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两种实时定量PCR方法检测DNA甲基化状态的比较研究: 背景和目的:近年来应用表观遗传学方法研究疾病发病机制的试验越来越多。DNA甲基化是最常见的表观遗传学调控的分子机制。研究DNA甲基化的方法很多,主要分为检测全基因组甲基化状态和单个基因组甲基化状态的分析法。实时定量PCR...; 李遇梅李政亮马红许辉刘莉萍赵建华

系统性红斑狼疮患者外周血CD4^+、CD8^+T细胞p16基因mRNA表达被引量：2: 2010年; 目的:探讨p16基因mRNA在系统性红斑狼疮(SLE)患者CD4^+、CD8^+T细胞中的表达。方法:收集40例确诊的SLE患者(患者组)和30名正常人(对照组)外周血,应用免疫磁珠法分选CD4^+、CD8^+细胞并计数,提取RNA,应用实时定量RT-PCR方法检测外周血CD4^+、CD8^+T细胞中p16基因mRNA表达水平。结果:①p16基因mRNA在CD4^+T细胞中的表达:分别与对照组(2.245±0.586)和SLE非活动期组(1.361±0.154)相比较,SLE活动期组(93.264±42.898)明显增加,差异均具有统计学意义;而非活动期组与对照组之间差异无统计学意义。②p16基因mRNA在CD8^+T细胞中的表达:分别与对照组(4.323±0.735)和非活动期组(3.722±1.701)比较,SLE活动期组(92.926±38.102)明显增加,差异均具有统计学意义;而非活动期组和对照组之间差异无统计学意义。结论:SLE患者p16基因mRNA水平在CD4^+、CD8^+T细胞中增高,提示SLE患者存在p16基因表达异常。; 马红李遇梅李政亮张雪静刘莉萍许辉; 关键词：P16基因红斑狼疮

SLE患者外周血T细胞p16基因启动子甲基化状态及mRNA和蛋白的表达: 目的检测系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血CD4+、CD8+T细胞中p16基因启动子区的甲基化状态及mRNA和蛋白的表达,以及它们的相关性研究。方法采用Taqman探针为基础的实时定量PCR方法检测30例SLE患者外周血...; 李遇梅马红李政亮

SLE患者外周血CD4^＋T淋巴细胞DNA中p16基因启动子区甲基化研究被引量：1: 2010年; 目的检测SLE患者外周血CD4^＋T淋巴细胞DNA中p16基因的甲基化状态及其在SLE发病机制中的作用。方法以Taqman探针为基础的实时定量PCR（Methylight）方法检测28例SLE患者和20例正常人CD4^＋T淋巴细胞中p16基因启动子区甲基化状态。结果SLE患者CD4^＋T淋巴细胞的p16基因启动子区甲基化率（35．7％，10／28）高于对照组（10．0％，2／20）。两者比较差异有统计学意义（r=4．11，P〈0．05）。SLE患者疾病严重程度评分与对应的标准甲基化指数无统计学相关性（rs=-0．29，P〉0．05）。结论SLE患者CD4^＋T淋巴细胞p16基因甲基化异常，提示p16基因的高甲基化在SLE的发病中起一定作用。; 李政亮李遇梅马红顾文涛许辉刘丽萍吴蔚张雪静; 关键词：CD4阳性T淋巴细胞 DNA甲基化

两种实时定量PCR方法检测系统性红斑狼疮患者DNA甲基化状态的比较研究被引量：2: 2010年; 目的:应用两种不同方法检测系统性红斑狼疮(SLE)患者CD4^+T细胞p16基因甲基化状态,比较两种检测方法的差异。方法:采用以Taqman探针为基础的MSP法(方法1)和以SYBR Green Ⅰ为基础的MSP法(方法2)分别检测40例SLE患者和20例正常人CD4^+T细胞中p16基因启动子区甲基化状态。结果:Taqman探针方法的结果为:SLE患者CD4^+T细胞p16基因甲基化阳性率(35.7%,10/28)高于对照组(10%,2/20),两者比较差异有统计学意义(x^2=4.11,P<0.05)。SYBR Green Ⅰ方法的结果为:患者组和对照组的CD4^+T细胞的p16基因均呈高甲基化状态,应用t检验分析发现P>0.05,二者无统计学差异。结论:Taqman探针法消除了引物二聚体和非特异性扩增对试验结果的影响,提高了结果的特异性和准确性,被证明是进行DNA甲基化状态检测的可靠方法。; 李遇梅李政亮马红盛元华许辉刘莉萍陈志强; 关键词：甲基化实时定量PCR TAQMAN探针 SYBR

SLE患者外周血中性粒细胞DNA中p16基因甲基化定量研究: 2009年; 目的检测系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血中性粒细胞(PMNL)DNA中p16基因的甲基化状态及其在SLE发病中的作用。方法采用以Taqman探针为基础的实时定量PCR(Methylight)方法检测30例SLE患者和20例正常人PMNL中p16基因启动子区甲基化状态。结果SLE患者PBMC的p16甲基化阳性率为63.3%(19/30),高于对照组的35%(7/20)。两者比较差异有统计学意义(P<0.05)。SLE患者疾病严重程度评分与对应的标准甲基化指数无明显相关性。结论SLE患者PMNLp16基因甲基化异常,提示p16基因的高甲基化在SLE的发病中起一定作用。; 李政亮顾文涛马红; 关键词：中性粒细胞 P16 甲基化

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李政亮