张爱峰
- 作品数：19 被引量：31H指数：3
- 供职机构：西安交通大学医学院第二附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金沙漠绿洲基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- HLA-B27阴性强直性脊柱炎一家系的心脏损害特征被引量：1
- 2007年
- 目的观察 HLA-B27阴性家族性强直性脊柱炎(AS)心脏损害的特征。方法所有家系成员均采集完整病史、临床检查、常规12导联心电图、彩色多普勒超声心动图检查。并与年龄匹配的正常人对比分析。结果 33例家系成员中发生心房颤动的6例,占总心律失常人数的46%,心动过缓2例,高度房室传导阻滞1例,病态窦房结综合征1例,完全性右束支传导阻滞2例,室内差异性传导1例(排除 AS),所有传导系统异常的心律失常占 AS患者总心律失常人数的36%。因心脏原因死亡3例,其中1例死于全自动双腔起搏器(DDD)术后1年。AS 患者中 NYHA 心功能分级Ⅰ级8例。级2例,Ⅲ级1例,左心房扩大5例(45%),二尖瓣返流6例,三尖瓣返流4例。结论家族性 AS 心脏损害发生心律失常的种类有相似的趋势,主要以心房颤动为主,累及传导系统的心律失常次之,心脏损害以左心房扩大,舒张功能降低为主,可伴有二尖瓣和/或三尖瓣的返流。
- 杨海涛孙超峰薛小临韩克李红兵张爱峰崔长琮王东琦
- 关键词：强直性脊柱炎心电图心房颤动彩色多普勒超声心动图
- 多质粒共转染建立Cav1.3 L-型钙通道的研究模型被引量：2
- 2009年
- 目的:提高多质粒转染效率,建立钙离子通道的研究模型。方法:在传统的脂质体转染过程中,通过不断调整细胞密度、转染质粒DNA的量,将含Cav1.3L-型钙通道相关亚基的质粒DNA转染至HEK293T细胞,采用全细胞膜片钳技术检测Cav1.3L-型钙通道的电流表达。结果:转染后的HEK293T细胞在荧光显微镜下可见明显的绿色荧光;全细胞膜片钳技术检测出Cav1.3 L-型钙通道电流的表达。结论:通过调整细胞密度和转染质粒DNA的量,可以提高脂质体介导多质粒共转染HEK293T细胞的效率,建立钙离子通道的研究模型。
- 强华魏峰张爱峰史瑞明孙超峰马爱群
- 关键词：基因脂质体293T细胞
- 清道夫受体B族I型(SR-BI)基因多态性与血脂代谢及冠心病关系的研究
- 张爱峰
- Cav1.3L-型钙通道K228E突变体的构建及功能研究
- 2009年
- 目的通过构建Cav1.3基因K228E突变,观察K228E突变对L-型钙通道电生理特性及蛋白表达和转运的影响。确定钙通道α1亚基结构域ⅠS4段上N-端带正电荷的氨基酸对该通道电生理学特性的作用,从而为创建钙通道起搏器奠定基础。方法①一步法快速定点诱变构建Cav1.3基因K228E突变体的真核表达载体;②膜片钳观察突变钙通道电流,激光共聚焦技术观察突变钙通道蛋白在细胞内的表达和定位。结果①检测表达于HEK293细胞上的L-型钙电流:转染野生型Cav1.3质粒和相关亚基质粒,可检出L-型钙电流,其半激活电压V1/2=(-36.56±2.08)mV、半失活电压V1/2=(-42.93±0.14)mV(5mmolBa2+);而转染K228E-Cav1.3质粒和相关亚基质粒的HEK293T细胞上未检测到钙电流;②检测K228E突变通道蛋白在细胞内的表达和定位:转染野生型和突变型Cav1.3质粒及相关亚基质粒,48h后观察到野生型与突变型钙通道蛋白在细胞膜上都有表达。结论Cav1.3基因K228E突变虽不影响L-型钙通道蛋白质的表达与转运,但却不表达钙通道电流,是一种功能丧失性突变。
- 强华孙超峰魏峰张爱峰史瑞明马爱群崔长琮
- 关键词：生物起搏L-型钙通道定点诱变膜片钳
- 先天性长QT综合征HERG基因L539fs／47及A561V突变的功能研究被引量：3
- 2007年
- 目的探讨HERG基因L539fs／47突变及A561V突变的功能。方法采用交叠聚合酶链式反应（PCR）及克隆载体快速PCR构建突变体，用限制性内切酶法将突变体克隆到真核表达载体pcDNA3中，用Superfect转染试剂将野生型及突变型HERG质粒与荧光载体pRK5-GFP共转染至HEK293细胞，用免疫荧光化学法及蛋白免疫印记法检测蛋白质表达，用全细胞膜片钳法检测HERG通道的电流表达。结果构建的突变体经DNA直接测序示HERG基因L539fs／47缺失突变及A561V点突变，L539fs／47突变体蛋白质位于细胞膜上，A561V突变体蛋白质位于细胞膜上及细胞浆中，L539fs／47突变体蛋白质条带小于80kDa，A561V突变蛋白仅有135kDa一条蛋白条带，野生型通道记录到尾电流而L539fs／47突变及A561V突变型通道均未检测到电流表达。结论成功构建并表达了HERG基因L539fs／47突变及A561V突变的功能，L539fs／47突变通过电压门控异常机制抑制HERG电流，而A561V突变通过滞留降解及膜通道功能异常机制抑制HERG电流。
- 李宇廉姜芳崔长琮赵永辉薛小临张爱峰杨海涛王东琦黄辰
- 关键词：先天性长QT综合征基因突变
- HLA-B27阴性强直性脊柱炎一家系心脏损害彩色多普勒超声表现
