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转基因小麦Puroindoline蛋白SDS-PAGE方法的研究与应用被引量：1: 2006年; 小麦嘌呤吲哚蛋白(Puroindoline)是优质遗传特性硬度的生化标记,对小麦磨粉品质起决定性作用。对目前分析此类蛋白的两类Triton-X-114和Tricine-SDS-PAGE系统进行了优化和比较,建立了详细的适合半子粒分离Pin蛋白的电泳方法。采用此法检测转pinA基因的硬粒小麦P34的后代以及转基因硬粒小麦之间杂交子代的外源基因pinA的表达情况,取得了良好的效果。该方法为Puroindoline蛋白的进一步研究奠定了基础,为小麦品质生化和分子标记辅助育种提供了方法。; 张金锐陈明洁姜泽群宋斐熊晓燕何光源; 关键词：小麦 SDS-PAGE

SDS-PAGE分析转基因小麦与主栽小麦杂交后代的高分子量麦谷蛋白亚基被引量：5: 2006年; 目的:高分子量麦谷蛋白亚基(HMW-GS)1Ax1、1Dx5是对小麦面包烘烤品质有重要影响的优质亚基。将转基因小麦株系与普通小麦栽培品种常规杂交并快速筛选后代,以选育含有外源优质亚基的主栽小麦品系。方法:将分别含有1Ax1、1Dx5亚基的转基因小麦株系B102-1-2、B73-6-1与3种普通小麦主栽品种鄂恩1号、鄂麦12号、日喀则8号常规杂交,用不连续SDS-PAGE方法鉴定12组杂交组合(正反交)F1代311颗籽粒的HMW-GS。结果:不连续SDS-PAGE分析大量子代带型,能够快速鉴定筛选出具有优质亚基的株系,转基因获得的外源优质HMW-GS基因在大部分F1子代中能够共显性遗传。结论:常规杂交育种能使外源基因有效地整合进主栽小麦的基因组中,进一步分析后代遗传的稳定性和遗传规律就可以培育出优质的新品种;不连续SDS-PAGE快速筛选优质亚基的株系具有可操作性和实用性。; 张金锐刘勇林刚李三和何光源; 关键词：转基因小麦高分子量麦谷蛋白亚基杂交 SDS-PAGE

小麦高分子量麦谷蛋白亚基序列及其结构与加工品质的关系被引量：7: 2006年; 高分子量麦谷蛋白亚基(highmolecularweightgluteninsubunit,HMW-GS)是小麦种子贮藏蛋白的主要成分,其组成、含量和结构直接影响小麦面粉面筋的弹展性,决定着小麦的加工品质。主要对小麦HMW-GS的序列、结构和亚基之间组合形式作了详细的综述,并较系统地讨论了HMW-GS的结构和组成、特点等与面粉的加工品质之间的关系,以及如何从定性和定量两方面来影响面粉的加工品质。; 张金锐刘勇林刚何光源; 关键词：小麦高分子量麦谷蛋白亚基

小麦面粉Puroindoline蛋白的提取与纯化被引量：1: 2005年; Puroindoline蛋白是小麦面粉中一种非常重要的蛋白质,不仅影响和决定了籽粒的硬度,而且有抗G+、G-菌以及抗真菌的作用.用含4% Triton X-114、 100 mmol/L pH7.8 Tris-HCl缓冲液处理小麦面粉来分离Puroindoline蛋白,经处理后得到的蛋白质混合溶液首先用分子筛葡聚糖G-75纯化,每个收集管内的组分经SDS-PAGE分析,分子量小于31 kD的蛋白质组分被回收和集中,回收的蛋白质组分经PEG20000浓缩后,再用离子交换柱羧甲基纤维素(CM-23)进行纯化.其洗脱液分别是双蒸水和NaCl,梯度为0.05～0.7 mol/L、8 mmol/L pH5.5的MES缓冲液,回收只含15 kD的蛋白质的组分,接着用PEG20000浓缩,最后冷冻干燥得到Puroindoline蛋白.; 王珏罗立廷陈明洁李洋张金锐何光源; 关键词：面粉 TRITON SDS-PAGE

