张雪梅 作品数:70 被引量:266 H指数:8 供职机构: 中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家科技重大专项 国家杰出青年科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 农业科学 经济管理 更多>>
CVA16感染对m^6A甲基化相关蛋白表达和定位的影响 被引量:4 2020年 目的本研究旨在探究柯萨奇病毒A组16型(Coxsackievirus A 16,CVA16)感染后是否会影响N6-甲基腺嘌呤(N6-methyladenosine,m6A)甲基化相关蛋白在人呼吸道上皮细胞(16HBE)、ICR乳鼠和SCARB2人源化小鼠中的表达,以及在细胞中的定位。方法病毒分别以感染复数(MOI)=0.1感染16HBE和107 CCID50/ml感染小鼠,Western blot分析甲基转移酶、去甲基化酶和甲基化阅读蛋白的表达变化,免疫荧光观察这些蛋白质在细胞中的定位。结果研究结果发现,随着CVA16病毒感染时间的增加,m6A甲基化相关蛋白在细胞中表达水平逐渐下调,在ICR乳鼠和SCARB2小鼠中无明显变化;病毒感染后,m6A甲基化相关蛋白在细胞核与细胞质中重新分布,甚至发生降解。结论CVA16在宿主细胞中复制时可以改变m6A甲基化修饰相关蛋白的表达和细胞定位。本研究结果提示m6A修饰可能是肠道病毒治疗的潜在新靶点。 李卫宇 蒋曦 郑雪麟 朱文兵 刘卓航 李慧 张雪梅 吴忠香 宋杰 董少忠广谱中和抗EV71、CA16、CA10和CA6人-鼠嵌合IgM型单克隆抗体及应用 本发明涉及一种广谱中和抗EV71、CA16、CA10和CA6人‑鼠嵌合IgM型单克隆抗体及应用,属于生物技术领域。该抗体包括重链可变区和轻链可变区,其所述重链可变区的氨基酸序列如序列表中SEQ ID NO.1所示,所述轻... 董少忠 朱文兵 蒋曦 李卫宇 郑雪麟 刘卓航 张雪梅 徐婧雯 吴忠香 宋杰 李慧 孙明 马绍辉基因遗传变异和消化系统肿瘤遗传易感性相关关系研究 张志 张雪梅 宋文广 王瑞林 杨照环 陈红 刘静 该研究密切结合中国恶性肿瘤防治实际,和肿瘤研究的前沿方向,以RFLP-PCR方法结合直接测序方法研究了炎症通路基因COX2,LOX12,TNF和DNA修复基因ADPRT和XRCC1功能性遗传变异的情况,评价了其与食管癌和...关键词:关键词:恶性肿瘤防治 消化道肿瘤 食管癌 着色性干皮病G组基因多态性与喉癌和喉咽癌风险的相关性 被引量:5 2006年 目的研究DNA修复基因着色性干皮病G组基因(XPG)Asp1104His多态性与喉癌和喉咽癌风险的相关性。方法采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态分析检测175例喉癌或喉咽癌患者和525名无肿瘤正常对照者的XPG基因型,采用多因素logistic回归模型计算各基因型携带者患喉癌和喉咽癌的风险及各基因型对肿瘤病理分级的影响。结果与Asp/Asp基因型比较,XPG1104Asp/His杂合型增加喉癌的发病风险(OR=2.46;95%CI=1.15~5.24,P<0.05),但不影响喉咽癌的发病风险(OR=1.36;95%CI=0.87~2.12,P>0.05);杂合基因型Asp/His增加高分化鳞状细胞癌的发病风险(OR=1.88;95%CI=1.05~3.40,P<0.05)。结论DNA修复基因XPG1104Asp/His多态性与喉癌的发病风险相关。 温树信 唐平章 张雪梅 赵丹 郭永丽 谭文 林东昕关键词:喉癌 喉咽癌 遗传易感性 多态性 树鼩CD4及IL-6分子的克隆及分析 2015年 目的克隆野生型中缅树鼩的CD4及IL-6分子,并分析其核苷酸、氨基酸序列的多态性及重要的功能位点。方法经野生型树鼩尾静脉采血,分离外周血单核淋巴细胞,经植物血球凝集素(phytohemagglutinin,PHA)刺激24 h后,提取细胞总RNA,以其为模板,进行RT-PCR扩增,扩增产物插入p MD-19T载体,提取阳性重组质粒,经双酶切鉴定及测序;采用Lasergene分析目的基因核苷酸及氨基酸序列,并构建进化树,分析野生型树鼩与已知中缅树鼩的亲缘关系。结果野生型树鼩CD4全长编码序列的开放阅读框长度为1 365 bp,编码454个氨基酸,IL-6全长编码序列的开放阅读框为627 bp,编码208个氨基酸,22只野生型树鼩成功克隆出CD4分子,23只野生型树鼩成功克隆出IL-6分子。不同野生型中缅树鼩的CD4及IL-6分子有不同程度的核苷酸和氨基酸位点的突变,但分别有35%和26.7%的碱基突变为同义突变,且发生非同义突变的位点对树鼩CD4和IL-6分子重要的功能位点无影响。