杨园园
- 作品数：7 被引量：7H指数：2
- 供职机构：银川市第一人民医院更多>>
- 发文基金：宁夏回族自治区自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 结核分支杆菌ESAT-6重组蛋白的表达、纯化及临床诊断价值
- 2015年
- 目的构建结核分支杆菌6 k Da早期分泌性抗原(ESAT-6)表达质粒,原核表达、纯化,研究其蛋白的免疫学特性和临床诊断价值。方法将ESAT-6基因与p ET28a连接,构建重组质粒;加入诱导剂IPTG进行原核表达,亲和层析法纯化ESAT-6,Western blot法进行免疫学特性鉴定,用间接ELISA法检测结核患者血清中抗ESAT-6抗体。结果成功构建基因工程菌株高效表达质粒ESAT-6与p ET28a以及表达并纯化该重组蛋白。结论成功构建ESAT-6/p ET28a重组质粒,ESAT-6表达量高,纯化的ESAT-6有良好的抗原性。
- 杨园园张怡清丁淑琴
- 关键词：结核分支杆菌重组质粒纯化
- CTLA-4Ig体外处理血液透析患者单个核细胞对Th1/Th2、Treg/Th17免疫平衡的影响被引量：1
- 2014年
- 目的观察CTLA-4Ig体外处理血液透析患者单个核细胞对Th1/Th2、Treg/Th17免疫平衡的影响。方法银川市第一人民医院肾内科收治的20例终末期肾病患者作为观察组,同期20名健康体检者为对照组,分离获得的单个核细胞以RPMI 1640培养基调配细胞浓度为2×106个·m L-1,观察组和对照组均加入CTLA-4Ig 0.4μL(终浓度为1μg·m L-1),空白组加入等体积的细胞培养液。各组细胞经佛波酯、离子霉素和莫能新共同刺激5h后,收集细胞,用ELISA法检测两组细胞上清IFN-γ、IL-4、IL-17的水平,并用RT-PCR检测单个核细胞的Foxp3和视黄酸相关的孤核受体γt(RORγt)的mRNA表达。结果和对照组相比,观察组加入CTLA-4Ig前细胞上清IFN-γ、IL-4和IL-17水平明显升高(P<0.05),RORγτmRNA表达量明显增高,而Foxp3 mRNA表达量明显降低(P<0.05),CTLA-4Ig处理后两组上述指标差异无统计学意义(P>0.05)。观察组CTLA-4Ig处理后IFN-γ、IL-4和IL-17水平均降低(P<0.05或<0.01);Foxp3mRNA表达量明显升高(P<0.01),而RORγτmRNA表达量明显降低(P<0.01)。相关分析显示:IFN-γ、IL-4、IL-17与RORγτ/β-actin相关系数分别为0.985、0.846、0.912(P均<0.01),IFN-γ、IL-4、IL-17与Foxp3/β-actin相关系数分别为-0.983、-0.879、-0.922(P均<0.01)。结论终末期肾病患者微炎症状态下存在Th1/Th2、Treg/Th17失衡,且两者间存在明显的相关性;CTLA-4Ig处理可改善微炎症状态下Th1/Th2、Treg/Th17的失衡。
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- 关键词：CTLA-4IG
- 结核分支杆菌CFP10/pET32a重组质粒的构建、原核表达及纯化被引量：1
- 2013年
- 目的构建结核分支杆菌重组CFP10/pET32a表达质粒,原核表达及纯化重组蛋白。方法将目的基因CFP10亚克隆到pET32a表达载体,转化入大肠杆菌BL21(DE3)plysS,鉴定后以IPTG诱导表达,通过SDS-PAGE检测其表达水平,经含Ni2+的His-bind树脂柱纯化CFP10。结果菌落PCR鉴定及测序分析表明,成功构建CFP10/pET32a重组质粒;IPTG诱导表达后,融合蛋白占菌体总蛋白的40%,占裂解物上清总蛋白的72.4%,表明重组的CFP10基因能在BL21中高效表达,表达的蛋白大部分以可溶性状态存在。结论成功构建结核分支杆菌CFP10/pET32a重组质粒,CFP10获得高效表达。
