施宇光
- 作品数：11 被引量：7H指数：1
- 供职机构：哈尔滨医科大学附属第二医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金黑龙江省自然科学基金黑龙江省教育厅科学技术研究项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 胰岛素抵抗的慢性丙型肝炎患者外周血及肝组织内源性大麻素系统的变化被引量：3
- 2014年
- 目的研究胰岛素抵抗(IR)的慢性丙型肝炎(CHC)患者外周血及肝组织内源性大麻素系统的变化。方法采用高效液相色谱-质谱联用技术检测CHC患者和CHC合并IR患者外周血内源性大麻素花生四烯酸乙醇胺(AEA)和花生四烯酰甘油(2-AG)水平,应用RT-PCR及Western印迹检测肝组织大麻素受体1(CB1R)及脂肪酸酰胺水解酶(FAAH)的表达,数据行t检验。结果与CHC患者相比,CHC合并IR患者外周血AEA水平升高[(6.80±1.70)pmol/mL比(3.88±0.63)pmol/mL,t=8.053,P<0.01];肝组织CB1R mRNA水平(1.7±0.4比1.0±0.2,t=4.696,P<0.01)和CB1R蛋白水平(0.8±0.2比0.4±0.1,t=5.367,P<0.01)增加;FAAH mRNA水平(0.5±0.1比1.0±0.3,t=4.743,P<0.01)和FAAH蛋白水平(0.5±0.1比0.8±0.3,t=2.846,P<0.01)下降。与胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)<4的患者相比,HOMA-IR指数≥4的患者AEA水平升高[(7.53±1.85)pmol/mL比(5.56±1.40)pmol/mL(t=2.986,P<0.05)];肝组织CB1 mRNA水平(2.3±0.65比1.4±0.35,t=2.986,P<0.05)和CB1R蛋白水平(1.2±0.3比0.9±0.2,t=2.038,P<0.05)升高,FAAH mRNA水平(0.3±0.08比0.6±0.15,t=4.076,P<0.01)和FAAH蛋白水平(0.2±0.05比0.4±0.1,t=3.464,P<0.05)下降。结论随着IR程度加重,CHC患者外周血AEA水平升高;肝组织CB1R表达增加而FAAH表达减少。
- 孙丽杰万琳张晓宇施宇光周洪波陈墨洋于建武
- 关键词：慢性丙型肝炎胰岛素抵抗内源性大麻素大麻素受体1
- 血清氨基酸水平与间充质干细胞移植治疗心肌梗死疗效的相关性探讨
- 2015年
- 目的探讨血清中氨基酸的含量变化和心脏功能的关系并用其评价间充质干细胞(MSC)移植治疗心肌梗死疗效。方法冠状动脉结扎制造大鼠心肌梗死模型,分为生理盐水对照组及20岁以下人MSC细胞治疗组,并于结扎同时分别在心肌梗死区域多点注射MSC细胞(1×107/只);1周后,用小动物超声仪检测射血分数(EF)、短轴缩短率(FS)等心功能指标。并于腹主动脉采血,取血清进行高效液相色谱质谱法测定甘氨酸等17种氨基酸含量。结果 1周后细胞移植组心功能均明显优于模型组(P<0.05)。模型组血清中17种氨基酸含量均明显高于正常组(P<0.05)。MSC移植组1周血清中16种氨基酸含量(除半胱氨酸外)明显低于模型组(P<0.05或P<0.01);但是半胱氨酸的含量明显高于模型组(P<0.05)。且发现组氨酸含量与模型组心功能指标呈显著负相关(P<0.05),半胱氨酸含量与细胞治疗组心功能指标呈显著负相关(P<0.05)。结论血清中氨基酸含量变化与MSC移植治疗心肌梗死疗效具有一定的相关性;支链氨基酸的显著性回落,提示MCS修复受损心肌侧重于增强内源性治疗的机会。但半胱氨酸的持续升高预示着氧化还原平衡状态的破坏需要长时间的恢复。17种氨基酸的特征性组合模式可能为MSC移植治疗心肌梗死疗效及机制提供新的思路。