由CD4核苷酸及氨基酸序列构建的系统进化树基本一致;由IL-6核苷酸及氨基酸序列构建的系统进化树中,23只野生树鼩分为2个分支。结论 CD4和IL-6分子具有重要功能的氨基酸位点是保守稳定的,为今后树鼩CD4和IL-6单克隆抗体的制备及树鼩实验动物模型的建立奠定了基础。 任芳芳 徐婧雯 张雪梅 吴忠香 马娜 卢孔杰 董少忠关键词:树鼩 CD4 IL-6 克隆 系统进化树 预测并验证HSV-Ⅰ基因组编码一个新的microRNA microRNA(miRNA),即微小 RNA,是一类长约22个核苷酸的小分子非编码 RNA,通常与靶基因 mRNA 的3’UTR 发生不完全互补,在转录后水平调节基因的表达。近几年的研究表明,这是一种高度保守的、广泛存... 张雪梅 洪敏 张莹 郭磊 刘龙丁 李琦涵文献传递 环氧化酶-2和脂氧合酶-12基因多态与大肠癌发病风险以及进展关系的研究 目的:环氧化酶-2(COX-2)和脂氧合酶-12(12- LOX)是参与花生四烯酸转化成前列腺素的关键酶,研究发现 COX-2过表达发生在癌变多个阶段,在肿瘤的发生和发展过程中起非常重要的作用。12-LOX过度表达与多种... 谭文 吴健雄 张雪梅 郭永丽 刘俊鸟 孙瞳 张柏林 赵丹 杨明 于典科 林东昕关键词:环氧化酶-2 遗传多态 大肠癌 文献传递 医学院校巴基斯坦留学生生物化学理论教学改革 2013年 通过近5年对留学生教学实践的总结,探讨了留学生教学模式和方法,就留学生教学方法和教学手段以及教学评价的改革等方面进行了分析,为今后留学生生物化学教学的改革和发展提供可借鉴的思路与方法. 林佳 曹蕾 何冰 张雪梅 崔和勤关键词:生物化学 教学方法 留学生 STK15基因单核苷酸多态与大肠癌风险 被引量:7 2006年 目的探讨STK15Phe31Ile基因单核苷酸多态与大肠癌风险的关系。方法以聚合酶链反应(PCR)和限制性片段长度多态性(RFLP)分析方法,检测了283例大肠癌患者和283例配对的正常对照者STK15Phe31Ile基因型,比较不同基因型与大肠癌发生和发展的关系。结果STK15Ile/Ile基因型频率在大肠癌患者和正常对照中的分布差异有统计学意义(50.2%∶36.8%;P=0.02)。携带STK15Ile/Ile基因型者罹患大肠癌的风险比携带STK15Phe/Phe基因型者增加92.0%(95%CI=1.13~3.27),此种风险增高在年轻患者中更加显著(OR=2.57;95%CI=1.07~6.17)。未发现STK15Phe31Ile基因多态与大肠癌转移风险相关。结论STK15Phe31Ile多态可能是大肠癌的遗传易感因素。 张雯杰 缪小平 孙瞳 张雪梅 曲世宁 谭文 熊萍 郑容 林东昕关键词:结直肠肿瘤 分子遗传学 单核苷酸 GⅡ.4型人诺如病毒VP1蛋白单克隆抗体的制备及鉴定 被引量:2 2020年 目的制备抗GⅡ.4型人诺如病毒(human norovirus,HuNoV)衣壳蛋白VP1单克隆抗体,并鉴定其生物学特性。方法PCR扩增GⅡ.4型HuNoV VP1基因序列,将其插入至原核表达载体pGEX-5X-1中,构建重组质粒p GEX-5X-1-VP1,转化至E.coli BL21,经IPTG诱导表达,并通过亲和层析纯化获得重组蛋白GST-VP1。利用杂交瘤技术将小鼠骨髓瘤细胞SP2/0与经GST-VP1抗原免疫的BALB/c小鼠的脾细胞进行融合,通过间接ELISA法筛选出阳性杂交瘤细胞株,制备单克隆抗体,并进行纯化。采用间接ELISA法、Biacore法和Western blot法分别检测单克隆抗体的效价、亲和力及特异性。结果经菌落PCR及测序鉴定,重组质粒pGEX-5X-1-VP1构建正确。重组蛋白GST-VP1相对分子质量约85000,大部分以可溶形式存在,纯化后浓度为1.100 mg/mL。筛选获得3株能分泌GⅡ.4型HuNoV VP1单克隆抗体的杂交瘤细胞株,命名为NoV C1、NoV D9和NoV H6,效价均可达1∶10^7以上,亲和力常数KD(M)分别为4.422×10^-7、4.303×10^-8、7.540×10^-7 mol/L,均可与HuNoV VP1天然蛋白及GST-VP1重组蛋白发生特异性结合。结论利用原核表达系统成功表达了GST-VP1蛋白,并通过杂交瘤技术制备了高效价的GⅡ.4型HuNoV VP1特异性单克隆抗体,为GⅡ.4型HuNoV免疫诊断和疫苗的研发奠定了基础。 李慧 徐靖雯 张雪梅 吴忠香 朱文兵 蒋曦 李卫宇 宋杰 董少忠关键词:诺如病毒 衣壳蛋白 基因重组 原核表达 单克隆抗体