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方永军: 作品数：67 被引量：81H指数：5; 供职机构：中国热带农业科学院橡胶研究所更多>>; 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划海南省自然科学基金更多>>; 相关领域：农业科学医药卫生生物学经济管理更多>>

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橡胶树花青素合成调控因子HbAn1的克隆及其功能分析被引量：2: 2017年; 橡胶树转基因过程筛选效率低阻碍了转基因研究快速发展。花青素累积产生的紫红色肉眼直接可辨,是一种简单、安全的可视化筛选标记。为利用橡胶树花青素作为转基因筛选标记,本文首先以R2R3-MYB保守结构域(R2、R3)为探针调取橡胶树R2R3-MYB,并与拟南芥等其他物种花青素合成相关的R2R3-MYB进行进化分析,结果显示橡胶树scaffold0374_923317和Scaffold0598_393375与其他物种已功能验证的花青素合成调控R2R3-MYB聚到同一亚类。随后从古铜期叶片中克隆到scaffold0374_923317基因,并将其命名为HbAn1。序列分析表明,HbAn1蛋白具有R2R3-MYB蛋白的典型结构:R2R3结构域及b HLH互作结构域。定量表达分析表明HbAn1在古铜期叶片及暗培养茎秆中高水平表达,在其他时期叶片及光照培养茎秆中表达水平很低,与不同组织花青素含量正相关。最后,在烟草中组成型过表达HbAn1,使烟草叶片、花瓣、花托、花丝等组织大量累积花青素,定量分析表明其激活了这些组织后期花青素合成酶基因Nt DFR,Nt LDOX,Nt UFGT。本文首次获得橡胶树花青素累积相关的正调控因子R2R3-MYB(HbAn1),这为花青素作为橡胶树转基因可视化筛选标记提供了基因资源。; 黄天带方永军畅姣陈涛辛士超Naychi Koko黄华孙华玉伟; 关键词：橡胶树花青素结构域

六点始叶螨内参基因筛选及其在超氧化物歧化酶基因EsSOD表达分析中的应用: 2021年; 为了筛选稳定内参基因分析六点始叶螨超氧化物歧化酶基因EsSOD的表达量,本研究采用geNorm、Bestkeeper、Normfinder和RefFinder软件分析6个候选内参基因actin、gapdh、rpl13、α-tub、β-tub和18sRNA在六点始叶螨幼螨、前若螨、后若螨和雌成螨中的表达稳定性。结果表明,根据geNorm软件分析得出6个候选内参引物的稳定性从大到小的排序为:actin>β-tub>rpl13>α-tub>gapdh>18sRNA;根据NormFinder软件分析得出的稳定性从大到小的排序为:rpl13>β-tub>actin>α-tub>18sRNA>gapdh;根据BestKeeper软件分析得出的稳定性从大到小的排序为:β-tub>rpl13>actin>gapdh>α-tub>18sRNA;最终根据RefFinder软件的综合分析结果,actin和β-tub是稳定性最佳的2个内参引物。分别以actin和β-tub为内参进行EsSOD基因表达量的RT-qPCR分析,结果表明,与取食感螨橡胶树种质‘IAN2904’后EsSOD表达量相比,不同龄期六点始叶螨取食抗螨橡胶树种质‘IRCI12’后EsSOD表达量均降低。本研究获得了可用于六点始叶螨EsSOD表达量分析的稳定内参引物,为橡胶树种质抗螨性分子机理研究奠定了理论基础。; 梁晓梁晓陈青方永军; 关键词：六点始叶螨内参基因基因表达

一种依赖焦磷酸的磷酸果糖激酶及其编码基因的应用: 本发明公开了一种依赖焦磷酸的磷酸果糖激酶及其编码基因与应用。该蛋白是具有下述氨基酸残基序列之一的蛋白质：1）序列表中的SEQ ID№.1的氨基酸残基序列；2）将序列表中的SEQ ID№.1氨基酸残基序列经过一个或几个氨基...; 龙翔宇唐朝荣戚继艳阳江华方永军秦云霞; 文献传递