- 施宇光金茜赵冬梅李兴库陈威范明田海刘伟
- 关键词：间质干细胞氨基酸类心肌梗死
- 丙型肝炎病毒核心蛋白活化内源性大麻素系统诱导不完全线粒体自噬
- 2018年
- 目的研究丙型肝炎病毒(HCV)核心蛋白活化内源性大麻素系统诱导不完全线粒体自噬的机制。方法HepG2细胞或表达HCV核心蛋白的HepG2细胞与肝星状细胞(LX-2细胞)共培养。共培养后高效液相色谱-质谱联用技术检测2-AG水平,分光光度法测定检测线粒体呼吸链酶复合体活性,流式细胞仪检测细胞活性氧(ROS)水平,激光共聚焦显微镜检测Ca^(2+)浓度和线粒体膜电位,试剂盒检测线粒体丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)含量,蛋白质免疫检测大麻素受体1(CB1R)、蛋白激酶B(Akt)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、微管相关蛋白1轻链3-Ⅱ(LC3-Ⅱ)和p62蛋白表达。计量资料采用t检验。结果与LX-2细胞和HepG2细胞共培养组相比,LX-2细胞和表达HCV核心蛋白HepG2细胞共培养组,2-AG水平增加,线粒体呼吸链酶复合体活性下降,ROS水平和Ca^(2+)浓度升高,线粒体膜电位下降,MDA升高而SOD下降,CB1R水平升高,p-Akt和p-mTOR表达下降,LC3-Ⅱ表达增加,而p62蛋白表达无明显差异。结论 HCV核心蛋白增加2-AG水平,上调CB1R表达;增加线粒体ROS水平和Ca^(2+)浓度,降低线粒体膜电位;下调Akt和mTOR活性引起不完全线粒体自噬。
- 孙丽杰施宇光张晓宇舒梦妮陈墨洋于建武
- 关键词：丙型肝炎病毒核心蛋白内源性大麻素系统
- 脂滴自噬在丙型肝炎病毒核心蛋白下调沉默信息调节因子1诱导小鼠肝脂肪变性中的作用被引量：1
- 2017年
- 目的研究脂滴自噬在HCV核心蛋白下调沉默信息调节因子1(SIRT1)诱导小鼠肝脂肪变性中的作用。方法小鼠随机分为两组,每组10只。实验组小鼠尾静脉注射HCV core重组表达载体。对照组小鼠尾静脉注射磷酸盐缓冲溶液。1个月后处死小鼠。检测肝功能、脂联素、血清和肝内甘油三酰(TG)、肝脏组织病理学检查肝脂肪变性程度。蛋白质免疫法检测肝脏SIRT1蛋白、脂联素受体(AdipoR)蛋白以及脂滴自噬相关蛋白微管相关蛋白1轻链3-Ⅱ(LC3-Ⅱ)、脂肪分化相关蛋白(ADRP)、尾部作用蛋白(TIP-47)和P62蛋白的表达。计量资料采用t检验。结果与对照组相比,HCV组小鼠出现肝脂肪变性;肝脏TG含量明显增加[(80.9±20.1)比(45.8±10.5)μg/mg,t=4.964,P<0.01];血清脂联素[(1.05±0.25)比(1.41±0.45)ng/mL,t=2.211,P<0.05]水平下降;SIRT1蛋白水平(0.4±0.1比0.9±0.2,t=7.071,P<0.01)和AdipoR2蛋白水平(0.4±0.1比0.8±0.2,t=5.656,P<0.01)下降;LC3-Ⅱ蛋白(0.8±0.2比0.4±0.1,t=5.656,P<0.01)、TIP-47蛋白(0.9±0.3比0.4±0.1,t=5.000,P<0.01)和ADRP蛋白(0.8±0.3比0.4±0.1,t=4.000,P<0.01)表达增加;而p62蛋白(0.7±0.2比0.8±0.3,t=0.877,P>0.05)表达水平差异无统计学意义。结论 HCV核心蛋白下调SIRT1表达,下调脂联素及受体表达,引起不完全脂滴自噬导致肝脂肪变性。
