吴春涛
- 作品数：21 被引量：64H指数：4
- 供职机构：东营职业学院更多>>
- 发文基金：现代农业产业技术体山东省现代农业产业技术体系创新团队建设专项资金系建设专项资金天津市应用基础与前沿技术研究计划山东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 一种板蓝根和大青叶药渣的双向固体发酵方法
- 本发明公开了一种板蓝根和大青叶药渣的双向固体发酵方法，具体步骤包括：将板蓝根和大青叶药渣粉碎,加蒸馏水混匀浸泡,调节含水量50%～70%,装入培养瓶中压实，放入高压灭菌锅中灭菌处理；将灵芝菌种分别接入培养瓶中,每瓶接种1...
- 吴春涛林海涛
- 文献传递
- 融合蛋白C3d提高新城疫灭活苗的免疫原性被引量：1
- 2008年
- 补体C3d是补体系统(complement system,CS)中补体C3的最终裂解产物。本试验利用RT-PCR技术从AA肉鸡肝脏总RNA中扩增C3d cDNA,测序证实为C3d基因。然后将其连接至表达载体pET-32a(+),转化E.coliBL21(DE3),1%IPTG诱导表达。SDS-PAGE、Western-blotting证实目的蛋白为C3d。亲和层析分离C3d融合蛋白,与纯化新城疫病毒(Lasota株)经戊二醛连接后免疫SPF鸡。血凝抑制试验(HI)检测新城疫抗体水平,MTT法检测胸腺T淋巴细胞转化率。结果表明C3d融合蛋白能够提高特异性抗体水平以及细胞免疫水平,本研究为进一步研究、利用鸡补体C3d奠定了基础。
- 李艳梅褚新星吴春涛聂玉霞肖连明
- 关键词：C3DMTT血凝抑制试验
- 滨海盐碱地银杏有机肥深施技术研究被引量：3
- 2017年
- [目的]比较不同有机肥及施肥深度对滨海盐碱地上银杏生长的影响。[方法]通过田间定位试验,比较不同施肥处理的土壤养分含量、电导率及根系生长情况,探明不同施肥处理对银杏生长状况和果实产量的影响。[结果]深施鸡粪有机肥处理的银杏≤2 mm根系的长度和体积分别为CK的2.7倍和1.8倍;冠幅、茎粗、单株产叶量、单株种核产量分别比CK高34.1%、25.9%、23.1%和37.8%。[结论]该研究可为同类地区银杏发展提供指导。
- 吴春涛
- 关键词：银杏盐碱地
- 牛疱疹病毒I型gB基因原核表达载体的构建和高效表达
- 2007年
- 用PCR法扩增了牛疱疹病毒Ⅰ型B artha N u/67株gB基因,将其插入原核表达载体pBAD/TOPO中构建重组质粒pBAD-gB。将pBAD-gB质粒转化大肠杆菌TOP 10后进行了诱导表达,对表达产物进行了纯化和抗原性检测,并通过改变诱导剂L-A rab inose的浓度和诱导时间对诱导表达条件进行了优化。结果表明,重组质粒pBAD-gB构建成功,gB蛋白获得了高效表达,并以包涵体形式存在,纯化后gB蛋白的纯度达90%以上,gB蛋白抗原性良好,最佳诱导表达条件:L-A rab inose终浓度为0.2 g/L,诱导时间为5 h。
- 吴春涛王建华侯相山霍雷侯艳梅牛钟相
- 关键词：GB基因原核表达
- 外源H_2S通过减轻低温光抑制增强黄瓜幼苗耐冷性被引量：19
- 2018年
- 以‘津优3号’黄瓜(Cucumis sativus)为试材,叶面喷施硫化氢(H_2S)供体硫氢化钠(NaHS)、H_2S合成抑制剂氨氧基乙酸(AOA)、清除剂次牛磺酸(HT)或去离子水(对照),研究H_2S对低温下黄瓜幼苗光合作用和抗氧化系统的影响。结果表明:低温胁迫初期,黄瓜幼苗叶片的内源H_2S与L-/D-半胱氨酸脱巯基酶(L/DCD)活性快速升高,4或6 h后降低。随着低温胁迫时间的延长,黄瓜幼苗的丙二醛(MDA)含量、电解质渗漏率(EL)和冷害指数逐渐增加,NaHS处理的增加幅度明显小于对照,而AOA和HT处理的与对照差异不显著。低温下黄瓜幼苗的净光合速率(P_n)、气孔导度(G_s)、蒸腾速率(T_r)、光下光系统Ⅱ(PSⅡ)实际光化学效率(Φ_(PSⅡ))和暗下PSⅡ最大光化学效率(F_v/F_m),以及核酮糖-1,5-二磷酸羧化酶(RuBPCase)和果糖-1,6-二磷酸酯酶(FBPase)活性逐渐降低,胞间CO_2浓度(C_i)和初始荧光(F_o)趋于升高。与对照相比,NaHS处理的P_n、G_s、T_r、RuBPCase和FBPase活性,以及Φ_(PSⅡ)和F_v/F_m均较高,C_i和F_o较低,而AOA和HT处理的气体交换参数、光合酶活性及荧光参数多与对照差异不显著。随着低温胁迫时间的延长,黄瓜幼苗的过氧化物酶(POD)活性逐渐增加,超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、抗坏血酸过氧化物酶(APX)和谷胱甘肽还原酶(GR)活性,以及还原型谷胱甘肽(GSH)和抗坏血酸(AsA)含量先升高,后降低。NaHS处理的SOD、POD、CAT、APX和GR活性及GSH和AsA含量明显高于对照,AOA和HT处理的低于对照或与对照差异不显著。由此可见,H_2S受低温胁迫诱导,外源H_2S可通过减轻低温光抑制增强黄瓜幼苗耐冷性。
- 周超凡吴春涛李丹丹张晓伟毕焕改艾希珍
- 关键词：低温胁迫光抑制黄瓜
- 一种利用奶牛垫料制备蔬菜育苗基质及生物有机肥的方法
- 本发明公开了一种利用奶牛垫料制备蔬菜育苗基质及生物有机肥的方法。所述蔬菜育苗基质由以下原料及其质量份制成：真姬菇菌渣粉0‑20份，腐熟垫料40‑80份，膨胀蛭石10‑20份，EM菌菌粉0.1‑1份；所述腐熟垫料为含有真姬...