- 2008年
- 杨海涛孙超峰韩克薛小临李红兵张爱峰崔长琮王东琦
- 关键词：强直性脊柱炎彩色多普勒超声舒张功能
- HEK293细胞中杂合状态下无义突变体L539fs/47对野生型HERG电流的作用
- 2016年
- 目的研究单独表达无功能的无义突变体L539fs/47在HEK293细胞中杂合状态下对野生型HERG电流的作用。方法用脂质体转染法将野生型HERG及突变体HERG-L539fs/47分别转染HEK293细胞36h后,RT-PCR检测HERG mRNA表达,免疫荧光及免疫印迹检测HERG蛋白定位及表达量,全细胞膜片钳检测IHERG电流密度。结果野生组HERG的mRNA表达量高于L539fs/47突变组(1.066±0.612 vs.0.254±0.397,P<0.01)。免疫荧光检测发现野生型HERG蛋白多于突变体,野生型HERG蛋白主要分布在细胞膜上;而HERG突变体蛋白大部分滞留胞质。免疫印迹显示:不同于野生型HERG135ku及155ku 2个条带,突变体仅60ku 1个条带。全细胞膜片钳检测WT+MT组IHERG较WT组下降55.23%(22.03±2.62 vs.49.20±2.31pApF,P<0.01)。结论 HEK293细胞中杂合状态下截断突变体L539fs/47对野生型HERG电流的不完全负显性抑制作用。
- 吕颖张军波张爱峰刘仲伟王军奎韩稳琦潘军强李国良孙超峰
- 关键词：HERG无义突变HEK293细胞
- 细胞外钾对HERG基因无义突变L539fs/47表达的调控被引量：1
- 2016年
- 目的:研究持续细胞外钾对野生型HERG与其突变体L539fs/47蛋白表达的影响。方法:用脂质体转染法将野生型HERG(WT)及其突变体HERG-L539fs/47(MT)分别转染HEK293细胞36 h后,0.8、4.3及10mmol/L的钾干预6 h,流式细胞术检测HERG蛋白表达量;干预12 h用激光共聚焦成像和免疫印迹法进行HERG蛋白定位及表达量检测。结果:用激光共聚焦成像检测发现野生型HERG蛋白主要分布在细胞膜上;而HERG突变体L539fs/47蛋白大部分滞留胞浆;并且HERG蛋白的表达均随细胞外钾浓度升高而增多。流式细胞术结果显示细胞外高钾组荧光增多(P<0.01),WT组荧光阳性细胞百分比和荧光强度均高于MT组(P<0.05)。免疫印迹显示,不同于野生型HERG 135 kD及155 kD 2个条带,突变体仅60 kD 1个条带,3个条带均受细胞外钾影响(P<0.05)。结论:细胞外高钾增强细胞膜上野生型和突变型HERG通道蛋白的稳定性,持续低钾干预时间依赖性地减少HERG通道蛋白的表达。
- 吕颖张军波刘仲伟张爱峰潘军强王军奎潘硕韩稳琦孙超峰
- 关键词：HERG基因无义突变HEK293细胞
- 先天性长QT综合征相关HERG基因细胞株的建立及其蛋白质表达
- 2007年
- 目的:建立稳定的先天性长QT综合征相关HERG基因的细胞株,并观察其蛋白质表达。方法:原核克隆载体PGEM-HERG经限制性内切酶获得HERG cDNA,将HERG cDNA亚克隆到真核表达载体pcD-NA3中,用Lipofectamin2000转染试剂介导将pcDNA3-HERG及荧光真核表达载体PRK5-GFP共转染至HEK-293细胞,利用G-418进行细胞筛选,并用稀释法建立稳定的HEK-HERG细胞株,用细胞免疫荧光化学法及蛋白免疫印迹法(Western-blot)检测基因的蛋白质表达。结果:建立的HEK-HERG细胞株稳定传代,细胞免疫荧光化学法及Western-blot法检测到了HERG通道蛋白质的表达。结论:该方法可成功建立HEK-HERG细胞株并表达HERG通道蛋白质,为今后突变型HERG基因的研究提供了细胞基础。
- 李宇崔长琮赵永辉薛小临黄辰张爱峰
- 关键词：先天性长QT综合征HERG基因细胞株
- ATP结合盒转运体A1基因G596A变异对血脂的影响被引量：1
- 2006年
- 目的探讨ATP结合盒转运体A1(ATP-bindingcassettetransporter1,ABCA1)基因G596A变异是否影响人群的血脂水平。方法对象选自中国西北地区汉族人267名,年龄(62±9)岁。以蛋白酶K消化、苯酚及氯仿抽提以及异丙醇沉淀的方法提取全基因组DNA。应用聚合酶链反应、限制性内切酶片段长度多态性结合测序的方法检测ABCA1基因单核苷酸多态性。结果该研究群体等位基因ABCA1-A和G的基因频率分别为51.6%和48.4%,符合Hardy-Weinberg平衡定律(χ2=0.66,P>0.50)。在ABCA1G596A的GG、GA和AA的3种基因型中,高密度脂蛋白水平依次呈上升趋势,GG型(1.15±0.38)mmol/L与AA型(1.28±0.48)mmol/L差异无统计学意义(P<0.05);甘油三酯水平依次呈下降趋势,GG型(2.0±1.1)mmol/L与AA型(1.7±1.1)mmol/L差异有统计学意义(P<0.05)。结论ABCA1G596A变异可影响西北地区人群的血脂水平,GG型携带者可产生有益的临床血脂谱。
- 张涛李红兵王东琦崔翰斌张爱峰
- 关键词：ATP结合盒转运体A1单核苷酸多态性高密度脂蛋白甘油三酯