- 孙丽杰施宇光张晓宇舒梦妮陈墨洋于建武
- 关键词：丙型肝炎病毒核心蛋白
- 丙型肝炎病毒核心蛋白下调沉默信息调节因子1导致肝窦内皮细胞功能障碍被引量：1
- 2017年
- 目的研究丙型肝炎病毒(HCV)核心蛋白对肝窦内皮细胞(LSEC)沉默信息调节因子1(SIRT1)表达及LSEC功能的影响。方法 HepG2细胞或表达HCV核心蛋白的HepG2细胞与LSEC共培养。应用液体闪烁计数仪、实时荧光定量-PCR(RT-PCR)、Western印迹检测LSEC SIRT1活性、mRNA和蛋白的表达,以及LSEC脂联素受体2(AdipoR2)、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)、第Ⅷ相关抗原(Von Willebrand factor,vWf)、分化抗原簇31(CD31)、血管内皮细胞生长因子(VEGF)和CD14蛋白的表达。应用流式细胞仪检测细胞活性氧(ROS)水平,检测共培养上清液中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、脂联素、一氧化氮(NO)和内皮素-1(ET-1)的水平。计量资料采用t检验。结果与LSEC和HepG2细胞共培养组相比,LSEC和表达HCV核心蛋白HepG2细胞共培养组SIRT1活性(0.3±0.1比1.0±0.3,t=5.422,P<0.01)、mRNA(0.4±0.1比1.0±0.2,t=6.573,P<0.01)和蛋白(0.3±0.08比1.0±0.3,t=5.613,P<0.01)水平下降;脂联素[(3.41±0.61)比(5.82±0.87)μg/mL,t=5.556,P<0.01]分泌减少且AdipoR2蛋白(0.3±0.1比0.8±0.2,t=5.477,P<0.01)表达下降;eNOS蛋白(0.4±0.1比0.9±0.3,t=3.873,P<0.01)表达下降;vWf蛋白(0.8±0.3比0.4±0.1,t=3.098,P<0.01)、CD31蛋白(0.9±0.2比0.3±0.1,t=6.573,P<0.01)、VEGF蛋白(0.9±0.3比0.5±0.1,t=3.873,P<0.01)表达增加;CD14蛋白(0.4±0.1比0.9±0.3,t=3.873,P<0.01)表达下降。共培养上清液中NO和SOD水平下降,ET-1和MDA水平升高。结论 HCV核心蛋白下调SIRT1活性及表达,下调脂联素及受体表达,引起LSEC收缩和肝窦毛细血管化,增加氧化应激反应,导致肝窦微循环障碍。
- 孙丽杰施宇光张晓宇舒梦妮陈墨洋于建武
- 关键词：丙型肝炎病毒核心蛋白肝窦内皮细胞
- 丙型肝炎病毒核心蛋白下调沉默信息调节因子1导致肝星状细胞活化
- 2017年
- 目的研究丙型肝炎病毒(HCV)核心蛋白对肝星状细胞沉默信息调节因子1(SIRT1)表达及肝星状细胞活化的影响。方法 HepG2细胞或表达HCV核心蛋白的HepG2细胞与肝星状细胞(LX-2细胞)共培养。应用液体闪烁计数仪、实时荧光定量-PCR、Western印迹检测LX-2细胞SIRT1活性、mRNA及蛋白的表达。Western印迹检测LX-2细胞磷酸化AMP激活的蛋白激酶(p-AMPK)、脂联素受体2(AdipoR2)、转化生长因子-β1(TGF-β1)蛋白的表达。ELISA法检测共培养上清液中人Ⅳ胶原(ColⅣ)、Ⅲ型前胶原肽(PⅢNP)、透明质酸(HA)和人层黏连蛋白(LN)的水平。计量资料采用t检验。