巴西橡胶树SnRK1家族基因的克隆与表达分析: 2017年; 蔗糖非酵解型蛋白激酶I(Sn RK1)是植物糖信号途径的关键因子,广泛参与植物生长发育。以蓖麻Sn RK1基因序列为探针,采用同源克隆的方法获得了橡胶树Sn RK1家族2个基因的全长c DNA,分别命名为Hb Sn RK1-1(KX237690.1)和Hb Sn RK1-2(KX237691.1)。2个Hb Sn RK1基因均编码含515个氨基酸且序列高度一致(96.5%)的蛋白质;2个基因均含10个外显子、9个内含子,且外显子大小相近,但基因长度差异明显。在6种橡胶树组织中,2个Hb Sn RK1基因均有表达,但Hb Sn RK1-1在胶乳(产胶细胞乳管的细胞质)中的表达量明显高于Hb Sn RK1-2;在叶片发育不同时期,Hb Sn RK1-1的表达变化不显著,而Hb Sn RK1-2的表达随叶片发育明显下降;在胶乳中,Hb Sn RK1-1的表达显著受乙烯和茉莉酸诱导、受2,4-D抑制,但Hb Sn RK1-2表达受激素处理的影响较小,推测Hb Sn RK1可能参与胶乳再生的激素调控。; 王闯周斌辉方永军唐朝荣; 关键词：橡胶树克隆生物信息学

橡胶树胶乳4个HbRab基因的克隆和表达分析被引量：1: 2013年; 克隆了橡胶树胶乳中表达的4个Rab基因的全长cDNA，命名为HbRab5-HbRab8。它们编码22～24kDa的蛋白，均具有小G蛋白家族共有的GTP／GDP结合保守结构域，分别属于植物Rab家族的F、D、A和B亚家族成员。组织表达分析显示，除HbRab69外，其他3个HbRab6基因均在胶乳中表达丰度最高。在胶乳中，伤害处理显著下调HbRab6表达而上调HbRab7表达：乙烯和水杨酸处理下调HbRab6和HbRab8的表达，甲基茉莉酸处理上调HbRab5、HbRab7、HbRab8的表达，细胞分裂素上调HbRab5的表达。本文结果为橡胶树胶乳再生相关Rab基因的筛选与功能阐述奠定了基础。; 唐朝荣秦云霞黄亚成方永军; 关键词：橡胶树 RAB 基因克隆

HbCS4基因在提高原核表达菌生长速率、研究橡胶树产胶能力中的应用: 本发明提供了HbCS4基因在提高原核表达菌生长速率、研究橡胶树产胶能力中的应用、以及携带HbCS4基因的重组体和重组大肠杆菌。HbCS4基因转入原核表达菌株后，能够显著提高菌株在正常及重金属胁迫下培养条件下的生长速率，在...; 龙翔宇方永军唐朝荣戚继艳黄亚成何斌; 文献传递

