古峻
- 作品数：2 被引量：6H指数：1
- 供职机构：中国医科大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 血管紧张素Ⅱ1型受体短发夹环RNA抑制其在哺乳动物细胞中的表达被引量：1
- 2004年
- 目的探讨血管紧张素Ⅱ1型受体(AT1R)的短发夹环RNA质粒(pAT1RshRNA)能否抑制AT1R在哺乳动物细胞中的表达。方法构建质粒并转染入鼠血管平滑肌细胞(VSMC)中,24h后应用RTPCR及Westernblot检测VSMC的AT1R的mRNA和蛋白表达变化。结果构建的质粒经测序鉴定验证与预期相符,转染细胞后RTPCR吸光度值比值结果两质粒转染组分别为1.371±0.148和1.453±0.123,与对照组2.088±0.258比较差异有非常显著性(P<0.01);Westernblot结果两质粒转染组分别为1.121±0.037和1.202±0.068,与对照组3.168±0.210比较差异有非常显著性(P<0.01)。提示两质粒均能明显降低AT1R的mRNA和蛋白表达。结论构建的pAT1RshRNA具有RNA干扰作用,能在哺乳动物细胞中抑制该特异基因的表达。
- 孙成林段志泉冯宗承辛世杰古峻张京红张强
- 关键词：RNA哺乳动物细胞平滑肌细胞
- 血管紧张素Ⅱ1型受体的短发夹环RNA抑制大鼠血管平滑肌细胞增殖的研究被引量：5
- 2004年
- 目的 探讨血管紧张素Ⅱ 1型受体 (AT1R)的短发夹环RNA(shRNA)质粒 (pAT1R shRNA)对大鼠血管平滑肌细胞增殖变化的影响并探讨其发生机制。方法 构建pAT1R shRNA质粒转染入鼠血管平滑肌细胞中 ,应用逆转录聚合酶链反应及Westernblot检测血管平滑肌细胞 (VSMC)AT1R的mRNA和蛋白表达的变化 ;倒置相差显微镜观察VSMC形态学的变化 ;锥虫蓝染色法和MTT法检测VSMC增殖的变化等。结果 构建的质粒经测序鉴定验证与预期相符。转染细胞后逆转录聚合酶链反应的吸光度值比值结果pAT1R shRNA1和pAT1R shRNA2 组分别为 1 37± 0 15和 1 4 5± 0 12 ,与对照组 2 0 9± 0 2 6相比差异有显著性意义 (P <0 0 1) ;Westernblot吸光度值比值结果两质粒转染组分别为 1 12± 0 0 4和 1 2 0± 0 0 7,与对照组 3 17± 0 2 1相比差异有显著性意义 (P <0 0 1) ,提示两质粒均能明显降低AT1R的mRNA和蛋白表达。转染质粒同时加血管紧张素Ⅱ组的细胞计数结果两质粒转染组分别为 5 4 8± 0 4 4和 5 5 5± 0 4 5 ,与对照组 8 13± 0 4 1相比均减少、差异有显著性意义 (P <0 0 1) ,MTT法结果两质粒转染组吸光度值分别为 0 36 5± 0 0 2 4和 0 30 7± 0 0 2 5 ,与对照组 0 4 85±0 0 11相比均降低。
- 孙成林段志泉辛世杰冯宗承张京红古峻张强
- 关键词：VSMC短发夹环RNA转染细胞血管平滑肌细胞增殖锥虫