- 陈壮壮贾毅吴春涛李躬军谭晓青王媛媛
- 文献传递
- 绵羊肺炎支原体Y-98株外膜蛋白成分分析及其免疫原性研究被引量：11
- 2007年
- 采用TritonX-100裂解和0．6％KI提取的方法制备绵羊肺炎支原体Y-98株外膜蛋白，经12％SDS-PAGE分析，表明其分子量范围在14．4—125．9KD之间；分别制备抗Y-98株全细胞抗原和外膜蛋白高免血清，经Western-blotting分析，表明外膜蛋白为绵羊肺炎支原体的主要保护性抗原，而在外膜蛋白，67．6、39．3和28．8KD多肽为其主要保护性抗原。利用间接ELISA方法和MTT法对外膜蛋白引起的体液免疫和细胞免疫功能进行了测定，结果表明膜蛋白能够诱导机体产生高效价的抗体，免疫后7、14和28d效价分别达到了1：2^4.25、1：2^7.75和1：2^8.75;膜蛋白具有非特异性和特异性致有丝分裂作用，在免疫前0d及免疫后28d对T淋巴细胞刺激的转化率分别为8．46％和18．3％。
- 王建昌吴春涛牛钟相
- 关键词：外膜蛋白免疫印记间接ELISAMTT法
- 牛疱疹病毒Ⅰ型gB、gE基因的克隆及其杆状病毒表达载体的构建被引量：1
- 2012年
- 本试验用PCR方法扩增了牛疱疹病毒Ⅰ型(bovine herpesvirus-1,BHV-1)Bartha Nu/67株gB、gE基因片段,将其克隆到pGEM-T-easy载体。经转化、筛选、鉴定后将重组质粒经BamHⅠ和EcoRⅠ双酶切后,与经相同方法处理的杆状病毒转移载体pFastBacHTb连接,得到了重组质粒pFBHgB、pFBHgE。经酶切和测序鉴定后,将其转化入含穿梭载体Bacmid的感受态细胞DH10Bac,经抗性、蓝白斑筛选和PCR鉴定,得到了含gB、gE基因的重组穿梭载体。
- 吴春涛李艳梅
- 关键词：杆状病毒表达系统
- 奶牛肺炎型出血性败血症的诊治
- 2006年
- 王建昌高长青吴春涛牛钟相
- 关键词：出血性败血症肺炎型奶牛诊治败血型牛出败
- 牛疱疹病毒Ⅰ型gB基因的原核表达及产物的抗原性分析被引量：3
- 2006年
- 采用PCR方法,以牛疱疹病毒Ⅰ型基因组DNA为模板扩增gB基因,克隆至pGEM-T载体。将以克隆质粒pGEM-T-gB为模板扩增的gBⅠ、gBⅡ和gBⅢ基因片段分别连接至原核表达载体pET32a。获得的重组质粒分别转化感受态细胞BL21(DE3),在IPTG诱导下表达。经SDS-PAGE鉴定,gBⅠ、gBⅡ和gBⅢ基因片段在大肠埃希氏菌BL21(DE3)中以融合蛋白形式获得了表达。以磁化组氨酸蛋白纯化系统对融合蛋白纯化后,Western-blotting和ELISA分析结果表明,这些融合蛋白均与BHV-1标准阳性血清反应,可作为抗原用于牛传染性鼻气管炎ELISA检测方法的建立。
- 吴春涛王建华侯艳梅赵祥平霍蕾董志珍
- 关键词：GB基因原核表达纯化抗原性分析