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- 关键词：结核分支杆菌CFP10重组质粒纯化
- 结核分支杆菌重组蛋白rps12的结构与功能预测被引量：1
- 2012年
- 目的应用生物信息学分析软件预测结核分支杆菌重组抗原rps12的结构与功能。方法应用NCBI、Expasy等在线生物信息学网站及DNAstar、Rasmol等软件包分析预测结核分支杆菌重组蛋白rps12的二级结构、三级结构;预测主要抗原表位等。结果经预测,该蛋白分子质量约为13849.2KDa,理论等电点为11.37,有6个抗原表位,其结构域位于1-34,35-124。结论生物信息学技术在结核分支杆菌rps12重组蛋白研究中有一定的理论和参考价值。
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- 关键词：结核分支杆菌生物信息学
- 2578例泌尿生殖道感染者淋球菌感染情况分析被引量：2
- 2020年
- 目的分析在宁夏地区某医院淋球菌(NGH)感染的现状及临床特点。方法收集患者标本2578份,采用实时荧光定量PCR技术对NGH病原体的DNA定量进行检测。结果NGH病原体总阳性率为24.71%(637/2578),其中2011-2018年阳性率分别为14.98%、17.49%、27.65%、18.30%、25.38%、24.51%、31.44%、32.41%,整体呈上升趋势,差异有统计学意义。男女性阳性率分别为29.03%和9.24%,男性感染者远高于女性;21~40岁年龄段患者占73.08%。结论人群感染淋球菌日益严重,应加强宣教,规范临床抗生素治疗,降低感染率。
- 杨园园丁淑琴马苗贾伟
- 关键词：实时荧光定量PCR
- 血清乳酸脱氢酶测定在急性白血病患者中的临床意义被引量：1
- 2011年
- 目的观察急性白血病(AL)患者血清乳酸脱氢酶(LDH)的变化,探讨血清乳酸脱氢酶测定在AL中的临床意义。方法全自动生化分析仪检测正常人(对照组)和初发AL的患者(初发组),初发组患者化疗后按治疗过程及转归分为完全缓解组、复发组,观察各组的LDH值变化并进行对比。结果 AL初发组及复发组的血清LDH水平明显高于对照组(P<0.01),而治疗后完全缓解组的患者血清LDH水平下降至接近正常,与对照组血清LDH水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论检测血清乳酸脱氢酶对急性白血病的诊断有临床意义,动态监测其水平有助于判断急性白血病患者病情发展、疗效及评估预后。
- 高莉杨园园
- 关键词：白血病急性L-乳酸脱氢酶
- 结核分支杆菌phoS2重组质粒的构建、表达、纯化及生物信息学预测被引量：2
- 2014年
- 目的构建结核分支杆菌phoS2表达重组质粒、原核表达及纯化重组蛋白，并对重组蛋白进行免疫学特性的初步鉴定。方法将目的基因亚克隆到pET32a表达载体，成功构建的重组质粒双酶切鉴定并测序。加IPTG诱导表达，表达产物经SDS-PAGE鉴定后用含Ni^2＋的His-bind树脂柱亲和层析纯化phoS2，并用Westernblot对其进行鉴定。应用DNAstar等生物分析软件对该蛋白的理化特性、跨膜区域、二级结构、三维结构进行预测。结果双酶切鉴定及测序分析表明，成功构建了基因工程菌株高效表达质粒phos2／pET32a。IPTG诱导表达的SDS-PAGE鉴定结果显示，上清液中只见极少量的特异蛋白表达带，沉淀部分可见明显的特异表达带，说明phoS2主要是包涵体表达。经免疫印迹分析获得的phoS2分子质量为37953ku。生物信息学预测该蛋白分子质量为37953．1ku，理论等电点为5．75，具有1个跨膜区，位于1-19位，结构域位于1-370位。结论成功构建了结核分支杆菌phoS2／pET32a重组质粒，phoS2能够高效表达。蛋白结构功能的预测对本实验的实施及进一步的研究提供了理论依据。
- 丁淑琴徐文锦杨园园杨风琴
- 关键词：结核分支杆菌重组质粒纯化生物信息学
