张小洪
- 作品数：3 被引量：1H指数：1
- 供职机构：四川大学华西基础医学与法医学院免疫学教研室更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 抗hMOF单克隆抗体的制备与鉴定被引量：1
- 2011年
- 目的制备抗hMOF的单克隆抗体并对其生物学特性进行鉴定。方法以重组GST-hMOF融合蛋白作为免疫原免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0细胞融合,经多次筛选及克隆化,建立可以稳定分泌抗hMOF单克隆抗体的杂交瘤细胞株。用ELISA、Western blot、免疫组化对此抗体特性进行鉴定。结果筛选到1株能稳定分泌抗hMOF单克隆抗体的细胞株4C1C8,亚类鉴定单抗为IgG1。ELISA法测定饱和硫酸铵盐析抗体效价为1∶409600,抗体相对亲和力为7.65×106L/mol;Western blot显示抗体能特异识别免疫原;细胞免疫组化显示此单抗可以特异的识别正常细胞株HL7702表达的hMOF。结论成功制备抗hMOF单克隆抗体,为进一步研究hMOF功能及机制奠定了基础。
- 孙厚良魏大鹏张小洪刘彦君章崇杰
- 关键词：单克隆抗体
- 抗人Atg5单克隆抗体的制备与鉴定
- 2013年
- 目的制备抗人Atg5单克隆抗体,并对其生物学特性进行鉴定。方法以人Atg5重组蛋白作为免疫原免疫Balb/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0细胞融合,经多次筛选及克隆化,建立可稳定分泌抗人Atg5单克隆抗体的杂交瘤细胞株。用ELISA、Western Blot、免疫组化鉴定单克隆抗体的特性,并测定其效价、亚型及亲和力常数。结果成功筛选到一株能稳定分泌抗人Atg5单抗的细胞株1E7B3H9,亚型鉴定重链为IgG2b,轻链为kappa链。ELISA法测定腹水抗体效价为1:4.096×105,抗体亲和力常数为7.309×108 mol/L;Western blot显示此单抗能特异性识别人子宫颈癌Hela细胞系中的天然人Atg5蛋白;细胞免疫组化进一步显示Atg5表达在细胞质中。结论成功制备了抗人Atg5单克隆抗体,为进一步研究其与宫颈癌关系及在临床上的应用奠定了基础。
- 张现伟李志广章崇杰张小洪蒋小梅旷兴林魏大鹏罗志娟毕建虹
- 关键词：单克隆抗体HELA细胞株宫颈癌
- 抗delta-like-1单克隆抗体的制备与鉴定
- 2010年
- 目的制备抗delta-like-1的单克隆抗体并鉴定其特异性。方法用delta-like-1多肽-BSA蛋白复合物作为免疫原免疫Balb/c小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞(SP2/0)融合,经多次筛选及克隆化,建立可以稳定分泌抗delta-like-1单抗的杂交瘤细胞株。用ELISA、Western blot、细胞免疫组化对此抗体特性进行鉴定。结果筛选到两株能稳定分泌抗delta-like-1单抗的细胞株3H11C11A9E3和2D5D11F8F1,亚类鉴定两株均为IgG1,轻链为kappa链;ELISA法测定两株细胞腹水抗体效价分别为1:4.096×105和1:1.024×105,抗体亲和常数分别为3.98×107、3.28×107L.mol-1;Western blot显示此单抗能特异性识别神经胶质瘤细胞株U251中的天然delta-like-1蛋白;细胞免疫组化进一步显示delta-like-1分布于细胞核中。结论成功制备了抗delta-like-1单克隆抗体,可为研究delta-like-1与脑胶质瘤等神经系统疾病的关系奠定基础。
- 张小洪魏大鹏李天佳罗志娟
- 关键词：单克隆抗体U251细胞株酶联免疫吸附法