结果与LX-2细胞和HepG2细胞共培养组相比,LX-2细胞和表达HCV核心蛋白HepG2细胞共培养组SIRT1活性(0.4±0.1比1.0±0.2,t=6.573,P<0.01)、mRNA(0.3±0.1比1.0±0.3,t=5.422,P<0.01)和蛋白(0.4±0.1比0.8±0.2,t=4.382,P<0.01)水平下降;p-AMPK(0.3±0.1比0.8±0.2,t=5.477,P<0.01)和AdipoR2(0.4±0.1比0.8±0.2,t=4.382,P<0.01)表达下降;TGF-β1(2.3±0.5比0.8±0.2,t=6.823,P<0.01)表达增加;共培养上清液中ColⅣ、PⅢNP、HA和LN的水平增加。SIRT1激动剂白藜芦醇降低TGF-β1的表达。结论 HCV核心蛋白下调肝星状细胞SIRT1活性及表达,下调AdipoR2表达,上调TGF-βl表达,活化肝星状细胞。
- 孙丽杰施宇光张晓宇舒梦妮陈墨洋于建武
- 关键词：丙型肝炎病毒核心蛋白肝星状细胞脂联素受体
- Hsp70-p53合成肽修饰树突状细胞诱导细胞免疫应答的研究
- 目的:研究Hsp70-p53合成肽复合物修饰的树突状细胞(DC)诱导的细胞免疫应答。方法:人工合成p53蛋白多肽,在体外与热休克蛋白Hsp70结合形成Hsp70-p53合成肽复合物后,修饰DC,以肿瘤细胞抗原肽作对照,刺...
- 刘伟施宇光金茜赵冬梅李兴库刘伟
- 关键词：树突状细胞抗瘤免疫
- 端粒长度及端粒酶活性与儿童先天性心脏病发病机制的相关性研究被引量：1
- 2013年
- 目的:探讨不同年龄儿童外周血白细胞端粒长度及端粒酶活性与儿童先心病发病机制的相关性。方法:采用实时荧光定量PCR检测先天性心脏病2个年龄组及健康受试者外周血白细胞的端粒长度及hTERT mRNA(端粒酶催化亚基)。比较相同年龄的先天性心脏病与健康受试者外周血白细胞的端粒长度及hTERT mRNA差异,并比较不同年龄组间外周血白细胞的端粒长度及hTERT mRNA差异。结果:先天性心脏组3-6岁组的受检者及健康受试者3-6岁组平均外周血白细胞端粒(1.63±0.61)长于先天性心脏组7-10岁组的受检者及健康受试者7-10岁组(1.36±0.46)(t=11.37,P<0.05);各组均无端粒酶表达。结论:外周血白细胞的端粒长度随着年龄的增长而缩短。端粒酶活性与先天性心脏病发病并无直接相关性。
- 施宇光张淑云赵冬梅杜博金茜刘真李兴库刘伟任敬远
- 关键词：端粒长度端粒酶活性实时荧光定量PCR
- 拉米夫定耐药变异株在急性HBV感染者中的流行调查
- 2009年
- 目的:调查YMDD变异株在急性HBV感染(AHB)中的流行情况,为指导AHB的防治提供依据.方法:收集HBV感染者321例(HBV DNA≥1.0×107copies/L),其中未开始治疗的AHB患者100例和拉米夫定治疗(100mg/d)不同时期的CHB患者221例.采集外周血标本,用荧光标记杂交双探针PCR融解曲线法(FH-PCR-MC)检测血清HBV YMDD及其变异,统计分析HBV YMDD变异在两组中的分布.结果:在AHB组,只检出HBV YMDD野生型,未检出变异型.而在CHB组,YMDD变异检出率为63.4%,其中YIDD占52.1%,YVDD占37.9%,YIDD+YVDD混合变异占10.0%;1年内、1-2年、2-3年、3-4年和4年以上疗程YMDD变异率分别为45%,66%,77%,75%和40%,YMDD变异检出率在两组中差异显著(χ2=112.3,P=0.00).结论:目前在用拉米夫定治疗的CHB患者中仍有较高比率的YMDD变异株存在,但尚未发现该变异株在AHB患者中流行.
- 李兴库周志红金茜杜博施宇光房绍红刘伟张淑云
- 关键词：乙型肝炎病毒急性乙型肝炎拉米夫定YMDD变异聚合酶链反应
