杜朝
- 作品数:12 被引量:35H指数:4
- 供职机构:河北科技大学生物科学与工程学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金河北省自然科学基金河北省高等学校科学技术研究指导项目更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学农业科学历史地理更多>>
- 聚谷氨酸对小鼠钙吸收的影响被引量:4
- 2014年
- 为获取γ-PGA高产突变株,确定聚谷氨酸对钙溶解性和对小鼠体内钙吸收的影响。使用紫外照射纳豆芽孢杆菌诱导突变,根据形态特征变化筛选、培养突变株。分离纯化不同突变株的γ-聚谷氨酸(γ-PGA)并测定产量。筛选出γ-PGA高产的突变株并测定其遗传稳定性。测定γ-PGA在体外和体内对钙溶解性的影响以及γ-PGA对小鼠骨矿物质含量的影响。筛选出了具有稳定遗传性的γ-PGA高产突变株Z-29,其γ-PGA的产量大于18 g/L。结果表明,在体外,γ-PGA能促进钙的溶解性;在体内,γ-PGA也能促进小鼠小肠钙的吸收,并能增加小鼠骨钙和骨磷的含量。筛选出了纳豆芽孢杆菌γ-PGA高产的突变株,证明了γ-PGA在体内外都能增加钙的溶解性,这为更深入地研究γ-PGA的功能和生产应用提供了依据。
- 玉蕾叶孙洪敏杜朝孙国杰
- 关键词:聚谷氨酸钙小鼠
- 剪接因子SRSF7表达对肺癌细胞增殖及转化影响被引量:2
- 2019年
- 目的丝氨酸/精氨酸富集(serine/arginine-rich,SR)蛋白是重要的剪接因子家族,在剪接、mRNA出核、稳定性和翻译等RNA代谢过程中发挥调控作用。已有研究发现,SR蛋白家族中很多成员在不同肿瘤类型中存在异常表达。前期研究发现SRSF7蛋白在肺癌组织中表达上调,本研究旨在探究SRSF7表达对肺癌细胞增殖及转化的影响及机制。方法免疫组织化学方法检测SRSF7蛋白在肺癌组织中的表达。采用高表达SRSF7慢病毒感染肺上皮细胞BEAS-2B,建立稳定过表达SRSF7的细胞系;SRSF7shRNA慢病毒感染肺癌细胞A549,建立敲低表达SRSF7细胞系。MTS实验检测稳定细胞系增殖变化,软琼脂集落形成实验检测其细胞转化能力,蛋白免疫印迹技术检测与细胞增殖及转化密切相关的mTOR信号通路中p-S6K蛋白表达变化。结果 SRSF7蛋白在肺癌组织中表达(7.18±2.84)高于癌旁正常组织(3.77±1.80),t=6.333,P<0.001。BEAS-2B细胞稳定过表达SRSF7后,SRSF7蛋白表达升高、细胞增殖能力升高(n=3,P<0.05),克隆形成数显著增加,t=12.85,P=0.006。A549细胞稳定敲低表达SRSF7后,SRSF7蛋白表达下降、细胞增殖能力明显降低(n=3,P<0.01),克隆形成数显著减少,F=13.58,P=0.005 9。SRSF7能够增强mTOR信号通路下游靶点S6K的磷酸化水平。结论 SRSF7在肺癌组织中高表达,上调表达SRSF7能够促进正常肺上皮细胞增殖和转化,下调表达SRSF7能够抑制肺癌细胞增殖和转化,同时过表达SRSF7能够激活mTOR信号通路。剪接因子SRSF7与肺正常细胞和肺癌细胞增殖及转化密切相关,为肺癌治疗提供潜在靶点和研究依据。
- 付育何天柳王英泽仇燕杜朝
- 关键词:肺肿瘤细胞增殖细胞转化MTOR信号通路
- 生肌因子Myogenin和Myf5真核双表达载体的构建及效果检测被引量:1
- 2014年
- 为研究生肌因子如Myogenin和Myf5在调控肌特异基因表达时的作用机制,将这2个因子共转染非肌细胞,为确保转染效果,依次将这2个因子的编码序列克隆在双表达载体pVITRO2上。测序结果显示,克隆到载体的myogenin和Myf5编码区序列正确;初步的功能检测表明,它们都能有效地激活各自的靶基因。
- 杜朝孙洪敏王英泽孙国杰
- 一种中药复方对小鼠脾脏淋巴细胞PD-1/PD-L1表达的影响被引量:9
- 2019年
- 为了探讨中药复方对小鼠脾脏淋巴细胞PD-1/PD-L1的表达情况,以及CD3^+CD4^+和CD3^+CD8^+T淋巴细胞比例的影响,采用传统熬制中药的方法得到中药复方提取液,按低、中、高3个浓度对小鼠灌胃给药(1次/d),2周后,采用脑脊髓脱臼法处死小鼠,利用Real-time PCR和流式细胞仪检测脾脏PD-1/PD-L1的表达情况以及淋巴细胞亚型的变化。结果表明,随着中药提取液浓度的增加,脾脏淋巴细胞PD-1的表达显著降低,而PD-L1的表达无显著变化;CD3^+CD4^+型和CD3^+CD8^+型T淋巴细胞的比例均显著增加。所研制的中药复方能抑制淋巴细胞PD-1的表达,激活免疫辅助细胞和效应细胞,有望应用于抗肿瘤的免疫治疗。
- 王英泽曹晴晴王晨晨刘桂沅杜朝
- 关键词:细胞免疫学中药复方T淋巴细胞PD-1/PD-L1
- 基于肿瘤相关巨噬细胞为靶点的纳米载药体系在癌症治疗中的研究进展被引量:1
- 2021年
- 肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)在肿瘤微环境中浸润丰富,对肿瘤转移、血管生成、免疫逃逸能产生重要影响。因此,靶向TAMs的免疫疗法成为了癌症治疗的热点。然而,常规的TAMs靶向药物存在滞留时间短、药物富集差和耐药等问题。为克服这些缺陷,人们开始将目光投向新兴的纳米生物技术。纳米颗粒具有独特的理化性质,在药物输送、诊断成像等方面均取得了重要进展,故靶向TAMs的纳米载药体系为肿瘤免疫治疗提供了新的思路。本文综述了TAMs在肿瘤微环境中的作用及其促肿瘤机制,介绍了纳米药物在诱导TAMs极化、纳米药物递送、靶向TAMs进行肿瘤成像及阻止TAMs在肿瘤内募集等方面的研究进展,为纳米技术应用于肿瘤免疫治疗提供参考。
- 王晨晨杜朝郭学玲张曦月王英泽
- 关键词:肿瘤相关巨噬细胞纳米药物肿瘤微环境
- 羧基化单壁碳纳米管通过Fas/FasL通路影响肿瘤细胞的免疫逃逸
- 羧基化碳纳米管和羧基化碳70对B16细胞和RAW细胞的毒性均较小。基于MTT手段,我们筛选出了纳米颗粒影响细胞无毒的最高浓度,羧基化碳纳米管的处理浓度为:1,0.5,0.1μg/ml;羧基化碳70的处理浓度为:20,10...
