孙凤萍
- 作品数：68 被引量：144H指数：5
- 供职机构：上海市农业科学院更多>>
- 发文基金：上海市农科院青年科技发展基金上海市“科技创新行动计划”上海市科委科技攻关项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 羧肽酶A抑制剂Latexin基因的原核表达与纯化
- 2019年
- 根据GenBank上公布的Latexin基因核酸序列设计并合成引物,用RT-PCR方法扩增出Latexin基因,并将其克隆到T载体,转化构建到原核表达载体PET-30a上,得到重组质粒PET-30a-Latexin。将重组质粒转化大肠杆菌transetta(DE3)感受态细胞,并进行IPTG诱导表达、SDS-PAGE电泳和Western-Blot分析。结果表明:所得重组蛋白大小约32 ku,以可溶形式存在,且该蛋白能与His标签单克隆抗体发生特异性反应。
- 刘成倩李红高骏姚惠娟易建中孙凤萍
- 关键词：原核表达
- NMHC-ⅡA在PRRSV感染Marc-145细胞过程中的作用
- 2018年
- 借用PRRSV结构蛋白GP5的抗独特型抗体Mab2-5G2,提取并纯化非肌肉肌球蛋白重链IIA(NMHC-ⅡA);通过激光共聚焦技术定位NMHC-ⅡA在PRRSV感染Marc-145细胞过程中的分布;并采用免疫共沉淀技术研究其与PRRSV受体CD163的相互作用。结果表明:NMHC-ⅡA在Marc-145细胞内的表达量随着细胞被病毒感染时间的延长而增加,当PRRSV完全进入细胞后,NMHC-ⅡA的表达量有所降低;NMHC-ⅡA与PRRS病毒受体CD163存在相互作用,作用位点在M1(20—259 aa)和M3(714—1 040 aa)上。试验证明,NMHC-ⅡA在PRRSV感染过程中可能起协同作用。
- 李红刘成倩刘成倩孙凤萍高骏
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征
- 鸡传染性喉气管炎的发生与预防
- 1997年
- 许峰刘洪云顾庆国孙凤萍
- 关键词：鸡病传染性喉气管炎
- 自降解猪繁殖与呼吸综合征疫苗研制
- 易建中刘成倩李红谢春芳孙凤萍肖长峰高骏
- 该项目属于生物与医药技术领域。 PRRSV是一种有囊膜的单股正链RNA披膜病毒，对多种巨噬细胞具有亲噬性，包括猪肺泡巨噬细胞(PAM)、外周血单核细胞、肺血管内巨噬细胞(PIM)等。激发高效的细胞免疫对预防PRRSV尤为...
- 关键词：
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征基因表达病毒疫苗
- 鸭疫里氏杆菌分离及免疫研究被引量：5
- 2003年
- 近二年 ,上海市及苏、浙一带 ,鸭的饲养量急剧增加 ,传染病的发病率明显增多。通过流行病学 ,临床症状 ,病理解剖 ,涂片、染色镜检 ,并进行病原分离和鉴定 ,确诊为鸭疫里氏杆菌病。通过药敏实验 ,研究了鸭疫里氏杆菌对抗菌素敏感性 ,本项目采用平板凝集试验和琼脂扩散试验的结果表明 ,2 0株纯培养菌株为同一血清型的里氏杆菌 (1型 ) ,从分离菌回本动物试验看 ,鸭疫里氏杆菌对雏鸭致病力较强 ,皮下注射和刺种鸭掌都感染发病并引起死亡。研制的佐剂疫苗具有粘度低、宜于注射、乳化完全。
- 胡建华孙凤萍王英刘洪云吴祖立
- 关键词：鸭疫里氏杆菌免疫雏鸭鸭传染性浆膜炎疫苗预防病理变化
- 用单抗夹心ELISA快速检测鸡新城疫病毒被引量：5
- 2004年
- 采用传统的病毒分离的方法将免疫鸡群泄殖腔棉拭样品盲传一代 ,再用新城疫单抗夹心ELISA对F1 尿囊液进行新城疫病毒 (NDV)检测。结果表明本方法具有良好的特异性 ,NDV阳性样品检出率很高 ,且鸡禽流感病毒 (AIV)对此无干扰作用 ;分别检测阳性样品 4 5 3份、阴性样品 2 95 9份 ,与动物世界卫生组织 (OIE)推荐的病毒分离及鉴定、毒力试验的经典检测方法相比较 ,符合率为 99.3%、99.7% ;测定的变异系数为 8% ,稳定性较好 ,同时本法比经典的检测方法缩短检测时间 7d。结果表明用单抗夹心ELISA法检测鸡泄殖腔棉拭样品F1 尿囊液新城疫病毒实用、准确、特异、稳定、快速。
- 蒋凤英胡建华王英顾彩菊李春华孙凤萍高骏周震祥黄启忠倪建平
- 关键词：新城疫病毒免疫鸡群泄殖腔
- 小鼠肝炎病毒以不同途径感染4个品系小鼠的比较被引量：8
- 2005年
- 用小鼠肝炎病毒A59株以滴鼻、灌胃、腹腔注射3种途径人工感染近交系小鼠(BALB/c小鼠、C57BL小鼠)、免疫缺陷小鼠(NIH-III小鼠、BALB/c-nu/nu小鼠),接种病毒后3、5、7、14、21、28d分别取各鼠的肝脏,提取肝脏总RNA,用RT-PCR方法检测小鼠肝炎病毒的感染情况。结果显示:腹腔注射病毒的小鼠在肝脏中能最早检测出病毒,其次是灌胃,滴鼻则最晚;另外,近交系小鼠及免疫缺陷小鼠感染后3d在肝脏中检测出病毒,而转基因小鼠则在感染后7d在肝脏中检测出病毒。
- 王英邵伟娟高俊谢建云孙凤萍蒋凤英李春华胡建华高诚
- 关键词：小鼠肝炎病毒近交系小鼠品系免疫缺陷PCR方法灌胃
- 家禽新城疫病毒检测方法比较研究
- 蒋凤英王英高骏孙凤萍胡建华李春华金佩芳姚东侠
- 该项目组在检测家禽新城疫病毒（NDV）泄殖腔棉拭样品中，将传统的病毒分离及鉴定的方法与快速单抗夹心ELISA方法相结合，建立了二步法检测方法。该方法与传统的检测方法相比，可明显降低检测成本，缩短检测时间，可及时得到检测结...
- 关键词：
- 关键词：家禽新城疫病毒
- 鸭疫里氏杆菌流行病学调查被引量：2
- 2002年
- 胡建华孙凤萍金佩芳刘洪云吴祖立
- 关键词：症状病理变化鸭疫里氏杆菌病流行病学
- 鸭瘟病毒间接ELISA方法的建立
- 2018年
- 通过SPF鸡胚进行鸭瘟病毒培养和增殖,采用反复冻融后离心-0.22μm滤膜过滤-差速离心-蔗糖密度梯度离心法(sucrose-density-gradient-centrifugation,SDGC),纯化后病毒粒子作为ELISA包被抗原,从而建立了鸭瘟病毒间接酶联免疫吸附试验(ELISA)。经对不同血清样品的检测,表明此方法具有操作简便、敏感性高、特异性好的优点,特别适用于大批鸭群的抗体检测和流行病学调查,为合理免疫和疫病预防提供有效的技术手段。
- 孙凤萍高骏李红刘成倩易建中姚慧娟
- 关键词：鸭瘟病毒间接ELISA
