACE2、平滑肌细胞α-肌动蛋白（α-SM-actin）、血小板内皮细胞黏附分子（CD31）、血管紧张素1型受体（AT1R）、细胞外信号调节激酶磷酸化（P-ERK1/2）表达变化。 结果 （1）IRI后，HE染色观察损伤组的1、2、4周亚组I/M值（分别为0.364±0.032、0.789±0.120和1.517±0.151）均高于正常组（0.011±0.004，P均〈0.01）。（2）LV-ACE2等干预后，HE染色观察ACE2组I/M值低于IRI组（0.71±0.17比1.53±0.16，P〈0.01）；免疫组织化学观察ACE2组ACE2表达积分吸光度（IA）值与IRI组比较，差异无统计学意义（1294±283比1080±252，P=0.63），ACE2组CD31表达血管密度低于IRI组［（12.40±4.21）个/mm2比（96.20±17.79）个/mm2，P〈0.01］，ACE2组α-SM-actin、AT1R、P-ERK1/2表达IA值均低于IRI组（分别为5 843±839比12 648±1 760，1 219±175比4 861±545，1 040±215 比2 938±286, P均〈0.01） 结论 大鼠颈总动脉IRI后4周能够形成稳定的内膜新生，ACE2能明显抑制IRI后内膜新生、新生内膜中平滑肌细胞增殖及新生血管生成，其机制可能与ACE2抑制AT1R、P-ERK1/2的表达有关。
- 吴旭玮卢卓强龚晶婧王华军许昌声晋学庆
- 关键词：肽基二肽酶A血管内膜再灌注损伤