- 王英泽杜朝孙国杰付育
- 关键词:羧基化碳纳米管FAS/FASL免疫逃逸
- 文献传递
- 简易型同源重组载体pAmpR-NeoR的构建和效果检测
- 2017年
- 为了构建能够灵活用于CRISPR/Cas9系统进行基因编辑的供体质粒,利用pcDNA3.1(+)-HA-His为模板,分别扩增了其AmpR-ori片段和NeoR片段,然后连接,构建了一个简易型同源重组载体pAmpR-NeoR。载体的正选择标记NeoR基因两侧分别引入了BamHⅠ和XhoⅠ作为克隆位点,用于左、右同源臂的克隆。利用这一载体,构建了针对小鼠FasL基因的供体质粒。结果显示靶序列发生基因编辑。pAmpR-NeoR以同尾酶作为多克隆位点,这使其具有良好的扩展性、灵活性和序列通用性,便于根据需要进一步改造,以满足具体试验的不同需求。
- 王英泽王巧兰曹晴晴付育刘畅王晨晨杜朝
- 关键词:同尾酶
- 番茄灰叶斑病抗病基因Sm分子标记的建立被引量:3
- 2019年
- 以抗病纯合体(Sm/Sm)、抗病杂合体(Sm/sm)和感病纯合体(sm/sm)番茄为试验材料,以提取的基因组DNA为模板,根据与抗病基因Sm紧密连锁的RFLP标记设计特异引物进行PCR扩增,对扩增产物进行序列分析寻找酶切位点,采用限制性内切酶酶切的方法,创建新的与番茄灰叶斑病抗病基因Sm紧密连锁的CAPS标记,以期为今后番茄抗病育种工作提供技术支撑。结果表明:创建的T050标记稳定、可靠,是一个共显性分子标记,可用于番茄抗病育种的辅助选择中。
- 高存宋建军杜朝
- 关键词:番茄灰叶斑病分子标记
- 河北省番茄黄化曲叶病毒的分子鉴定及序列分析被引量:7
- 2012年
- 为了对河北省发生的番茄黄化曲叶病毒病的病原进行分子鉴定,并对其病原分子的变异和进化情况进行分析。根据已知的番茄黄化曲叶病毒(tomato yellow leaf curl virus,TYLCV)基因组序列设计特异引物进行PCR扩增,对获得的特异性片段回收、克隆并测序,而后根据测序结果重新设计引物扩增病毒样品DNA-A的近全长序列,并进行同源性比较及分子系统进化分析。结果显示,利用PA1-F/R引物从采集的4个病毒样品中均扩增得到大小约为645bp的特异片段,DNA-A全长序列测定和分析发现4个病毒样品的全长为2781~2782个核苷酸,共编码6个ORFs。基因组比较发现,4个样品DNA-A与山东、上海、浙江、安徽以及日本、澳大利亚报道的TYLCV的同源性最高,均达99.0%以上,并与美洲、非洲及欧洲报道的TYLCV同属一个大的分支。研究结果表明,在河北省采集的4个病株样本均为感染了番茄黄化曲叶病毒所致,而且极有可能同属于TYLCV-Israel株系的分离物。
- 田鹏杜朝宋建军仇燕王琳珊
- 关键词:番茄番茄黄化曲叶病毒分子鉴定
- 研究生分子生物学课程双语教学探索与实践被引量:5
- 2018年
- 分子生物学发展迅速并在生命科学领域里应用越来越广泛,在生命科学领域中处于核心领导地位,是一门生命科学专业本科生与研究生的专业基础课或学位课。我们本着先进性与创新性的教学理念,结合近几年对我校生命科学领域专业研究生分子生物学教学改革的经验,对英文教材选用、教学内容优化、多元化教学方法及开放式教学等课堂实践经验进行总结,并对双语教学中遇到的问题提出了若干思考和建议。
- 张春晓杜朝
- 关键词:分子生物学双语教学课堂实践