孙鹏
- 作品数：39 被引量：138H指数：6
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- 相关领域：医药卫生文化科学自动化与计算机技术电子电信更多>>
- 金黄色葡萄球菌fur基因缺失株构建及其生物学特性研究
- 2018年
- 目的构建金黄色葡萄球菌Newman株fur基因缺失株,对其体外增殖、细胞侵袭及溶血活性特征变化进行研究,为通过封闭Fur蛋白表达治疗金黄色葡萄球菌感染提供新的实验依据。方法采用Gateway同源重组技术构建金黄色葡萄球菌Newman株fur基因缺失株,采用分光光度法检测其体外增殖活性变化;采用万古霉素保护试验检测其对A 549肺腺癌细胞株侵袭力的变化;观察其在血琼脂培养基上的溶血活性变化;采用实时荧光定量PCR检测fur缺失株α溶血素(hla)基因mRNA表达水平变化。结果成功构建金黄色葡萄球菌Newman株fur基因缺失株并通过PCR方法和测序方法验证。与Newman野生株相比,同一时间点侵入A 549肺腺癌细胞株内fur缺失株菌量(2 950CFUs/ml)显著少于野生株(20 100CFUs/ml,P<0.01),缺失株体外增殖活性及溶血活性显著减弱,且hla基因mRNA相对表达量(0.067)显著低于野生株(0.270)(P<0.05)。结论金黄色葡萄球菌fur缺失株在富铁条件下的增殖活性、细胞侵袭力及溶血活性均显著降低,对环境铁浓度感应及利用能力明显降低,Fur蛋白可能作为抗金黄色葡萄球菌感染治疗的新靶点。
- 英兰魏常梅薛东力孙鹏额尔德木图王艳艳王俊瑞
- 关键词：金黄色葡萄球菌基因敲除
- 卫生微生物学教学探索与体会被引量：5
- 2014年
- 在卫生微生物学课程的教学中注重理论教材的选择、课程内容的更新,课堂中采取多种教学手段和教学模式帮助学生更好地记忆、理解讲授的知识内容,课后通过布置案例式思考题以提高学生对所学知识的运用能力;实验课中在巩固学生基础实验技术操作熟练度的基础上,注重培养学生对综合性实验的设计、操作及分析能力。通过同时改进理论与实验教学,提高学生求知兴趣和学习主动性,进而提高了卫生微生物学的教学效果。
- 李恋包丽丽王俊瑞孙鹏牛燕沈晓玲
- 关键词：卫生微生物学教学
- 金诃子低温提取物的免疫活性被引量：6
- 2014年
- 目的探讨改进炮制工艺低温提取金诃子不同部位成分的免疫活性。方法采用低温提取金诃子,将上清液用不同的分离方法及透析膜分离等技术处理,最后将不同部位的提取液冷冻干燥(具体提取工艺正在专利申请中)。采用红外光谱检测提取物的成分和含量。随机将小鼠分为阴性对照组(生理盐水)、阳性对照组(灵芝多糖)、金诃子提取物高、中、低剂量组,连续灌胃14 d。通过小鼠尾部末梢血制片检测淋巴细胞转化率,通过腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验检测巨噬细胞的吞噬活性。结果金诃子不同部位提取物的物理性状不同、成分相似,与阴性对照组及阳性对照组比较,提取物高、中、低剂量组小鼠淋巴细胞转化率均提高(P均<0.01),且不同剂量组巨噬细胞吞噬鸡红细胞百分率均提高(P均<0.01)。结论金诃子不同部位的成分均有免疫活性。
- 赵小霞邱丽君宣成睿罗夏孙鹏杨丽敏
- 关键词：蒙药免疫活性
- 克雷伯杆菌对人肺癌细胞A549 β-防御素2表达的影响被引量：1
- 2015年
- 目的研究克雷伯杆菌对人肺癌细胞(A549)β-防御素2表达的影响。方法通过定量PCR和Western blot检测克雷伯杆菌作用不同时间(0.5、1、1.5和2 h)对人肺癌细胞(A549)产生的β-防御素2表达量的变化。结果随着克雷伯杆菌对人肺癌细胞作用时间的增长,β-防御素2的表达量在m RNA水平和蛋白水平上均有显著增加,差异有统计学意义(P<0.05)。结论克雷伯杆菌可以促进β-防御素2的产生。
- 高胜男张明昱孙鹏杨丽敏牛燕赵鹏伟
- 关键词：克雷伯杆菌肺癌细胞Β-防御素2
- 一种高效价的抗agra的抗体的制备方法
- 本发明公开了一种高效价的抗agra的抗体的制备方法，以大肠杆菌作为受体菌，抗氨苄青霉素为标记基因；将金黄色葡萄球菌中的agrA基因转入大肠杆菌载体中进行原核表达，并分离纯化得到agrA蛋白；然后将分离纯化的蛋白注入SD大...
- 赵鹏伟白瑞霞张福全崔珈衔孙鹏陆景坤牛燕赵方新张烜红梅
- 文献传递
- 一种紫外灯遥控器
- 本实用新型公开了一种紫外灯遥控器，包括遥控器和壳盖，所述壳盖内部形成一用于放置遥控器的凹槽，凹槽内部的中间处安装有紫外线灯，凹槽内部的四个角上均安装有将遥控器顶住的立柱，遥控器内部的电路板与遥控器的表面之间存有供空气通过...
