李丽娟
- 作品数：5 被引量：15H指数：2
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- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 一种改良的水稻细胞质基因组制备方法被引量：1
- 2011年
- 水稻叶绿体和线粒体基因组较小,且均被测序清楚,可以作为研究细胞质遗传的良好材料,而如何快速有效地分离纯化获得高产量和高质量的细胞质基因组是从DNA水平上研究细胞质遗传变异的前提条件。本研究结合了蔗糖密度梯度离心法-全基因组DNA扩增法(whole genome amplification,WGA),对细胞质基因组的制备进行了改良。改良后的方法仅使用20 g的水稻叶片,即可在2 d时间内得到浓度达300 ng/μL以上,总量达40μg以上的高纯度(OD260/280值为1.8～2.0)、完整的叶绿体DNA(chloroplast DNA,cpDNA)和线粒体DNA(mitochondrial DNA,mtDNA)。该法制备的细胞质基因组可以满足多种细胞质基因组实验的要求,包括Solexa全基因组测序技术的要求。
- 万雯婷董扬于洋李丽娟张静李琼王荔胡凤益
- 关键词：水稻叶绿体DNA线粒体DNA
- CTAB法用于染病烟草植株中烟草丛顶病毒RNA的提取被引量：6
- 2011年
- CTAB法是一种广泛用于从染病植物中提取总核酸,并用于后续相关病原物PCR检测的核酸提取法,已普遍运用于DNA病毒、植原体、细菌、真菌侵染植物的总DNA提取和病原检测。本文尝试将CTAB法用于一种由RNA病毒(烟草丛顶病毒)引起的烟草丛顶病染病组织总核酸的提取,以总核酸进行烟草丛顶病毒的RT-PCR检测,并与常规RNA病毒核酸提取法——Trizol法作比较。结果表明CTAB法和Trizol法提取的核酸用于烟草丛顶病毒RT-PCR检测时,均能扩增到目的条带,检测结果一致。在对复合侵染材料进行检测时发现,CTAB法提取的染病植物组织总核酸既包括DNA也包含RNA,有利于对DNA和RNA病原物同时进行检测;CTAB法所用试剂较Trizol法便宜,毒性小,且提取的核酸量较多、保存时间较长。因此CTAB法是一种高效、简便、经济的从烟草丛顶病染病组织中提取烟草丛顶病毒RNA的方法。
- 左瑞娟周雨泫李丽娟董鹏陈海如李凡
- 关键词：CTAB法TRIZOL法
- 长雄野生稻(Oryza longistaminata)全基因组Fosmid文库构建被引量：2
- 2012年
- 长雄野生稻（0．10ngistaminata）起源于非洲，具有和亚洲栽培稻相同的AA基因组，是栽培稻改良的重要遗传资源。本研究构建了长雄野生稻全基因组fosmid文库，共获得33．6万克隆，文库的平均插入片段大小约为40kb，其中94．7％的克隆插入片段大小在30～50kb之间。挑取其中约11万克隆并保存，可覆盖10倍栽培稻基因组，对任意基因或序列的筛选概率达到了99．99％。将剩余的22万个克隆进行了末端配对测序，显示其有助于长雄野生稻全基因组测序的拼接。所构建的fosmid文库为筛选和克隆长雄野生稻的有利基因提供了研究材料。
- 李丽娟蔡晶张石来王荔胡凤益
- 关键词：FOSMID文库
- 长雄野生稻(Oryza longistaminata)地下茎相关基因的筛选及克隆
- 李丽娟
- 关键词：地下茎相关基因克隆候选基因BAC文库
- 广适应性籼稻愈伤组织诱导培养基的筛选被引量：6
- 2011年
- 相比粳稻而言,籼稻愈伤组织诱导一直没有一种通用的诱导培养基。为了找到适用于籼稻愈伤诱导的通用培养基,以明恢63、IR64、RD23三个籼稻品种的成熟胚为材料,在固定成分(300 mg/L水解酪氨酸蛋白+500 mg/L脯氨酸+250 mg/L谷氨酰胺+30 g/L蔗糖+8 g/L琼脂)和相同的培养条件下,以基本培养基(MB、NB、N6和CC 4种基本培养基)、2,4-D(2.0,3.0,4.0、5.0 mg/L 4种浓度)、6-BA(0,0.2,0.4,0.5 mg/L 4种浓度)为影响因素,利用正交实验设计出16种培养基组合,通过评价愈伤质量和愈伤诱导率来筛选最适合的籼稻愈伤组织诱导培养基。结果表明,2,4-D能提高愈伤诱导率,不用6-BA时愈伤质量最好,基本培养基MB的愈伤诱导效果最好。筛选出的籼稻愈伤诱导通用培养基是MB+2,4-D 5.0 mg/L,在28℃黑暗条件下培养20 d。用筛选出来的通用培养基对不同来源的籼稻品种进行愈伤组织诱导,结果表明该通用培养基对多数籼稻品种具有稳定的愈伤诱导效果。
- 于洋张业胜董扬万雯婷李丽娟张静李琼胡凤益
- 关键词：愈伤组织诱导培养基籼稻
