李善爽 作品数:9 被引量:2 H指数:1 供职机构: 上海交通大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家高技术研究发展计划 更多>> 相关领域: 生物学 农业科学 医药卫生 更多>>
4×Tβ4基因以及在烟草中表达4×Tβ4蛋白的方法 本发明涉及一种4×Tβ4基因以及在烟草中表达4×Tβ4蛋白的方法,该基因的碱基序列如SEQ ID NO.2所示,该方法包括如下步骤:将含有融合基因4×Tβ4的克隆载体质粒进行酶切,回收目标DNA片段,获得带有相应的粘性末... 赵凌侠 王晓磊 李善爽 杨桂华 高美凤文献传递 大肠杆菌表达诺如病毒P粒子生物活性及其超微形态 2013年 诺如病毒(norovirus,NVs)是非细菌性急性胃肠炎的主要病原,严重地威胁着婴幼儿、老年人和公共场所人群的健康。疫苗是目前临床预防由NVs引发急性胃肠炎的主要策略之一。按番茄偏爱密码子设计合成编码诺如病毒(VA387)衣壳蛋白——P粒子基因PGENE(1 002bp),为便于纯化,PGENE的5'端包含编码6×his-tag的DNA序列;构建原核表达载体PET32a-PGENE并导入BL21。在16℃条件下,用终浓度1mmol/L的IPTG(isopropylβ-D-1-thiogalactopyranoside)诱导表达,Ni-NTA树脂亲和层析法纯化获得P粒子,并通过Western blot加以确认;在透射电子显微镜(transmission electron microscopy,TEM)下观察到了球形P粒子成功组装;用该蛋白免疫小鼠,成功获得了活性的抗体血清。为后续用番茄研制口服诺如病毒疫苗奠定了基础。 杨桂华 陈露露 王晓磊 李善爽 赵凌侠关键词:诺如病毒 亚单位疫苗 胸腺素β4四联体基因及其在大肠杆菌中表达的方法 本发明涉及一种胸腺素β4四联体基因及其在大肠杆菌中表达的方法,该基因的碱基序列如SEQ ID NO.1所示,该方法包括以下步骤:将含有所述4×Tβ4基因的克隆载体质粒进行酶切,回收所述4×Tβ4基因的DNA片段,获得带有... 赵凌侠 王晓磊 杨桂华 李善爽 高美凤 赵攀峰 高蕾文献传递 PGENE基因以及在番茄系统中表达PGENE功能蛋白的方法 本发明涉及一种基因工程技术领域的PGENE基因以及在番茄系统中表达PGENE功能蛋白的方法,该基因的碱基序列如SEQIDNO.1所示,该方法包括以下步骤:PGENE基因表达载体的构建;所述包含PGENE基因表达载体的农杆... 赵凌侠 杨桂华 王晓磊 李善爽 高美凤 高蕾 赵攀峰PGENE基因以及在番茄系统中表达PGENE功能蛋白的方法 本发明涉及一种基因工程技术领域的PGENE基因以及在番茄系统中表达PGENE功能蛋白的方法,该基因的碱基序列如SEQ ID NO.1所示,该方法包括以下步骤:PGENE基因表达载体的构建;所述包含PGENE基因表达载体的... 赵凌侠 杨桂华 王晓磊 李善爽 高美凤 高蕾 赵攀峰文献传递 4×Tβ4基因以及在烟草中表达4×Tβ4蛋白的方法 本发明涉及一种4×Tβ4基因以及在烟草中表达4×Tβ4蛋白的方法,该基因的碱基序列如SEQ ID NO.2所示,该方法包括如下步骤:将含有融合基因4×Tβ4的克隆载体质粒进行酶切,回收目标DNA片段,获得带有相应的粘性末... 赵凌侠 王晓磊 李善爽 杨桂华 高美凤番茄E8基因启动子功能域分析及PGENE转化番茄研究 诺如病毒(Norovirus,NV)是导致人类非细菌性急性胃、肠炎的主要病原。疫苗是临床防治诺如病毒疫情爆发的重要手段之一。对比诺如病毒的病毒样颗粒(virus-likeparticles,VLPs)和P颗粒(Ppart... 李善爽关键词:功能域 粘膜免疫 用大肠杆菌(Escherichia coli)表达诺如病毒P粒子 被引量:2 2011年 为了研制番茄口服疫苗,按番茄偏爱密码子设计合成了编码诺如病毒(Norovirus,NVs)VA387毒株P粒子(P particles)基因PGENE(1 039 bp),并在该基因5'端添加了编码His-tag(6×His)的DNA序列。将构建的原核表达载体pMAL-c2-PGENE导入大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3 free),用1 mmol/L的IPTG(Isopropylβ-D-1-thiogalactopyranoside)诱导P粒子在BL21(E.coli)中表达。依据SDS-PAGE胶检测结果,对诱导温度(37℃)和时间(6 h)进行了优化,用Western blot技术证实了重组P粒子特异性和免疫活性,为研制番茄口服NVs(VA387)亚基疫苗-P粒子做了必要的准备。 宋维 李善爽 杨桂华 赵凌侠关键词:诺如病毒 原核表达系统 诺如病毒P粒子基因PGENE及表达诺如病毒P粒子的方法 本发明涉及一种基因工程技术领域的诺如病毒P粒子基因PGENE以及在大肠杆菌中表达诺如病毒P粒子的方法,该基因序列为SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列,并添加六个组氨酸(6×his)标签,在大肠杆菌中表达诺如病毒P粒子... 赵凌侠 杨桂华 王晓磊 李善爽 高美凤 高蕾 赵攀峰文献传递