- 赵鹏伟红梅孙鹏张烜陆景坤
- 文献传递
- 黄芩提取物对金黄色葡萄球菌体内外抑菌作用的实验研究被引量：23
- 2014年
- 研究黄芩醇提物和水提物对金黄色葡萄球菌的体外抑菌作用,及体内抗感染保护作用的实验研究。采用体外牛津杯药敏法;小鼠体内抗感染的保护作用法。黄芩醇提取物在体外牛津杯药敏法中按药物作用量150μg/μL、200μg/μL、250μg/μL、300μg/μL抑菌圈直径分别为17 mm、18 mm、18 mm、18 mm,黄芩水提取物抑菌圈直径为8 mm、8 mm、11 mm、13 mm。在体内实验中腹腔注射金黄色葡萄球菌0.5 mL细菌数为1×109,黄芩醇提取物的小鼠存活率为10%,黄芩水提取物的小鼠存活率为40%。黄芩醇提取物在体外对金黄色葡萄球菌的抑菌效果较好。而黄芩水提取物在体外抑菌实验结果中对金黄色葡萄球菌无明显抑菌作用。在体内的抗感染保护作用中黄芩水提取物的保护作用优于黄芩醇提取物。
- 张有志李存保杨丽敏赵鹏伟孙鹏王美玲
- 关键词：黄芩黄芩提取物金黄色葡萄球菌抑菌
- 沙门菌对小鼠胃癌细胞增殖及β-防御素-2表达的影响被引量：5
- 2017年
- 目的探讨沙门菌对小鼠胃癌细胞MFC增殖及β-防御素-2(mouseβ-defensin,m BD-2)表达的影响。方法将不同浓度(10、10~2、10~3和10~4个/ml)沙门菌分别作用MFC细胞不同时间(12、24和48 h)后,MTT法检测沙门菌对细胞抑制的最佳浓度及时间;TUNEL法检测不同浓度(10、10~2、10~3和10~4个/ml)沙门菌作用MFC细胞不同时间(12、24和48 h)对细胞凋亡的影响;将不同浓度(10、10~2、10~3和10~4个/ml)沙门菌作用MFC细胞4、8和12 h,定量PCR及Western blot法检测m BD-2 m RNA及蛋白水平。结果浓度103个/ml沙门菌作用24 h对MFC细胞的抑制作用明显,细胞凋亡也明显;沙门菌作用MFC细胞8 h时,m BD-2的表达量无论在蛋白还是m RNA水平均较高。结论m BD-2的表达在浓度103个/ml沙门菌作用8 h后达到最高,为进一步研究m BD-2的产生机制奠定了基础。
- 陈竞霞张柏宁孙鹏牛燕赵方新陆景坤张烜赵鹏伟
- 关键词：沙门菌胃癌细胞细胞增殖Β-防御素-2
- 亚抑菌浓度亚胺培南对MRSA体外增殖及毒力相关基因mRNA表达水平的影响被引量：2
- 2017年
- 目的:探讨亚抑菌浓度亚胺培南对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)生物学活性的影响,阐明碳青霉烯类抗生素对MRSA活性的抑制作用及其机制,为临床应用碳青霉烯类抗生素治疗MRSA感染提供依据。方法:选取5株ST239型MRSA临床分离株,采用1/10和1/2最小抑菌浓度(MIC)亚胺培南与其体外共培养1.5、6.0和12.0h,分为对照组(培养液中不加亚胺培南)、1/10MIC组(培养液中添加1/10MIC浓度亚胺培南)和1/2MIC组(培养液中添加1/2MIC浓度亚胺培南)。采用荧光定量PCR方法检测各组MRSA株毒力相关基因纤维黏连蛋白A(fnbA)、葡萄球菌蛋白A(spa)、α溶血素(hla)、白细胞毒素D(lek-D)和E(lek-E)、肠毒素A(sea)mRNA相对表达水平,分光光度法检测各组MRSA株体外增殖活性。结果:与对照组比较,体外共培养6.0和12.0h时,1/2MIC组MRSA株增殖活性明显降低(P<0.01);培养1.5和6.0h时,6个MRSA毒力相关基因mRNA相对表达水平均明显低于对照组(P<0.01);培养12h时,1/10MIC和1/2MIC浓度组MRSA株各毒力相关基因mRNA表达未能检测到。结论:亚抑菌浓度亚胺培南对ST239型MRSA多种毒力相关基因mRNA表达具有明显抑制效应,高浓度亚胺培南可抑制MRSA的体外增殖,提示亚胺培南对于重症MRSA感染患者具有潜在的应用价值。
- 王俊瑞段美庆额尔德木图孙鹏魏常梅韩艳秋
- 关键词：耐甲氧西林金黄色葡萄球菌毒力亚胺培南
- 鲍曼不动杆菌外膜蛋白A的克隆表达及纯化被引量：1
- 2015年
- 目的:通过分子克隆方法制备鲍曼不动杆菌外膜蛋白A(OmpA)纯化蛋白,为进一步研究鲍曼不动杆菌OmpA蛋白的生物学活性提供基础.方法:首先采用PCR方法扩增鲍曼不动杆菌标准菌株ATCC19606株外膜蛋白A编码基因(OmpA),构建其原核表达载体pET30a/ompA,所得产物经PCR方法和测序进行鉴定.之后筛选阳性表达载体,将其转化至大肠杆菌表达宿主菌BL21,最后将表达的蛋白质进行纯化.结果:重组表达载体pET30a/ompA构建成功,并经PCR方法和测序方法进行鉴定;重组蛋白在所构建的原核表达系统中实现了高表达,纯化后得到了高纯度的OmpA蛋白.结论:本次试验通过分子克隆技术,使鲍曼不动杆菌OmpA蛋白在构建的原核表达系统中成功表达,并且获得了高纯度的目标蛋白,为进一步研究鲍曼不动杆菌外膜蛋白A的生物学活性及抗体的保护作用奠定了基础.
- 魏常梅王俊瑞孙鹏张军力
- 关键词：鲍曼不动杆菌外膜蛋白A
