常海
- 作品数：6 被引量：3H指数：1
- 供职机构：第三军医大学西南医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 猿猴病毒40T抗原介导永生化黑素细胞对其核型、HLA-DR和hTERT表达的影响
- 2008年
- 目的:观察猿猴病毒40T(SV40T)抗原介导黑素细胞(melanocyte,MC)永生化对染色体核型、人白细胞抗原-DR(humanleucocyte antigen-DR,HLA-DR)和人端粒酶反转录酶(human telomerase reverse transcriptase,hTERT)表达的影响。方法:利用SV40T抗原基因和真核表达载体PEGFP,经SofastTM阳离子聚合物转染至体外培养的第4代MC细胞,使其永生化,通过G418筛选,滤纸片法挑选单一克隆。对培养至第15代的永生化细胞进行染色体分析,免疫组化方法检测HLA-DR和hTERT蛋白的表达,反转录(RT)-PCR检测hTERT mRNA表达,以人黑素瘤A375细胞株为对照。结果:SV40T抗原介导的永生化黑素细胞具有正常的二倍体,HLA-DR和hTERT的表达未受影响,均为阴性,同时也未检测到hTERT mRNA的表达。结论:①转化的MC染色体为正常核型、HLA-DR的表达不受体外长期传代培养和SV40T抗原的影响;②SV40T抗原不通过上调端粒酶反转录酶活性途径介导细胞永生化,同时也说明该转化细胞不易向恶性转化。
- 常海邓军郝飞杨希川钟白玉叶庆佾
- 关键词：黑素细胞抗原人类白细胞抗原DR人端粒酶反转录酶
- SV40T抗原介导永生化对黑素细胞生物学的影响
- 目的:观察SV40T抗原介导黑素细胞(melanocyte,MC)永生化对黑素细胞生物学的影响影响。方法:利用SV40T抗原基因和真核表达载体PEGFP,经SofastTM阳离子聚合物转染至体外培养的第四代MC细胞,使其...
- 常海邓军郝飞杨希川钟白玉叶庆佾
- 文献传递
- 黑素细胞移植治疗白癜风的实验研究
- 白癜风是一种常见色素性脱失性疾病,影响美容,易诊难治,发病率有逐年增高趋势。病理变化主要表现为皮损局部表皮和毛囊中的黑素细胞(melanocytes,MC)减少或缺失,从而使黑素合成减少或缺失,致使皮肤上表现为境界清楚的...
- 邓军徐小珂王鹰杨希川常海钟白玉郝飞
- 文献传递
- SV40T抗原基因诱导可逆性永生化黑素细胞的生物学特征评价
- 正常细胞在体外培养时生命期是有限的，细胞增殖一段时间后会出现群体生长缓慢，有丝分裂停滞，进而衰老死亡，这种现象叫做复制衰亡(replicativesenescence)。细胞的这种生物学现象导致一些体外培养的细胞因生长增...
- 常海
- 关键词：黑素细胞抗原基因细胞永生化SV40T抗原
- 文献传递
- SV40T基因转染黑素细胞遗传稳定性研究被引量：1
- 2008年
- 目的探讨SV40T抗原基因转染构建的永生化黑素细胞的遗传稳定性。方法体外培养黑素细胞,对第20代的永生化黑素细胞进行四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法分析细胞增殖情况,同时分析染色体核型,流式细胞仪分析细胞周期和DNA倍体;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)半定量分析第20代细胞hMLH1、hMSH2错配修复基因表达,并提取细胞基因组,微卫星位点PCR产物进行变性聚丙烯酰胺电泳分析微卫星不稳定性。结果经过连续培养的第20代转染的黑素细胞左旋多巴染色阳性,增殖速度较原代培养黑素细胞明显增快,细胞周期S+G2期细胞比例较原代黑素细胞增多,同时未见异常DNA倍体,染色体仍为2倍体,转染细胞的hMLH1、hMSH2错配修复基因表达较正常黑素细胞上调;在1p22(D1S187)、5q14(D5S107)、18q12.2-12.3(D18S34)3个位点未出现微卫星不稳定性(m icrosatellite instab ili-ty,M I)。结论SV40T抗原基因转染的黑素细胞体外培养不出现遗传稳定性的异常改变。
- 常海邓军杨希川郝飞钟白玉叶庆佾
- 关键词：黑素细胞错配修复基因微卫星不稳定性
- 色素性扁平苔藓被引量：2
- 2008年
- 报告1例色素性扁平苔藓。患者男,20岁。躯干及四肢出现褐色斑疹半年余,无自觉症状。皮肤科检查见躯干及四肢散在大小不一、边界清楚的褐色斑疹和斑片,部分呈条索状,部分皮损肥厚、浸润。皮损组织病理改变符合色素性扁平苔藓。
- 常海叶庆佾杨希川邓军郝飞钟白玉
- 关键词：扁平苔藓色素性
