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张洪美
作品数:
1
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供职机构:
中国医学科学院中国协和医科大学
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发文基金:
国家自然科学基金
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相关领域:
生物学
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合作作者
吴宁华
中国医学科学院中国协和医科大学
沈珝琲
中国医学科学院中国协和医科大学
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吴宁华
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中国医学科学...
年份
1篇
2000
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维生素D_3、9-顺式维甲酸及其相应核受体对hsp90β基因表达的调控
2000年
目的 研究维生素 D3(VD3)、9-顺式维甲酸 (9- cis- RA)及其相应核受体对 hsp90 β基因表达的调控作用。方法 采用 DEAE- Dextran方法将人 hsp90 β基因调控片段 (- 10 39bp/ +15 31bp)介导的荧光素酶 (L uc)报告基因质粒 β1.11转染 Jurkat细胞 ,并用 VD3和 9- cis- RA分别或同时刺激细胞 ,或将质粒 β1.11及野生型维生素D3受体 (VDR)或 /和维甲酸 X受体 α(RXRα)真核表达质粒共转染 Jurkat细胞 ,检测细胞裂解液中荧光素酶活性 ;用 Western印迹分析方法检测经 VDR真核表达质粒转染或用 VD3和 9- cis- RA刺激的 Jurkat细胞中内源性Hsp90β蛋白的改变 ;通过电泳迁移率变更分析 (EMSA)实验 ,检测 VDR和 RXR能否与含有 hsp90β基因第一内含子中维生素 D3应答元件 (i VDRE)的双链寡核苷酸片段发生特异结合。结果 VD3和 9- cis- RA可分别低水平诱导hsp90β基因表达 ,而两种配体同时加入有协同作用。 VDR或 RXRα分别转染只能较弱地抑制 hsp90β基因表达 ,二者共转染能增强其抑制作用。 EMSA实验证实 ,VDR和 RXR都可特异结合于 i VDRE上。结论 VD3和 9- cis- RA这两条信号途径共同参与 hsp90β基因的启动子活性调节。
张洪美
吴宁华
沈珝琲
关键词:
维生素D3
9-顺式维甲酸
基因表达
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