孙英姿 作品数:13 被引量:43 H指数:3 供职机构: 济南军区青岛第二疗养院 更多>> 发文基金: 青岛市公共领域科技支撑计划项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
人肠道乳酸杆菌的荧光定量PCR定量检测方法的研究 被引量:1 2010年 目的应用实时荧光定量PCR技术对健康人粪便内乳酸杆菌进行定量分析,建立乳酸杆菌的实时荧光定量PCR检测方法。方法依据乳酸杆菌16S rDNA序列设计属特异性引物,应用荧光定量PCR技术检测乳酸杆菌的16SrDNA,对粪便中的乳酸杆菌进行定量检测和分析,并和用传统方法所获得的结果进行比较。结果结果显示荧光定量PCR检测乳酸杆菌和传统方法检测乳酸杆菌之间无统计学差异(P>0.05)。结论荧光定量PCR技术比传统方法特异性高、敏感性强,临床上可用此方法对患者肠道乳酸杆菌进行定量分析。 张立营 侯方高 冯玉奎 孙宇 孙英姿 高波关键词:聚合酶链反应 阿尔茨海默病早期检查的生物学标志物的研究进展 被引量:5 2011年 阿尔茨海默病(AD)又称老年性痴呆症,是一种多发于老年人,以进行性认知障碍和记忆能力损害为主的中枢神经系统退行性疾病。随着我国人口老年化的加快,AD发病率呈逐年升高的趋势。由于早期临床干预可以改善其预后,故早期诊断就显得尤为重要,本文就该病早期诊断的生物学标志物检测进展予以综述。 单守勤 张立营 赵权 孙英姿 董洪强关键词:阿尔茨海默病 相思子毒素单克隆抗体的制备纯化及鉴定 2010年 目的制备相思子毒素单克隆抗体并鉴定其特性。方法以甲醛处理的相思子毒素毒蛋白为抗原免疫BALB/c小鼠;取免疫小鼠的脾细胞与Sp2/0骨髓瘤细胞融合,经间接ELISA法筛选、融合细胞有限稀释法克隆、克隆化杂交瘤细胞株的亚类鉴定等方法筛选出单克隆抗体杂交瘤细胞株,用杂交瘤细胞株诱生小鼠腹水,应用蛋白A亲和层析法进行单抗的纯化,并对单克隆抗体的特异性进行鉴定。结果获得了4株可稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞2D3、4E6、1C8和1E5,诱生的腹水效价分别为1∶1×107、1∶1×106、1∶1×105、1∶1×106,亚类鉴定表明2D3为IgG1,其余3株均为IgG2b;特异性鉴定显示它们与多种毒素均无交叉反应,经过亲和层析,获得了纯化的单抗。结论获得了特异性的相思子毒素单克隆抗体,为建立相思子毒素的检测及纯化方法奠定了基础,其中4E6的效价最高,可作为检测相思子毒素的核心试剂。 张立营 赵怀龙 马凤龙 傅兴伦 孙英姿 高波关键词:单克隆抗体 相思子毒素双抗夹心ELISA检测方法的建立与评价 被引量:2 2010年 目的建立相思子毒素双抗夹心ELISA检测方法并进行方法学评价。方法优化最佳相思子毒素多抗包被浓度后建立了相思子毒素双抗夹心ELISA检测方法,鉴定其检测灵敏度、线性范围、特异性、重复性、回收率等。结果双抗夹心ELISA方法检测相思子毒素的最小检出限为1ng/mL,标准曲线在10~100ng/mL范围内线性良好。血清中加入已知量的标准毒素蛋白,测得平均回收率为89%。结论本方法检测相思子毒素的可测范围广、特异性强、灵敏度高、变异系数较小,表明其灵敏、特异、可靠。 张立营 孙英姿 赵怀龙 傅兴伦关键词:双抗体夹心ELISA 血清同型半胱氨酸的测定在慢性肾衰竭诊断中的临床应用 被引量:3 2010年 目的研究同型半胱氨酸(total homocysteine,tHcy)水平在慢性肾衰竭(chronic renal failure,CRF)诊断中的应用。方法采用循环酶法测定127例CRF患者和138例健康人血浆tHcy的含量,并进行统计分析。结果血浆tHcy浓度CRF患者显著高于正常对照组(P<0.01),且Ⅴ期患者显著高于Ⅳ期患者(P<0.01),Ⅳ期患者显著高于Ⅲ期患者(P<0.01)。结论 CRF患者血浆tHcy浓度明显升高,且随着病情的加重,血浆tHcy浓度呈逐渐上升趋势,检测血浆tHcy浓度对了解CRF患者病情具有重要意义。 