吴建华
- 作品数：8 被引量：20H指数：3
- 供职机构：中国科学院上海生命科学研究院生物化学研究所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 心肌梗塞的血液心肌肌球蛋白轻链Ⅰ诊断试剂
- 一种急性心肌梗塞的血液心肌肌球蛋白轻链I诊断试剂，主要包括人心肌肌球蛋白轻链I基因在大肠杆菌中的高表达产物作为阳性对照及该表达产物作为抗原制备的单抗和多抗。诊断方法为双抗体夹心法，即以固相化的单抗捕获检测血清中的抗原——...
- 龚祖埙彭宝珍周国瑛黄人健曹慧婷沈学仁沈菊英吴建华
- 文献传递
- 温州蜜柑萎缩病毒的提纯法研究被引量：2
- 1991年
- 本文提出的温州蜜柑萎缩病毒(SDV)提纯法,仅用100～200克病洋酸浆叶,且无需通过蔗糖密度梯度离心,在电镜下亦能看到中量直径约25nm 的球状病毒颗粒,粗提纯制剂OD_(860)/OD_(280)平均值为1.28,OD_(260)/OD_(240)平均值为1.15,初步显示出SDV 特征性紫外吸收曲线,提纯病毒产量约为4.5～11mg/kg病叶。比较证明,0.01M、PH7.0和0.1M、PH6.6的柠檬酸缓冲液以及0.5M、PH7.0的磷酸缓冲液是适宜的抽提缓冲液,洋酸浆是最好的繁殖寄主。
- 周常勇赵学源蒋元晖龚祖埙吴建华陈作义
- 关键词：温州蜜柑柑桔
- 大麦黄花叶病毒(BaYMV)的提纯和生化性质的研究被引量：3
- 1993年
- 大麦黄花叶病是由禾谷多粘菌(polymyxa graminis)传布的一类麦类病毒病。是上海市效区及长江中下游及沿海大麦产区的重要病害。大麦黄花叶病毒(BaYMV)在国内外虽已有不少研究,但对国内分离株的生化性质尚未有详细报道。本文报道以上海郊区的BaYMV为研究材料,成功地建立了一套分离提纯的方法,并在此基础上,研究了该病毒的结构蛋白和核酸性质,并和国外的一些研究结果进行了比较,从而为今后应用生物技术防治大麦黄花叶病毒打下了基础。
- 赵小立吴建华黄纯农翁醒华龚祖埙
- 关键词：大麦黄花叶病毒外壳蛋白提纯
- 烟草花叶病毒装配起始位点反义RNA表达型中间载体的构建
- 1992年
- 利用基因工程方法培育抗病毒植物新品种的途径之一,是在植株中建立一个产生病毒基因组功能片段的反义RNA的系统。本工作设计并合成了一段烟草花叶病毒(TMV)装配起始位点反义RNA的基因,再以pBR 325为基本质粒,构建了包含带有花椰菜花叶病毒(CaMV)35S启动子和PolyA信号的反义RNA表达单元,以及为筛选转基因植株所必须的NPT-Ⅱ表达单元的中间载体,为以后经土壤农杆菌而获得转基因烟草植株打下了基础。
- 彭海沈学仁吴建华龚祖埙
- 关键词：烟草花叶病毒反义RNA
- 心肌梗塞的血液心肌肌球蛋白轻链Ⅰ诊断试剂
- 一种急性心肌梗塞的血液心肌肌球蛋白轻链Ⅰ诊断试剂,主要包括人心肌肌球蛋白轻链Ⅰ基因在大肠杆菌中的高表达产物作为阳性对照及该表达产物作为抗原制备的单抗和多抗。诊断方法为双抗体夹心法,即以固相化的单抗捕获检测血清中的抗原—心...
- 龚祖埙彭宝珍周国瑛黄人健曹慧婷沈学仁沈菊英吴建华
- 文献传递
- 水稻齿叶矮缩病毒Segment 9 dsRNA的序列分析及其在大肠杆菌DE3中的表达被引量：7
- 1997年
- 通过有机试剂抽提，ＣＦ－１１纤维素柱层析，从感染水稻齿叶矮缩病毒菲律宾分离株（ＲｉｃｅＲａｇｇｅｄＳｔｕｎｔＶｉｒｕｓ，Ｐｈｉｌｉｐｐｉｎｅｉｓｏｌａｔｅ，简称ＲＲＳＶ－Ｐ）的水稻植株中获取该病毒的全基因组，即获得从Ｓｅｇｍｅｎｔ１到Ｓｅｇｍｅｎｔ１０（Ｓ１－Ｓ１０）的１０条双链ＲＮＡ（ｄｓＲＮＡ），然后设计合适的引物，用ＲＴ－ＰＣＲ方法得到Ｓ９的ｃＤＮＡ并将其克隆到ｐＵＣ１１９质粒上扩增，以双链测序法测定该ｃＤＮＡ的全序列。同时又将此ｃＤＮＡ克隆到大肠杆菌表达质粒ｐＧＥＸ－３Ｘ上，在大肠杆菌菌株ＤＥ３中用ＩＰＴＧ诱导表达，经超声波破菌、离心、Ｇｌｕｔａｔｈｉｏｎｅ－ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ亲和层析，得到纯化的分子量为６４ｋＤ的融合蛋白。
- 卢雄斌周国瑛吴建华龚祖埙
- 关键词：植物病毒水稻
- 与TMV-RNA装配起始位点互补的cDNA片段对TMV体外装配的抑制
- 1989年
- 合成了与TMV-RNA病毒装配起始位点互补的、长度为二十个核苷酸的DNA片段。该片段用^(32)P标记后,代替反义RNA(antisense RNA)与TMV-RNA进行硝基纤维素膜点杂交和溶液杂交。结果表明,该cDNA片段在两种条件下均能与TMV-RNA进行杂交。将溶液杂交的RNA-cDNA复合体经酒精沉淀,再与TMV衣壳蛋白的20S聚合体制剂进行体外装配,用测定310nm吸收光谱变化和电子显微镜观察的方法鉴定装配结果。实验证明,该cDNA片段与TMV-RNA杂交后抑制了装配起始位点的活力,从而使TMV病毒颗粒的装配不能完成。这一结果提示,TMV基因装配起始位点顺宁的cDNA和反义RNA能够在体外抑制TMV病毒颗粒的装配。
- 彭海沈学仁吴建华龚祖埙
- 关键词：烟草花叶病毒CDNA片段