西藏半野生小麦高分子量麦谷蛋白亚基组成分析被引量：5: 2006年; 应用SDS-PAGE分析了50份西藏半野生小麦(Triticum aestivum ssp.tibetanum Shao)的高分子量麦谷蛋白亚基等位基因组成。结果表明,43份材料的HMW-GS组成是同质的,7份材料为异质。供试材料共有7种HMW GS组合,以Null、7+8、2+12为主要类型,占所分析材料的68．4％。在Glu-1位点共检测到10种等位基因,Glu- A1位点2种,Glu～B1位点4种,Glu～D1位点4种。Null(96％)、7+8(80．4％)和2+12(94．9％)分别是Glu-A1、 Glu-B1和Glu～D1位点上主要的等位基因。在Glu-B1位点还新发现2个亚基,暂时分别命名为8*和7**。说明西藏半野生小麦中存在着较广泛的HMW-GS等位基因变异,是小麦品质育种潜在的可利用的遗传资源。; 彭艳张金锐刘勇何光源; 关键词：西藏半野生小麦高分子量麦谷蛋白亚基等位基因

杂交育种改良小麦加工品质的初步研究: 小麦是世界上栽培面积最大、产量最高、地理分布最广的粮食作物之一。长期以来,我国的小麦研究对品质改良不够重视,导致目前小麦推广品种的品质普遍较差。因此,改良我国小麦品质具有十分重要的理论和实践意义。小麦品质是小麦籽粒对于终...; 熊晓燕姜泽群宋斐张金锐何光源; 关键词：基因工程小麦品质改良 HMW-GS; 文献传递

转基因小麦外源基因在主栽小麦种质中的遗传规律被引量：9: 2005年; 为了研究转基因小麦中外源品质基因1D x 5在我国主栽小麦种质中的遗传规律,以转基因小麦B 72-8-11b为父本,主栽品种川89-107和鄂麦18为母本进行杂交,采用SDS-PAGE技术检测并分析各组合亲本、F1、F2、BC1F2、BC2F1、BC2F2代的HMW-GS组成。结果表明,外源基因有效地整合到主栽小麦的基因组中,并能够遵循孟德尔遗传模式稳定地遗传给下一代。; 李三和林刚张金锐何光源; 关键词：转基因小麦

粘果山羊草(Aegilops kotschyi)puroindoline b基因的克隆与表达分析被引量：1: 2006年; 籽粒硬度是小麦加工品质的重要影响因素。puroind oline a(P in a)和puroind oline b(P in b)是控制小麦籽粒硬度的主效基因。根据已报导的小麦P in b基因的保守序列,设计合成了一对特异性引物ForB 1与R evB 1,对粘果山羊草(A eg ilop s kotschy i,CuMk)的三个材料的基因组DNA和胚乳cDNA进行P in b基因扩增、克隆、序列测定和表达分析,发现了4个新型P in b等位基因,基因序列与六倍体小麦的同源基因存在较大的差异。与软粒小麦品种C ap ito le的P inb-D 1a相比较,其核苷酸同源性分别为93.3%、94.6%、94.6%、94.4%,氨基酸同源性分别为90.5%、93.2%、93.2%、92.6%。其ORF长447 bp,编码148个氨基酸残基,都具有麦类作物P in b基因特有的19个氨基酸的信号肽序列和W PTKWW K的色氨酸结构域。等位基因P in b-11-1含有1个紧邻色氨酸结构域的突变位点(V a l66Phe)。RT-PCR证实了P in b基因在籽粒胚乳中的表达。Sou thern b lot分析结果显示,三种材料均含有两个拷贝的P in b基因。研究结果表明,粘果山羊草中包含与小麦差异较大的籽粒硬度控制基因,为栽培小麦的品质改良提供了丰富的基因资源。; 陈明洁方倜虞斌张金锐杨广笑何光源; 关键词：粘果山羊草 PUROINDOLINE 籽粒硬度克隆

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张金锐