孙英姿 梁继伟 王清 张立营 高波 沈罡综合性ICU细菌耐药监测结果分析 被引量:1 2008年 综合性重症监护病房(ICU)主要收治各种急危重症患者,常发生各种并发症.其中以感染最常见。而感染将加重其病情,增加治疗的困难及预后恶化。ICU患者机体免疫功能下降.其医院感染发生率及细菌耐药性明显高于普通病房。为了解1CU病房细菌感染及耐药状况,笔者对所在医院2004—01。2005—12ICU送检的各种标本中分离出的细菌分布及耐药性进行分析,为危重患者抗感染治疗提供依据。 孙英姿 王华强 姜美娟 梁冰关键词:病原菌 耐药性 综合性ICU细菌耐药监测 目的:研究综合性重症监护病房(ICU)患者感染的病原菌分布及耐药性特征。
方法:对我院综合性ICU 2004年1月-2005年12月各类感染标本所分离的细菌菌株分布及耐药性进行回顾性分析。
结果:分离... 孙英姿 李世娟 王华强 梁冰关键词:病原菌 耐药监测 重症监护病房 多重耐药 文献传递 阿尔茨海默病患者的脑脊液tau蛋白及Aβ1-42水平 被引量:18 2011年 目的探讨脑脊液(cerebrospinal fluid,CSF)中tau蛋白及β-淀粉样蛋白1-42(Aβ1-42)对诊断阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)的早期诊断价值,寻找AD理想的生物学标志。方法采用酶联免疫吸附法检测36例AD、24例血管性痴呆患者(vascular dementia,VD)和26名正常对照者(对照组)CSF中tau蛋白及Aβ1-42浓度的变化。结果 CSF中tau蛋白平均浓度:AD组(336±126)ng/L,VD组(183±96)ng/L,对照组(98±54)ng/L,AD组CSF中tau蛋白浓度明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);CSF中Aβ1-42平均浓度:AD组(341±113)ng/L,VD组(457±132)ng/L,对照组(502±167)ng/L,AD组CSF中Aβ1-42浓度明显低于对照组,差异有显著性意义(P<0.05)。结论脑脊液Aβ1-42、tau蛋白浓度的变化,不仅对诊断阿尔茨海默病具有较高的敏感性和特异性,而且亦可作为阿尔茨海默病与血管性痴呆鉴别诊断的生物学指标。 单守勤 赵权 张立营 孙英姿FQ-PCR检测人肠道乳酸杆菌的研究 2011年 目的应用荧光定量PCR技术对健康人粪便内乳酸杆菌进行定量分析,建立乳酸杆菌的荧光定量PCR检测方法。方法依据乳酸杆菌16S rDNA序列设计属特异性引物,应用荧光定量PCR技术检测乳酸杆菌的16SrDNA,对粪便中的乳酸杆菌进行定量检测和分析,并和用传统方法所获得的结果进行比较。结果结果显示荧光定量PCR检测乳酸杆菌和传统方法检测乳酸杆菌之间无显著性差异(9.3±1.5 vs 8.9±1.3 copy.,P>0.05)。结论荧光定量PCR技术比传统方法特异性高、敏感性强,更省时和省力。 冯玉奎 郑长青 孙英姿 高波关键词:实时荧光定量PCR 乳酸杆菌 丙肝病毒核心抗原荧光定量型生物条形码检测体系的建立与评价 被引量:3 2011年 目的建立丙肝病毒核心抗原(HCVcAg)的荧光定量型生物条形码检测体系,并对检测体系进行方法学评价。方法制备标记有HCVcAg多抗及特异DNA链的金纳米颗粒探针(NP探针)和标记有HCVcAg单抗的磁性微球探针(MMP探针),形成MMP探针-HCVcAg-NP探针复合物,再利用去杂交将NP探针上标记的DNA链释放出来,通过荧光定量PCR方法鉴定这些释放的DNA链可确定丙肝病毒的存在。结果建立了HCVcAg的荧光定量型生物条形码检测体系,检测灵敏度可达100fg/ml,是相应的HCVcAg ELISA检测方法的104倍。结论本研究为发展高灵敏度丙肝病毒的荧光定量型生物条形码检测试剂盒奠定了基础。 张立营 冯玉奎 梁冰 高博 孙英姿 苑同业 孙宇关键词:丙型肝炎病毒 丙型肝炎病毒核心抗原