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小鼠胚胎对人卵巢癌细胞生物学行为影响的体外研究: 2010年; 探讨体外共培养环境中小鼠胚胎对人卵巢癌细胞HO8910PM的影响.通过小鼠胚胎与肿瘤细胞体外共培养模型观察小鼠胚胎对肿瘤细胞的形态及生长行为的影响,Annexin V-EGFP/PI原位检测与小鼠胚胎共培养后肿瘤细胞的凋亡情况,MTT粘附实验、transwell迁移及侵袭实验研究与小鼠胚胎共培养后的人卵巢癌细胞的粘附性、迁移性及侵袭性的变化.共培养时小鼠胚胎能够侵入人卵巢癌细胞并推开肿瘤细胞形成自己的生长空间,激光共聚焦显微镜下见胚胎周围的肿瘤细胞凋亡增加,与对照组比较共培养后的HO8910PM肿瘤细胞的粘附性、迁移性及侵袭性均显著降低(P<0.05、P<0.01).结果表明体外共培养体系中小鼠胚胎能够侵袭肿瘤细胞,促进人卵巢癌细胞的凋亡,并使其粘附性、迁移及侵袭相关恶性行为降低.; 丁晓燕张弘方廖琼乔海刘阳张小梅王智彪; 关键词：共培养凋亡

博尔纳病病毒感染人少突胶质细胞差异microRNA表达和生物信息学分析: 背景：博尔纳病病毒（Borna disease virus，BDV）是引起博尔纳病的病原体，最先被发现于德国博尔纳镇的军马中，引起急性脑脊髓非化脓性炎症的地方性流行病。BDV是一种单股负链、非节段性、非细胞溶性的非逆转录...; 张弘; 关键词：脑脊髓炎病毒感染微生物检验

稳定表达绿色荧光蛋白的B16细胞株的建立及其生物学特性研究: 2011年; 目的建立稳定表达绿色荧光蛋白的B16黑色素瘤细胞株,并研究其生物学特性。方法转染增强型绿色荧光蛋白基因入B16细胞,经G418联合单克隆培养,筛选阳性细胞。激光共聚焦荧光显微镜观察EGFP阳性细胞形态;流式细胞仪检测细胞内EGFP基因的蛋白表达;RT-PCR检测EGFP基因的mRNA表达;皮下接种及MTT法评价细胞在体内外的生长特性。结果流式细胞仪检测表达绿色荧光蛋白的细胞阳性率为99.81%,RT-PCR检测到EGFP基因的mRNA阳性表达。生长曲线显示其体外增殖趋势与B16相似,EGFP-B16体内成瘤速度较B16慢(p<0.05)。结论稳定表达绿色荧光蛋白的EGFP-B16细胞株成功建立,可作为进一步研究恶性黑色素瘤的材料。; 张弘丁晓燕方廖琼王智彪乔海刘阳张小梅; 关键词：稳定转染增强型绿色荧光蛋白基因

电压敏感染料DiBAC4(3)用于检测胚胎细胞膜电位变化的研究被引量：4: 2012年; 目的:探讨电压敏感染料DiBAC4(3)用于检测胚胎细胞膜电位变化的可行性。方法:分别取单细胞期胚胎、二细胞期胚胎、囊胚期胚胎,用M16孵育0.5 h后加入终浓度5μmol/L的DiBAC4(3)溶液,每隔10min在荧光显微镜下或激光共聚焦显微镜下观察胚胎细胞荧光强度变化,0.5 h后实验组加入终浓度100mmol/L的KCL溶液,对照组加入与KCL溶液等量的M16,每隔5 min观察胚胎细胞荧光强度变化。结果:每个时期的胚胎细胞都可以被DiBAC4(3)染色,没加KCL前半小时荧光强度随时间缓慢增强,加KCL后即刻荧光强度显著增强,且在15 min内荧光强度随时间增强。结论:电压敏感染料DiBAC4(3)可以用于胚胎细胞膜电位变化的检测。; 丁晓燕方廖琼张弘乔海王智彪; 关键词：胚胎细胞膜电位去极化

不同孕期小鼠羊水对小鼠肝癌细胞H22增殖和凋亡的影响被引量：2: 2008年; 目的观察不同孕期小鼠羊水对小鼠肝癌细胞H22增殖和凋亡的影响。方法用孕11、13、15 d和17 d的KM小鼠羊水-RPMI1640培养基培养H22细胞(培养液中羊水终浓度为10%),RPMI1640培养基培养的H22细胞作为对照组,采用MTT法检测细胞的增殖能力;Annexin V-FITC法检测细胞凋亡率,透射电镜观察细胞形态;S-P免疫荧光染色法经激光共聚焦显微镜分析H22细胞中增殖细胞核抗原(PCNA)和p53的表达。结果羊水能明显抑制H22细胞的体外增殖和PCNA的表达,随孕期的延长而增高(P<0.05);并能促进p53的表达以及诱导H22细胞凋亡,随孕期的延长而降低(P<0.05)。同时,PCNA和p53的表达强度具有明显的负相关性(r=-0.808,P<0.01)。结论孕11、13、15、17 d的小鼠羊水能抑制H22细胞增殖,诱导其凋亡,可能与PCNA和p53的表达有关,并且孕期越早、干预时间越长,效果越显著。; 丁雅明方廖琼周兰张弘白晋王智彪; 关键词：H22细胞羊水增殖细胞核抗原 P53

小鼠囊胚与黑色素瘤细胞体外共培养模型优化: 研究背景:　　上世纪80年代,有研究者将经丝裂霉素C处理后的肿瘤细胞作为饲养层细胞与胚胎共培养,可以提高胚胎的卵裂率及囊胚的形成率,为早期胚胎发育和胚胎植入的研究提供了理想模型。但是,失去恶性的肿瘤细胞与胚胎共培养的...; 张弘; 关键词：增强型绿色荧光蛋白基因转染黑色素瘤

小鼠囊胚与黑色素瘤细胞共培养模型优化被引量：2: 2010年; 采用基因转染的方法,将EGFP(增强型绿色荧光蛋白)基因导入B16黑色素瘤细胞中,筛选出稳定表达绿色荧光蛋白的EGFP-B16细胞株,利用RT-PCR法检测细胞中EGFP基因的mRNA表达,流式细胞仪分析荧光细胞阳性率。利用EGFP-B16细胞与C57BL/6小鼠囊胚共培养,在激光共聚焦荧光显微镜下观察,比在普通倒置显微镜下观察B16细胞与C57BL/6小鼠囊胚共培养的模型能更加直观的表达胚胎与肿瘤的相互作用关系。; 张弘丁晓燕方廖琼王智彪乔海; 关键词：囊胚共培养

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张弘