橡胶树果糖-1,6-双磷酸酯酶基因的克隆及表达特性分析被引量：2: 2013年; 果糖-1,6-双磷酸酯酶(FBPase)是糖异生途径中的关键酶,在糖代谢中起重要作用。本研究首次从橡胶树中克隆并获得胞质型HbFBPase基因,其全长cDNA序列1541 bp,包含一个1017 bp的开放阅读框,编码一个由338个氨基酸残基组成的蛋白质。氨基酸同源性分析发现,该蛋白含有保守的FBPase活性位点、腺嘌呤核糖核苷酸(AMP)结合位点及金属离子结合位点。生物信息学分析显示,HbFBPase蛋白无导肽酶切位点,不具有跨膜结构域,且为亲水蛋白,推测该蛋白可能在细胞质中发挥作用。实时荧光定量PCR分析表明,HbFBPase基因在叶中高表达,胶乳及种子次之。进一步分析HbFBPase基因在非光合库组织胶乳(产胶细胞的细胞质)中的表达模式,结果显示该基因表达受割胶、伤害处理调控,推测其在橡胶树胶乳糖代谢中发挥重要的调控作用,参与了橡胶烃的生物合成调控。此外,HbFBPase基因表达受多种植物激素如乙烯(ET)、脱落酸(ABA)、茉莉酸(JA)、植物生长素(2,4-D)、水杨酸(SA)及赤霉素(GA)的调控。本研究初步揭示HbFBPase是橡胶树胶乳糖异生作用的关键酶,是胶乳糖酵解及橡胶合成的负调控因子,为探讨胶乳糖异生与橡胶烃合成之间的关系提供理论基础,有助于进一步了解胶乳糖代谢的调控机理。; 龙翔宇曹冰梁启福方永军戚继艳唐朝荣; 关键词：橡胶树基因克隆生物信息学分析

一株哈茨木霉菌株及其应用: 本发明公开了一株哈茨木霉及其应用。该木霉菌株为哈茨木霉(Trichoderma harzianum)Hb13‑3‑2 CGMCC No.13163。该菌株及其代谢产物具有广谱抑制病原真菌活性，对峙生长实验表明，该木霉菌株...; 秦云霞阳江华唐朝荣肖小虎龙翔宇方永军戚继艳; 文献传递

橡胶树‘热研7-33-97’和‘PR107’胶乳和树皮中蔗糖代谢相关的酶活与基因表达研究: 2021年; 对2个产胶水平差异明显的橡胶树品种(‘热研7-33-97’和‘PR107’)产胶旺季时2个与产胶直接相关的碳库(胶乳和茎干树皮)中蔗糖代谢相关的酶活、基因表达以及胶乳生理参数、树皮非结构性碳水化合物(NSC)含量进行了比较研究。结果表明:‘PR107’干胶产量的季节性变动明显大于‘热研7-33-97’,但均在9月底出现一个产胶高峰;2个品种胶乳的总固形物、无机磷和蔗糖含量差异不明显,但‘热研7-33-97’的干胶含量显著高于‘PR107’;树皮NSC的主要成分为可溶性糖(占80%以上),但品种间的NSC及其相关组分(淀粉、可溶性糖和还原性糖)的差异均不显著;胶乳中,蔗糖合成酶(Sus)主要催化蔗糖合成,品种间的中碱性转化酶(NIN)和Sus酶活差异均不显著;树皮中,‘热研7-33-97’的NIN酶活显著大于‘PR107’,而其他蔗糖代谢相关酶活品种间的差异不显著;在胶乳中,HbSWEET10a基因的表达量高,并且‘热研7-33-97’>‘PR107’,还是唯一在品种间表达显著差异的蔗糖代谢相关基因;在树皮中,‘PR107’的HbSus3和细胞壁转化酶基因HbCIN2的表达显著高于‘热研7-33-97’,HbSUT5显著低于‘热研7-33-97’,而其他4个蔗糖代谢相关基因的表达在品种间差异不显著。本研究结果为深入探究蔗糖代谢调控与胶乳再生的互作奠定了基础。; 刘晓东王艺玮肖小虎朱芳玉刘星莫春演方永军唐朝荣; 关键词：橡胶树蔗糖代谢酶活

HbCS3基因在提高原核表达菌生长速率、研究橡胶树抗逆境胁迫和产胶能力中的应用: 本发明提供了HbCS3基因在提高原核表达菌生长速率、研究橡胶树抗逆境胁迫和产胶能力中的应用、以及携带HbCS3基因的重组体和重组大肠杆菌。HbCS3基因转入原核表达菌株后，能够显著提高菌株在正常及重金属胁迫下培养条件下的...; 龙翔宇方永军唐朝荣戚继艳黄亚成何斌; 文献传递

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